11 530例佛山市妊娠晚期妇女B族链球菌感染情况的回顾性分析

庄锡伟孟霞 杨康 梁伟达

·论著·

11 530例佛山市妊娠晚期妇女B族链球菌感染情况的回顾性分析

庄锡伟★孟霞 杨康 梁伟达

目的回顾性分析佛山市妊娠晚期妇女感染B族链球菌（group B streptococcus，GBS）的相关因素，为孕妇人群做好GBS早期干预治疗提供依据。方法选取2015年我院11 530名进行常规产检的妊娠晚期妇女，采集阴道分泌物标本11 530份，直肠分泌物标本11 427份，采用聚合酶链反应方法测定阴道和直肠分泌物标本中GBS特定基因（CAMP）以此作为判定GBS阳性的标准，并对检品的来源、检体年龄、检品收集时间等进行回顾性分析，以评价妊娠晚期GBS感染情况。结果不同标本阳性检出率结果显示，11 530份阴道分泌物标本中，GBS阳性的有818例，阳性率为7.09％，11 427份直肠分泌物标本中，GBS阳性的有832份，阳性率为7.28％，两者阳性检出率无显著性差异（P＞0.05）；阴道和直肠分泌物联合检查与单独检查阳性率结果显示，联合检查的11 427份标本中，GBS阳性标本1 160份（直肠与阴道分泌物同时阳性482份，直肠或阴道分泌物单独阳性678份），阳性率为10.15％，与阴道或直肠分泌物单独检查比较有统计学差异（P＜0.01）。不同年龄的标本阳性率结果显示，35～39岁年龄组的标本阳性率最高，与其他比较，差异无显著性（P＞0.05）。不同季节检查的样本阳性率结果显示，夏季收集的样本阳性检出率略高于其他季节，但各季节间比较无显著差异（P＞0.05）。结论孕妇年龄、标本采集季节因素对妊娠晚期孕妇GBS阳性率影响不大，阴道分泌物和直肠分泌物联合检查更有利于临床及时的诊治。

B族链球菌；妊娠晚期；回顾性分析；GBS检查

B族链球菌（group B streptococci，GBS）又称无乳链球菌，属于链球菌属B血清群，为妇女生殖道常见的兼性厌氧菌，感染率达15％～35％，常与念珠菌感染共存，属于条件致病菌，是宫内感染的主要原因［1-2］。感染率随人种、地域、年龄等的差异而不同，孕妇、新生儿发病率高［3-5］。新生儿感染GBS可引起新生儿败血症、肺炎等严重疾病，孕妇感染时可引起早产、流产、胎儿发育不良、胎膜早破、绒毛膜羊膜炎及产后子宫内膜炎等［6］，本研究对我院11 530名妊娠晚期妇女的11 530份阴道分泌物和11 427份直肠分泌物标本GBS检验结果进行回顾性分析，为孕妇人群做好GBS早期干预治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

检测试剂盒由泰普生物科学（中国）有限公司提供，目的基因来自美国菌种保藏中心的原始菌株，主要组成成分为反应液（探针、引物、dNTP等）、Taq DNA Polymerase、提取固形物、内参照、清洗液、阴性对照、阳性对照；仪器为美国ABI 7300荧光定量PCR仪。

1.2 方法

1.2.1 研究对象

选取2015年我院11 530名进行常规产检的妊娠晚期妇女（孕34～37周），年龄为15～49岁，平均年龄27.94岁，共收集到11 530份阴道分泌物和11 427份直肠分泌物标本。

1.2.2 标本采集

由资深医师用无菌拭子自受检者生殖道部位1/3处沿壁旋转取得阴道分泌物样本，自肛门括约肌以上约2～5 cm处沿肠壁轻轻旋转取得直肠分泌物；要求受检者取样前1周内未使用任何抗生素，取样部位未使用过栓剂和洗液，取样时不得使用石蜡油。

1.2.3 检验方法

采用荧光定量PCR法，通过聚合酶链式扩增及荧光标记探针，检测GBS特定基因（CAMP），从而判断GBS的存在。严格按照试剂盒说明书进行操作，GBS检测荧光素为FAM，内参照荧光素为Texas Red，反应体积50μL，循环参数：37℃2 m in；94℃2m in；94℃20 s～55℃45 s，10个循环；94℃20 s～55℃45 s，30个循环，收集荧光信号。

1.2.4 结果判断

样本（FAM）Ct值≤23，且有较好的对数增长曲线，判读为阳性；样本（FAM）Ct值≥30或“Undet”，内参照（Texas Red）Ct值＜30，且有较好的对数增长曲线，判读为阴性。样本（FAM）23＜Ct值＜30，复查或重新采样检测。

1.3 结果分析

采用SPSS 19.0进行统计学分析，采用χ2检验比较各组间样本阳性率差异，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄孕妇GBS阳性率比较

妊娠晚期妇女各年龄组GBS阳性率结果显示，35～39岁组最高，与其他组比较差异无显著性（P＞0.05），结果见表1。

2.2 不同季节检查的阳性率比较

在不同季节检查GBS的阳性率结果显示，夏季检出的阳性率最高，秋季的最低各季节组间比较差异均无统计学意义（P＞0.05），结果见表2。

2.3 不同标本检查的阳性率比较

11 530例妊娠晚期妇女收集的标本结果显示，阴道分泌物标本11 530份，GBS阳性的标本818份，阳性率为7.09％；直肠分泌物标本11 427份，GBS阳性的标本832份，阳性率为7.28％；两者比较差异无统计学意义（χ2值=0.27，P=0.60）。

2.4 联合检查与单独检查的阳性率比较

参与检查的孕妇为11 530人中有11 427人同时检查直肠分泌物及阴道分泌物，阳性1 160人（直肠与阴道分泌物同时阳性482人，直肠分泌物单独阳性350人，阴道分泌物单独阳性328人），阳性率10.15％，与单独检查直肠或阴道分泌物组比较，有统计学差异（χ2=58.80，χ2=67.72，P＜0.01）。

表1 各年龄段妊娠晚期妇女阳性率比较Table 1 Comparison of positive rate of pregnant women in different age groups

表2 不同季节检查阳性率比较Table 2 Comparison of positive rates in different seasons

3 讨论

GBS已经被证实为围产期母婴感染的主要致病菌之一［7-8］，染菌孕妇易发生围生期严重的感染性疾病，且易导致早产、胎儿发育不良、体重轻、胎膜早破、晚期流产、宫内感染及产褥感染等疾病发生，是独立存在的绒毛膜羊膜炎的危险因素，危险性与生殖道染菌程度呈正比。GBS阳性可引起产妇产后子宫内膜炎、盆腔炎乃至败血症的发生率明显升高。新生儿可通过垂直感染引发肺炎和败血症等急性感染性疾病，且预后较差。因此，有必要将GBS筛查纳入妊娠晚期孕妇的常规检验项目，对阳性患者采取积极有效的治疗措施，通过良好的GBS管理［9］，有效降低孕妇的感染率，降低早产、宫内感染等产前不良事件发生。通过筛查可对阳性孕妇的新生儿出生后由新生儿科提早介入，采取主动观察追踪措施，有效降低新生儿急性感染所造成的严重不良后果。

本研究结果显示，35～39岁受检者阳性率最高（直肠分泌物阳性率8.62％，阴道分泌物8.24％），40岁以上受检者中阳性率最低（直肠分泌物阳性率5.59％，阴道分泌物5.82％），结果与黄晓玲等［10］研究结果一致，这可能与雌激素水平、性活动频次有关；季节对GBS的阳性率影响不大，提示GBS感染无季节性差异；直肠分泌物标本阳性率稍高于阴道分泌物标本，但两者无统计学差异，提示采样部位对GBS阳性率影响不大，GBS的检出率受到多种因素的影响，例如取材部位、检测方法等，因此有学者建议，应从宫颈、阴道及肛周等多个部位同时取材［13］，本研究结果表明联合检验直肠分泌物及阴道分泌物标本阳性检出率明显高于单独检验直肠分泌物或阴道分泌物标本，提示联合检查在指示临床干预方面优于单项检查。

妊娠妇女GBS阳性率在国外不同地区的报道差异很大，如美国为2.0％～29.0％，韩国为13.0％［11］。我国目前孕妇GBS检查目前在大部分地区暂未作为常规检查，未见大标本量的流行病学资料报道。GBS的检验方法有细菌培养、抗原抗体测定、核酸探针检测、荧光原位杂交法、PCR及革兰染色法等，细菌培养是最经典的检验方法，但检验时间长，操作繁琐，抗原抗体测定虽然快速，但有很高的假阴性率和假阳性率；核酸探针检测、荧光原位杂交法、PCR等分子生物学检验方法敏感性高，检测时间短，结果准确，特别是荧光定量PCR方法已被认为是检测GBS的快速、准确性高、敏感性高的方法之一。本研究采用聚合酶链式反应方法，灵敏度高，特异性强，结果显示，佛山市妊娠晚期妇女GBS阳性率为10.15％，明显低于北京，高于秦皇岛、桂林、上海、南京、中山等地［10，12-16］。

PCR方法具有快速检测，灵敏度高，特异性强等特点，杨坤祥等［17］研究表明，荧光PCR法的阳性检出率明显高于传统的细菌培养法及显色培养法，同时采用阴道及直肠分泌物标本联合检验方法，明显提高筛查阳性检出率，避免漏诊，可作为妊娠晚期GBS筛查检验方法进行推广，为临床早期进行治疗，预防胎膜早破、早产、晚期先兆流产治疗依据，降低不良妊娠发生率，通过加强阳性孕妇新生儿的观察追踪，预防败血症、脑膜炎及肺炎的发生，降低新生儿死亡率。

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Retrospective analysis of 11 530 cases of group B streptococcus infection in the late pregnancy women in Foshan

ZHUANG Xiwei，MENG xia，YANG Kang，LIANG Weida
（Department of Clinical Laboratory，Central Hospital of Foshan Chancheng District，Foshan，Guangdong，China，528031）

Objective To analyze the related factors of group B streptococcus（GBS）infection，and to provide evidence for early intervention treatment of GBS in late pregnancy women in Foshan.Methods The samples were obtained from 11 530 vaginal secretions and 11 427 rectal secretions.Polymerase chain reaction method was used to detect the GBS specific gene（CAMP）to diagnose GBS infection in 11 530 women in the third trimester in our hospital in 2015.A retrospective analysis was made on the origin of the samples，the age of the pregnant women and the seasons，to evaluate the GBS infection in the third trimester of pregnancy. Results The positive rate of different samples had no significant differences（P＞0.05），vaginal secretion samples were 7.09％（818/11 530），and rectal secretion samples were 7.28％（832/11 427）.Vaginal and rectal secretions joint examination positive rate was 10.15％，higher than either the vaginal or rectal secretions when they were individually examined（P＜0.01）.The positive rate of samples of different ages showed that the positive rate of samples from 35 to 39 years old was the highest，and there were no significant differences（P＞0.05）.The positive rate of sample examination in different seasons showed that summer samples positive rate is slightly higher than other seasons，but the seasons were not significantly different（P＞0.05）.Conclusion The age of pregnant women and seasonal factors have little effect on the positive rate of GBS in pregnant women. The combined examination of vaginal and rectal secretions is more favorable for clinical diagnosis and treatment.

Group B streptococcus；Late pregnancy；Retrospective analysis；GBS examination

佛山市禅城区中心医院检验科，广东，佛山528031

★通讯作者：庄锡伟，E-mail：zhuang821007@163.com