1例A3亚型

王 可

（吉安市中心血站，江西吉安343000）

·病例报告·

1例A3亚型

王 可

（吉安市中心血站，江西吉安343000）

疑难血型鉴定；ABO亚型；A3亚型；临床输血

临床输血配型时常常会涉及到红细胞血型、抗原-抗体反应等免疫学问题。免疫血液学是伴随着临床输血的历史而发展，是临床输血安全有效的重要保障。最近笔者接收医院患者血型正反定型不符，疑难血型鉴定申请1例，经血型血清学试验后确认为A3亚型，现报告如下。

1 病例简介

患者，男，6岁，2015年10月20日因皮肤出血点、口腔黏膜血疱就诊，接诊医生为患者申请备血，在血型检查中，发现ABO血型正反定型不一致，随后申请疑难血型鉴定。

2 血型血清学试验

2.1 试剂与方法抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1和抗-H试剂均由上海血液生物医药有限责任公司提供，A细胞、B细胞、O细胞反定型试剂红细胞均由北京金豪制药股份有限公司提供；经典试管法鉴定ABO血型，并采用微柱凝胶、吸收放散和血型物质检测等方法相结合［1］，在显微镜下观察结果。

2.2 患者血型正反定型见表1。

2.3 患者H抗原反应结果见表2。

2.4 患者放散液反应结果见表3。

2.5 吸收放散试验取1ml患者红细胞，用生理盐水充分洗涤三次后，制成压积红细胞，再与等量的抗-A血清试剂混合，4℃吸收1h，其间颠倒摇匀4次，用冰盐水在13min内洗涤轻吸打离心弃上清液反复6次后得到吸收后的压积红细胞，再加入等量的盐水混匀，至56℃水浴中轻摇1min，静置9min后离心取放散液与Ac、Oc反应，患者放散液与Ac有凝集、与Oc无凝集，表明患者红细胞有弱A抗原存在。

2.6 唾液血型物质检测唾液中检出A、H两种血型物质。

2.7 直接抗人球试验、间接抗人球试验均呈阴性。

3 讨论

当经血型血清学试验显示正反定型不一致及抗原减弱等多种表现形式时，称为ABO亚型。ABO血型亚型是表型，很多亚型具有特异性的抗原，主要是经血型血清学试验以抗原性弱为主要特征的多种表型，而经血型血清学确定的红细胞同一ABO亚型，经过抗原分子水平、糖基转移酶和基因水平等研究亦证实其存在着异质性［2］。ABO血型表型的判定，特别是对亚型的判定往往是根据与抗体反应强度、H抗原强度、吸收放散能力等血清学试验的反应格局［3］。应用血清学对ABO亚型进行分类时，正定型的凝集强度和“凝集的状态”是很重要的信息［4］。

表1 血型正反定型反应结果

表2 患者H抗原反应结果

表3 患者放散液反应结果

此患者标本血清学检测结果在室温立即离心与抗-A反应很弱，此时考虑A抗原减弱或者亚型，经多次离心后出现了3+mf，见表1。混合视野与弱凝集有时候很难区分，弱凝集仅是指肉眼看到的背景混浊，混合视野是专指在镜下可以观察到游离细胞，两者缺一不可。A3亚型红细胞最大特征为镜下呈混合视野凝集（mixed field agglutination，mf），即A3红细胞与抗-A和大多数抗-AB孵育后出现一些有数个红细胞形成的小凝集块，并被绝大部分游离的非凝集红细胞包围［5］。抗-A1试剂是用于检测A亚型的试剂，标本红细胞与抗-A1反应呈阴性，抗-AB试剂与Ax、Bx抗原会产生较强反应，常用于鉴定Ax和Bx，标本红细胞与抗-AB反应呈3+mf。表达弱A抗原的红细胞在直接离心试验中不被抗-A所凝集，必须通过吸收这种特异性抗体，再用放散的方法洗脱吸收的抗体，以此来证明弱A抗原的存在。吸收放散试验极为敏感，对试验技术的要求也较高，通常需要设置合适的对照，比较好的对照是用等量O型红细胞与待检细胞平行吸收放散，然后平行检测放散液中的抗体［4］。见表3，患者放散液与Ac有凝集、与Oc无凝集，表明患者红细胞有弱A抗原存在。H抗原的数量与个体的ABO血型相关，是A、B抗原的前身，大部分亚型H抗原会增强，AB亚型的H抗原是会减弱，而罕见孟买型、类孟买型无H抗原。根据能量守恒定律，H抗原最强，Oc作为纯阳性对照，Bc为强阳性对照，若病人细胞抗H检测反应强度在Oc、Bc之间，则亚型的可能性大，见表2，此患者抗-H结果为3+w。一般用唾液检测ABO血型物质［6］。唾液中有A和H两种血型物质。

对ABO亚型，尤其是Ax亚型因血清中常含抗-A1［7］，血交叉时应先用盐水介质试管法筛选，再用Polybene和微柱凝胶法进一步交叉验证，以选择配型相合的血液进行输注为宜。A3亚型的产生原因与遗传有关系［8］，为了解该患者A3亚型的遗传来源，可进一步做正反定型与抗-H物质检测家系调查。ABO血型基因的运用可以很好地解决血型鉴定困难问题［9］。当这些疑难血型误判时，将会使受血者发生严重的输血性溶血反应，导致急性肾功能衰竭而危及患者生命［10］。因此ABO血型鉴定的准确性是非常重要的，只有准确鉴定血型才是保证安全输血最关键的环节之一［11］。

［1］胡丽华.临床输血检验［M］.北京：中国医药科技出版社，2004，8： 54-61，151-152.

［2］Daniels G.Human Blood Groups［M］.2th ed，Oxford：Blackwell Science Ltd，2002：32-37.

［3］曾光，李凌波.一例A3亚型血型的鉴定及分析［J］.中国热带医学，2014，14（4）：506.

［4］向东.ABO亚型的检测［J］.中国输血杂志，2010，23（8）：577-580.

［5］Pipatvanichkul A，Permpikul P，Vejbaesya S，et al.Mutation of ABO gene in Thai blood donors with A3 phenotype［J］.J Med Assoc Thai，2011：94（3）：379-385.

［6］中华人民共和国卫生部.中国输血技术操作规程血站部分［M］.天津：天津科学技术出版社，1998：81-83.

［7］Henk-Brunner H.ABO（H）system［M］∥Sehenkel-Brunner H.Human blood groups chemical and biochemical basis of antigen specificity. 2nd ed.New York：Springer，2000：118-161.

［8］杨天楹，杨成民，田兆嵩.临床输血科［M］.北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1993：51-54.

［9］喻琼，苏宇清，邓志辉.异常ABO表型遗传的分子背景研究［J］.实验与检验医学，2013，31（1）：49-51+55.

［10］李效平，曹丹铭.B3亚型产妇大出血输0型血抢救1例［J］.中国输血杂志，2002，15（3）：203-220.

［11］马晓旭.1例A亚型的家系调查情况分析［J］.中国医药指南，2015，26（13）：215-216.

R457.1+1

A

1674-1129（2016）05-0699-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.059

2016-06-02；

2016-09-01）