复方抗溃混悬液Ⅱ的鉴别研究

叶根深，忻志鸣，葛德洲，姚莉，邓祖磊

（1.安徽省蚌埠市第一人民医院药学部，安徽蚌埠233000；2.安徽省蚌埠市药品食品检验中心，安徽蚌埠233000）

复方抗溃混悬液Ⅱ的鉴别研究

叶根深1，忻志鸣1，葛德洲2，姚莉2，邓祖磊2

（1.安徽省蚌埠市第一人民医院药学部，安徽蚌埠233000；2.安徽省蚌埠市药品食品检验中心，安徽蚌埠233000）

目的研究复方抗溃混悬液Ⅱ（CAUSⅡ）的鉴别方法,为建立、完善医院内制剂质量标准提供依据。方法以薄层色谱（TLC）法对制剂中黄芩、黄芪进行定性鉴别；并通过外观性状及紫外光谱（UV）法检测诺氟沙星，对CAUSⅡ与复方抗溃混悬液（CAUS）进行鉴别。结果CAUSⅡ中黄芩、黄芪经TLC法鉴别，斑点清晰，分离度好，相应缺味阴性对照不形成干扰。CAUSⅡ呈橙黄色，UV法273 nm波长处无吸收；CAUS为棕黄色，UV法273 nm波长处有吸收。结论CAUSⅡ中黄芩、黄芪可用TLC法鉴别检出；与CAUS相比，CAUSⅡ可通过外观颜色及UV法鉴别。

复方抗溃混悬液Ⅱ；薄层色谱法；鉴别；黄芩苷；黄芪甲苷

复方抗溃混悬液Ⅱ（CAUSⅡ）是基于医院既往院内制剂复方抗溃混悬液（CAUS）而改良的自制制剂，处方中去除了诺氟沙星，仍含有黄芩、黄芪等组分，用于感染性、非感染性创面［1］及拔甲术后创面［2］，临床疗效佳。本研究中以薄层色谱（TLC）法对制剂中黄芩、黄芪进行了定性鉴别，并通过外观性状及紫外光谱（UV）法检测诺氟沙星，以鉴别CAUSⅡ与CAUS，为建立、完善医院内制剂质量标准提供依据。现报道如下。

1　仪器与试药

1.1仪器

薄层层析硅胶G（青岛海洋化工厂分厂）；聚酰胺薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）；TU-1901型双光束紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；WP-95-1型三用紫外分析仪（温州奥利生物医学仪器厂）；pHS-3C型pH计（上海雷磁仪器厂）。

1.2试药

黄芩苷对照品（供含量测定用，批号为110715-201117），黄芪甲苷对照品（供含量测定用，批号为110781-200512），诺氟沙星对照品（供含量测定用，批号为130450-201206），均由中国食品药品检定研究院提供；水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯；供试品CAUSⅡ，缺味阴性对照样品均为我院自制；CAUS（我院自制），作为鉴别性状及检测诺氟沙星时的对照品。

2　方法与结果

2.1TLC法鉴别黄芩［3-4］

取本品10 mL，加甲醇30 mL，加热回流30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用盐酸调节pH至1～2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20 mL，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液；同法制备未加入黄芩的缺味阴性对照品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照2010年版《中国药典（一部）》附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各3 μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，而黄芩缺味阴性对照品溶液无干扰。详见图1。

2.2TLC法鉴别黄芪［5-6］

取CAUSⅡ20 mL，加甲醇40 mL，加热回流4 h，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100～200目，8 g，内径12 mm）上，用40%甲醇100 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水25 mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次25 mL，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次25 mL，弃去水液，正丁醇蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液；同法制备不含黄芪的缺味阴性对照品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照2010年版《中国药典（一部）》附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各8 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；黄芪缺味阴性对照品溶液无干扰。详见图2。

图1　黄芩薄层色谱图

图2　黄芪薄层色谱图

2.3CAUSⅡ与CAUS的鉴别

2.3.1性状

相同试验条件下，考察3批供试品CAUSⅡ、对照品CAUS的性状。CAUSⅡ呈橙黄色，CAUS为棕黄色。两者均为黏稠状混悬液，久置后可明显分层，但无结块；相同力度轻轻振摇5～10 s后均可再次恢复为混悬液；均具有芳香气味。两者除颜色有差异外，上述其他性状无明显不同。

2.3.2UV检测诺氟沙星［7］

取CAUSⅡ1 mL，精密加入0.1%氢氧化钠溶液100 mL，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL，置50 mL容量瓶中，加0.1%氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀；同法制备对照品。参考2010年版《中国药典（二部）》“诺氟沙星乳膏”项下紫外光谱鉴别法；不含诺氟沙星的CAUSⅡ在此条件下无吸收，而对照品溶液（含诺氟沙星的CAUS）在273 nm波长处有最大吸收。详见图3。

图3　光谱扫描曲线图

3　讨论

CAUSⅡ临床疗效良好，但缺乏具体的质量标准，不利于质量控制及作用机制等方面的深入研究。定性鉴别研究是开展药品质量控制的重要内容［8］，常采用薄层色谱法［9］；而黄芩、黄芪具有清热燥湿、凉血解毒［10］及益卫固表、托疮生肌［11］等作用，是CAUSⅡ中的重要组分；故本研究中结合文献资料，通过薄层色谱法对两者进行了鉴别研究。

薄层色谱法检测黄芩时，与文献［3-4］中报道所用展开剂不同，本试验中采用了乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1），能使供试品及各对照品良好分离；鉴别黄芪时，则选用了三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）为展开剂，这与文献［5-6］方法也不尽相同；可能与具体供试品、硅胶G薄层板、试验室温湿度条件差异等因素有关。本研究结果证实，应用上述方法，能依次检出CAUSⅡ中的黄芩、黄芪，且相应缺味阴性对照品不形成明显干扰，达到了有效鉴别的目的，方法可行、易于操作。

能否恢复均匀混悬状态是混悬剂的重要属性之一。本研究结果显示，CAUSⅡ久置后可分层，但无结块，且经轻微振摇后可迅速恢复为混悬液，符合要求，便于临床应用。

CAUSⅡ是基于CAUS改良后的制剂，本研究中在考察CAUSⅡ性状特征、完善质量标准的同时，对两者进行了鉴别。本研究结果显示，两者在静置分层时间、振摇后恢复混悬状态情况、气味等性状上无明显差异；但制剂颜色分别为橙黄色、棕黄色，可利于进一步增强两者辨识度，有效防范研究过程中误用、混用。此外，在特殊情形如发生严重不良事件而需定性检测制剂中是否含有诺氟沙星时，可参照本研究结果，按文中操作步骤，以UV法检测制剂在273 nm波长处是否有相应吸收。

本研究中未包含CAUSⅡ组方中其他组分的定性鉴别，也未进行相关组分的含量测定，将在今后的研究中加以探索、完善质量标准。

［1］忻志鸣，叶根深，黄红艳，等.复方抗溃混悬液Ⅱ对创面愈合的疗效观察［J］.安徽医药，2015，19（9）：1 811-1 813.

［2］叶根深，忻志鸣，黄红艳，等.复方抗溃混悬液Ⅱ对拔甲术创面愈合的作用［J］.中国药业，2014，23（18）：111-112.

［3］谭静玲，丁晓萍，聂晶，等.一清片多成分、多指标质量控制研究［J］.中国医院药学杂志，2015，35（11）：976-981.

［4］石新华，杨柳，陈红.芩栀鱼合剂的薄层色谱鉴别［J］.时珍国医国药，2014，25（2）：374-375.

［5］梁小银，林文华，严萍，等.新胃乃安片的质量标准研究［J］.中成药，2014，36（5）：990-994.

［6］周亚萍，谈忠，毛春芹，等.芪术益气润肠颗粒质量控制方法［J］.中国实验方剂学杂志，2016，22（3）：67-71.

［7］石璐，周雪飞，陈家斌，等.两种氟喹诺酮类抗生素在酸碱中的光谱特性［J］.同济大学学报：自然科学版，2010，38（6）：876-879.

［8］邵军，陈伟康，马双成，等.夏天无提取物UPLC指纹图谱及成分定性研究［J］.药物分析杂志，2014，34（9）：1 585-1 589.

［9］赵，王光函，吴怡，等.芩双片的薄层鉴别研究［J］.时珍国医国药，2014，25（6）：1 394-1 395.

［10］章伟明，郑红霞.黄芩漱口液预防系统性红斑狼疮活动期患者口腔真菌感染临床观察［J］.中医杂志，2014，55（2）：141-143.

［11］付强，王祖龙，蒋士卿.黄芪建中汤治疗慢性萎缩性胃炎脾胃虚寒证30例［J］.中医杂志，2013，54（18）：1 600-1 601.

Study on the Identification of Compound Anti-Ulcer SuspensionsⅡ

Ye Genshen1，Xin Zhiming1，Ge Dezhou2，Yao Li2，Deng Zulei2
（1.Department of Pharmacy，Bengbu First People′s Hospital，Bengbu，Anhui，China233000；2.Bengbu Food and Drug Inspection Center，Bengbu，Anhui，China233000）

ObjectiveTo study the identification methods for Compound Anti-Ulcer SuspensionsⅡ（CAUSⅡ），and to provide the basis for the future establishment and improvement of the hospital preparation quality standards.MethodsThin layer chromatography（TLC）was used in qualitative identification for Scutellaria baicalensis and astragalus in CAUSⅡ，and CAUSⅡwas identified with Compound Anti-Ulcer Suspensions（CAUS）by the appearance or ultraviolet spectroscopy（UV）detection for norfloxacin.ResultsScutellaria baicalensis and astragalus in CAUSⅡwere well separated with clear spot by TLC，while the relative negative control didn′t show any spot.CAUSⅡwas orange yellow，and had no absorption at 273 nm in UV，while CAUS was brown and had UV absorption at 273 nm.ConclusionScutellaria baicalensis and astragalus in CAUSⅡcan be identified by TLC；compared with CAUS，CAUSⅡcan be identified by color and UV method.

Compound Anti-Ulcer SuspensionsⅡ；thin layer chromatography；identification；baicalin；astragaloside

R284．1；R286．0

A

1006－4931（2016）16－0020－03

安徽省蚌埠市科技局科研计划项目，项目编号：蚌科2011-33号。

叶根深，男，硕士研究生，主管药师，研究方向为临床药学与药事管理，（电话）0552-4017964（电子信箱）bongb@126.com；忻志鸣，男，大学本科，主任药师，研究方向为药事管理、药效学与药物代谢动力学，本文通讯作者，（电话）0552-4017964（电子信箱）xzm999999@163.com。

（2016－03－22；

2016－05－01）