东北华北地区部分猪场弓形虫血清抗体检测与分析

鹿双双，李奇润，荣　蓉，卢选成

［1.中国疾病预防控制中心实验动物中心，北京 昌平 102206；2.拜耳（四川）动物保健有限公司，四川 成都 610225］

东北华北地区部分猪场弓形虫血清抗体检测与分析

鹿双双1，李奇润2，荣蓉1，卢选成1

［1.中国疾病预防控制中心实验动物中心，北京 昌平 102206；2.拜耳（四川）动物保健有限公司，四川 成都 610225］

为查明东北、华北地区猪场的弓形虫流行病情况，针对该地区22个猪场的657份样本采用间接ELISA的方法进行猪弓形虫抗体检测。结果表明，猪场弓形虫阳性率100%，猪群阳性率在30%到100%之间，其中2胎以上母猪阳性率明显高于后备母猪及1胎母猪，保育猪阳性率普遍较低或为零。选择其中224个阳性猪血清利用尿素变性技术进行亲和力指数测定，测定结果说明仅有约9%的猪群为第一次弓形虫感染，大多数猪群都是多次反复感染。

弓形虫；猪；亲和力指数

弓形虫病（Toxoplasmosis）是由刚地弓形虫引起的一种人畜共患寄生虫病。弓形虫最早是由法国的Nicolle和Manceaux在梳趾鼠的肝脏单核细胞内发现［1-3］。在我国已发现猪、羊、牛、鸡等均有弓形虫感染或发病，其中以猪弓形虫感染最严重。家猫、山狮、野猫、豹、猞猁等都可产生卵囊，啮齿类动物感染弓形虫后，多数呈急性经过或导致死亡［4-8］。在我国猪弓形虫病多发生在夏秋季节，母猪易感，经产母猪和育肥猪尤为易感。猪群感染弓形虫后主要表现为：母猪流产、死胎、木乃伊胎、返情。乳猪发病急促，体温升高等。对东北、华北部分猪场进行弓形虫病流行病学调查，便于及时掌握该地区猪弓形虫病的流行情况，为综合防控提供依据。

1　材料与方法

1.1血样采集2015年4-6月，从东北和华北地区选择规模化猪场22个，其中黑龙江猪场5个，辽宁4个，河北10个，山西3个。采用前腔静脉采血的方法，每头猪采血3～5 mL，共收集657个血液样本。5 000 r/min离心5 min，收集血清，进行检测。

1.2弓形虫的血清抗体阳性率检测ELISA抗体检测试剂盒，购自深圳市绿诗源生物技术有限公司。利用间接酶联免疫吸附实验（间接ELISA）来检测猪血清中的弓形虫抗体。猪弓形虫蛋白被包被在96孔板上。样品被加在孔中，弓形虫抗体与包被的弓形虫蛋白结合，未结合的物质可被洗掉，再加上酶标二抗，洗去未结合的二抗，加上底物反应，包含猪弓形虫抗体的样品会显色。

尿素变性技术，可检测Tg-IgG抗体亲和力。宿主在初次接触抗原产生的特异性IgG的亲和力随着免疫时间的推移会逐渐升高，在包被好TOX抗原的酶标板中加入阳性猪血清，用尿素处理除去过去产生的低亲和力抗原抗体复合物，而近期产生的高亲和力抗体不受影响。IgG抗体亲和力指数（Avidity index，AI）测定目前被认为是区分原发和复发感染的较好方法。

2　结果分析

2.1不同地区猪场弓形虫血清抗体阳性率检测结果分析从表1可以看出，在4-5月份检测东北和华北地区猪弓形虫阳性率，东北地区明显低于京津冀和山西地区，这可能与东北地区气候较冷有关。

表1　不同地区猪弓形虫流行病学调查

2.2不同阶段猪群弓形虫血清抗体阳性率结果分析从表2可以看出，随着猪群年龄的增长，弓形虫感染率明显升高。在母猪的后备母猪感染率最低，经产母猪随着胎次升高感染率逐渐增大。产房仔猪感染率较低，几乎为0，保育猪感染率也较低，不足7%。

2.3亲和力指数结果分析见表3。

从表3可以看出，弓形虫IgG亲和力指数大多在50%以上，低于30%的仅有9%，说明大多数猪群都是反复感染，首次弓形虫感染的猪群比例很小，因此，要定期做好猪场弓形虫的净化工作。

表2　不同阶段猪群弓形虫感染率

表3　亲和力指数结果分析

从表4可以看出，各个阶段的猪群AI大于50%的比例明显较高，并且随着猪群年龄的增大，Tg-IgG亲和力指数高于50%的比例也越大，说明大多数猪群都存在弓形虫的反复感染。

表4　不同阶段猪群亲和力指数结果

3　讨论

由于东三省和华北地区在4-6月份气温偏低，因此，此次弓形虫病流行病学调查结果阳性率较文献报道要低。这可能与气候和地区有一定关系，但猪场阳性率表明所调查猪场均存在弓形虫感染。使用过磺胺间甲氧嘧啶的猪场弓形虫阳性率明显低于其他猪场。

在临床实践中，很多猪场猪瘟等免疫效果不理想可能与弓形虫的亚临床感染造成猪免疫抑制有关。亲和力指数结果表明，经产母猪大多数都是弓形虫反复感染，因此在经产母猪上要使用磺胺类药物定期净化弓形虫。亲和力指数30%是一个很重要的指标，低于30%说明弓形虫抗体亲和力较低，为首次感染，因此，在这些猪群进行预防性用药也是有必要的。本试验初步掌握了东北、华北地区猪场弓形虫病的流行情况，为猪弓形虫病的综合防控提供了依据。

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［2］蒋业慧，王正荣，张艳艳，等.北疆部分地区奶牛弓形虫血清学调查［J］.中国兽医杂志，2015，51（9）：56-57.

［3］陈永军，王权，蒋蔚，等.上海市猪弓形虫流行病学调查［J］.中国动物传染病学报，2010，18（5）：54-58.

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［7］斯特劳B E.猪病学 ［M］.赵德明，张中秋，沈建忠译.8版.北京：中国农业大学出版社，2000：681-685.

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S852.72+3

B

0529-6005（2016）04-0107-02

2015-11-12

卫生计生公益性行业基金生物实验中的人畜共患病安全问题及其对策研究（201302006）

鹿双双（1989-），女，研究实习员，硕士，从事兽医以及实验室管理工作，E-mail：lsscau@126.com

卢选成，E-mail：luxc@chinacdc.cn