进展期白癜风患者外周血淋巴细胞亚群75例检测分析

李 杨，周明伟，孙铭徽，赵 野，姜日花，贾玉玺

(吉林大学中日联谊医院 皮肤科，吉林 长春130033)



进展期白癜风患者外周血淋巴细胞亚群75例检测分析

李 杨，周明伟，孙铭徽，赵 野，姜日花，贾玉玺*

(吉林大学中日联谊医院 皮肤科，吉林 长春130033)

白癜风(Vitiligo)是一种临床常见的色素脱失性皮肤病，发病率为 0.4%-2%[1]，因其影响美观，严重影响患者的生活质量。白癜风的发病机制目前尚不十分清楚，可能与自身免疫、黑素细胞功能亢进、精神创伤、过度劳累、遗传等因素相关，为探讨白癜风患者的细胞免疫状态,本研究对75例进展期白癜风患者外周血淋巴细胞亚群进行了检测。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择2014年6月-2015年6月在吉林大学中日联谊医院皮肤科门诊诊断为进展期白癜风患者75例，其中男38例，女37例，年龄1-63岁，平均40.44±11.9(岁)。其中寻常型39例，节段型36例。对照组：为同期健康献血者62人，其中男37例，女25例，年龄21-66岁，平均41.4±12.34(岁)。患者组和健康对照组性别、年龄比较差异无统计学意义。排除标准：患有自身免疫性疾病者；近 2 个月系统使用过治疗白癜风药物者；血、尿、肝肾功能异常者；妊娠及哺乳期患者。

1.2 仪器与试剂 流式细胞仪：Cytomics FC500(Beckman Coulter，美国)，CD45/CD4/CD8/CD3抗体、CD45/CD56/CD19/CD3抗体及同型对照抗体及FACS Lysing Solution溶血素均采自Beckman Coulter公司。

1.3 方法 抽取白癜风患者及健康人外周静脉血2 ml，编号、置入EDTA抗凝管。抽取抗凝血300 μl分别放入Trucoune tube中，每个试管内100 μl。编号Trucoune tube，分别加入20 μl CD45/CD4/CD8/CD3抗体，CD45/CD56/CD19/CD3抗体，20 μl同型对照抗体。再加入500 μl溶血素。后加入3 ml PBS充分混匀后离心(1 500 rpm，5分钟)，用流式细胞仪进行检测。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 进展期白癜风患者外周血淋巴细胞比例 进展期白癜风患者与健康人对照组淋巴细胞，检测实验组CD3(66.64±9.64)、CD4(34.74±9.16)低于对照组(P=0.027，0.039)，CD8(30.88±8.25)高于对照组(P=0.040)，差异有统计学意义，结果见表1。

2.2 寻常型与节段型白癜风淋巴细胞比例 检测寻常型CD3(71.24±8.26)、CD4(38.44±9.26)高于节段型(P=0.000,0.001)，差异有统计学意义。余结果未见明显差异，结果见表2。

表1 患者组和对照组淋巴细胞亚群比较±s)

表2 寻常型与节段型白癜风患者外周血淋巴细胞亚群比较

3 讨论

研究表明，白癜风患者常伴发自身免疫性疾病，如桥本氏甲状腺炎、斑秃、糖尿病、恶性贫血等[2,3]，提示白癜风与自身免疫状态密切相关。Shin J等报道白癜风患者皮损真表皮交界处有CD4+、CD8+T淋巴细胞浸润及CD8+T细胞诱导的黑色素细胞凋亡[4-6]。成熟的T细胞一般只表达CD4+T细胞和CD8+T细胞。CD4+T细胞识别外源性抗原肽，分化的效应细胞主要为Th细胞，但也有少数CD4+效应T细胞具有细胞毒作用。CD8+T细胞识别内源性抗原肽，分化的效应细胞为细胞毒性T细胞，具有细胞毒作用，可特异性杀伤靶细胞。当患者体内T淋巴细胞受到某些抗原刺激被激活，具有识别抗原作用的CD4+T细胞分化减少，具有抑制作用的CD8+T细胞增加，导致免疫功能异常。体内Th等细胞被激活，导致相关B细胞增殖，产生抗黑素细胞自身抗体，使黑素细胞遭到破坏，从而导致白癜风的发生。

本研究对75例进展期白癜风患者外周血淋巴细胞亚群进行了检测分析，结果白癜风患者外周血CD3、CD4+T细胞降低，CD8+T细胞增高，进一步揭示了白癜风的发病与外周血淋巴细胞亚群失衡有关。另寻常型CD3+、CD4+T细胞高于节段型，CD8+T细胞未见明显差异，是否由样本量较小所致，有待于今后进一步研究。

综上，进展期白癜风患者CD3+T细胞、CD4+T 细胞降低，CD8+T细胞增高，提示白癜风的发病与细胞免疫密切相关，可为临床用药提供理论依据。

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[5]张继灵,曹碧兰,袁 伟.白癜风患者皮损中CD4+,CD8+T淋巴细胞及朗格汉斯细胞的检测[J].中国皮肤性病学杂志，2008,20(5):448.

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吉林省科技发展计划项目(20150414033GH)

1007-4287(2016)10-1731-02

2015-11-19)

*通讯作者