河池地区乙型肝炎病毒基因型分布的相关性研究

唐毓凡韦桂宁

·论著·

河池地区乙型肝炎病毒基因型分布的相关性研究

唐毓凡1★韦桂宁2

目的分析河池地区乙型肝炎病毒基因分型分布情况及与乙型肝炎病毒DNA定量、乙型肝炎E抗原定量检测的各项指标间的相关性。方法对临床154例乙型肝炎病毒DNA阳性患者，采用PCR-反向点杂交法检测乙型肝炎病毒基因分型；采用实时荧光定量PCR法定量检测乙型肝炎病毒DNA载量；采用时间分辨法进行乙型肝炎E抗原定量检测；分析彼此间的相关性。结果经统计，B型83例，占53.9％；C型68例，占44.16％；非B非C型共3例，占6.2％；男女性患者基因分型的构成比差异无统计学意义。C型乙型肝炎病毒DNA水平、C型乙型肝炎肝炎E抗原定量测定阳性均高于B型。结论河池地区乙型肝炎病毒基因型以B型为主，C型次之；C型乙型肝炎病毒DNA含量、乙型肝炎E抗原定量测定阳性均高于B型。

乙型肝炎；基因分型；DNA；乙型肝炎E抗原

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是一种嗜肝DNA病毒，可引起人类急、慢性肝炎，是导致肝硬化和肝癌的主要原因之一，严重危害人类健康。根据HBV的S区基因序列差异或者全基因核苷酸序列的异质性，HBV可区分为A～H 8种基因型［1-3］。研究发现，HBV基因型具有地域分布的特点，且与临床疾病谱、预后判断、疫苗预防及抗病毒治疗效果均有密切相关性［4-5］。本研究通过对河池地区154例HBV感染患者的标本进行基因分型检测、乙型肝炎病毒DNA和乙型肝炎两对半定量，分析河池地区HBV基因型的分布与各项检测指标之间的相关性。

1 资料与方法

1.1 标本来源

选择2014年1至12月到都安县人民医院就诊的154例HBV感染患者，其中男性患者96例，女性患者58例，年龄15～65岁，平均（32.5±1.2）岁，均为河池地区居民，临床诊断参照《慢性乙型肝炎防治指南》中的诊断标准［6］，入选病例均排除合并甲、丙、丁、戊等其他肝炎病毒感染，且进行HBV DNA定量、乙型肝炎E抗原定量检测。

1.2 试剂与仪器

乙型肝炎病毒基因分型及DNA定量检测试剂购自中山大学达安基因股份有限公司；乙型肝炎E抗原定量检测试剂购自广州市达瑞生物技术股份有限公司；所使用的仪器包括美国ABI 7500型全自动实时荧光定量PCR仪、达安基因全自动核酸分子杂交仪、广州市达瑞生物技术股份有限公司DR6608仪。

1.3 观察指标

分析HBV基因亚型分布与HBV DNA定量、乙型肝炎表面抗原以及乙型肝炎E抗原等检测指标之间的相关性。

1.4 统计学分析

采用SPSS 16.0统计学软件进行分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 基因分型检测结果

154例河池地区的乙型肝炎感染患者的样本中，B基因型83例，占53.9％，C基因型68例，占44.16％，非B或C基因型3例，占1.94％。患者HBV基因分型构成比差异与性别无相关性（P＞0.05），见表1。

2.2 基因分型与HBV DNA定量检测分析

对B型和C型HBV DNA定量检测的结果表明，B型HBV DNA在（1.09×103～1.00×107）IU/m L之间，均值为3.12×105IU/m L，C型HBV DNA在（1.95×103～8.98×107）IU/m L之间，均值为1.51×106IU/m L，HBV DNA定量与HBV基因分型存在一定的相关性。与B型HBV感染患者相比，河池地区的C型HBV感染的患者，HBV DNA定量检测结果均值更高。

表1 河池地区乙型肝炎感染患者基因亚型分布情况Table 1 The genotype distributions of HBV patients in Hechiarea

2.3 基因分型与乙型肝炎E原定量检测分析

对B型和C型乙型肝炎E抗原定量检测结果进行统计分析，结果表明，与B型HBV感染患者相比，C型HBV感染患者的乙型肝炎E抗原检测值≥0.1 PEIU/m L为主（根据测试试剂盒的标准），差异具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 B型和C型HBV感染患者乙肝炎E抗原定量结果Table 2 The effectof genotypes B and CHBV in quantitative detection of E antigen

3 讨论

乙型病毒性肝炎是由HBV引起的，以肝脏炎性病变为主。广泛流行于世界各国，部分患者可转化为肝硬化或肝癌。因此，它已成为严重威胁人类健康的世界性疾病，也是我国当前流行最为广泛、危害性最严重的一种疾病。在不同的地区，乙型肝炎病毒基因亚型的分布也不同，在不同人种中的流行及传播方式同样存在很大差异，除了和生活习惯、人体免疫遗传特征等因素明显相关外，与乙型肝炎病毒本身的生物学基因型和基因变异等也呈一定程度的相关性［7］。我国乙型肝炎病毒以A、B、C、D 4种HBV基因亚型为主，不同地区的基因亚型存在较大的差异。北方地区以C型为主，约占86.6％［8］；南方地区则以B型为主，C型则占很小一部分［9-10］。本次统计结果中，B型HBV感染占53.9％，C基因型68例，占44.16％。

不同基因型的乙型肝炎病毒具有不同的致病性及流行特征，故了解患者乙型肝炎病毒基因分型具有重要的临床意义。本研究结果表明，河池地区C型乙型肝炎病毒DNA定量测定值较B型高，表明该地区C型HBV DNA复制更加活跃。目前，乙型肝炎发病机制中乙型肝炎病毒的复制状态与其基因型之间的关系尚无定论，但乙型肝炎病毒诱导的免疫反应及血清中高拷贝的乙型肝炎病毒是其发病危险因素之一［11］。文献报道，B型乙型肝炎病毒较C型乙型肝炎病毒更容易通过前C区变异诱导E抗原的转化，转归及预后较C型好［12］。在本研究中，通过对154例患者乙型肝炎E抗原定量检测显示，C型乙型肝炎E抗原定量测定阳性均高于B型，C型乙型肝炎病毒复制较活跃，易形成持续的病毒血症，但不易发生E抗原的转化。研究表明，抗乙型肝炎病毒的药物治疗，尤其是干扰素治疗的临床疗效与HBV DNA的载量水平直接相关［13-16］。HBV DNA载量低，则干扰素治疗疗效好；HBV DNA载量高，则干扰素治疗疗效差。

本研究统计分析2014年河池地区乙型肝炎病毒基因型的分布情况及与乙型肝炎病毒DNA定量、表面抗原各项指标的关系，对本地区乙型肝炎病毒各基因型的特点做了初步的研究，对进一步明确乙型肝炎病毒的分子流行病学特点、阐明发病机制和临床治疗的疗效等都具有重要意义。

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Distribution and correlation research of hepatitis B virus genotypes in Hechi area

TANG Yufan1★，WEIGuining2
（1.Department of Clinical Laboratory，the People’s Hospital of Du’an，Hechi，Guangxi，China，530700；2.Guangxi Institute of Chinese Medicine＆amp;Pharmaceutical Science，Nanning，Guangxi，China，530022）

Objective To investigate the distribution of hepatitis B virus（HBV）genotypes in patients with HBV in Hechiarea，and explore the relationship of HBV genotype and HBV quantitative analysis. Methods HBV genotypes from 154 patients in Hechiarea were detected by polymerase chain reaction-reverse dot blot，the level of HBV-DNA by fluorescent quantitative PCR，and the level of HBV E-antigen by time resolved fluoro-immunoassay.Results Of all patients with HBV，53.9％（83/154）were type B，44.2％（68/ 154）were type C and 1.6％（3/154）were type B/C.There were no significant differences in the constituent ratio of HBV in gender.The level of DNA，the content of E antigen in genotype C were significantly higher than those in genotype B.Conclusion Genotype B，C and B/C of HBV existed in Hechi area.The genotype C was the major genotype，followed by genotype C.The level of DNA in genotype Cwas significantly higher than that in genotype B.

Hepatitis B virus；Genotypes；DNA；HBV E-antigen

广西壮族自治区卫生厅中医药科技专项（GZZJ13-15）

1.都安县人民医院检验科，广西，河池530700 2.广西中医药研究院，广西，南宁530022

★通讯作者：唐毓凡，E-mail：1933730679@QQ.com