天水市2014～2015年羊小反刍兽疫免疫抗体检测与分析

成小莉，王美菊，王玙

（天水市动物疫病预防控制中心，甘肃天水 741000）

天水市2014～2015年羊小反刍兽疫免疫抗体检测与分析

成小莉，王美菊，王玙

（天水市动物疫病预防控制中心，甘肃天水 741000）

目的：掌握天水市羊小反刍兽疫免疫抗体水平和效果；方法：采用阻断ELISA方法，对2014～2015年采自85个养殖场（户）的1 340份羊血清进行PPR抗体检测。结果：个体阳性率为79.25%，免疫合格养殖场（户）72个，合格率为84.71%。检测养殖场47个，场免疫合格率为91.49%，散养户38个，散养户免疫合格率为74.36%。结论：场户群体和个体免疫抗体合格率均达到农业部要求70%以上的标准要求。

小反刍兽疫（PPR）；阻断ELISA；抗体检测

小反刍兽疫（PPR）是由小反刍兽疫病毒引起的小反刍兽的一种急性病毒性传染病，以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征。世界动物卫生组织将其列为A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。1993年，该病在中东和南亚出现，2003年在印度和尼泊尔爆发流行，全年有29个国家官方报告发生PPR疫情，其中亚洲国家11个。截止到2007年12月，全球累计有39个国家（地区）报告存在PPR疫情，其中16个为亚洲国家（地区）。2007年，我国西藏首次发现并确诊PPR疫情。据农业部兽医局疫情公布数据显示，2013年12月～2014年5月，全国先后有21个省市爆发PPR疫情。我省古浪县于2014年1月发生一起羊疫情，死亡111只，扑杀951只羊，造成了严重的经济损失。面对严峻的周边疫情形势，天水市小反刍兽疫免疫计划对全市重点地区饲养的羊只实施了疫苗强制免疫，实行每年两次集中免疫，每月一次补针免疫。为了掌握和评价天水市PPR免疫效果，笔者采集血清样品进行了抗体监测，现将检测结果报告如下。

1　材料与方法

1.1样品来源

血清样品采自全市进行过PPR弱毒疫苗免疫且免疫时间在1月以上的85个养殖场户（47个规模场、38个散养户）。

1.2样品采集时间

2014年11月140份、2015年2月900份、2015年5月108份、2015年11月192份，共计1340份（养殖场1156份，散养户184份）。

1.3疫苗

新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的小反刍兽疫活疫苗，疫苗批号为：2014052-1和2015023-1。

1.4检测试剂

中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心生产的小反刍兽疫阻断ELISA抗体检测试剂盒，批号为201418和201504。

1.5试验方法

用阻断ELISA抗体检测试剂盒说明书进行检测。

1.5.1加样在A1和B1孔中加入阳性血清50μL/孔，在C1和D1孔中加入阴性血清50μL/孔，在E1和F1孔中加入稀释液50μL/孔；在其他样品孔中加入稀释液25μL/孔，在所有样品孔中加入分别对应的待检血清25μL/孔。

1.5.2温育37℃孵育60min，冼板4次，最后一次拍干。

1.5.3加酶结合物按1∶5倍稀释酶标单抗，每孔加50μL/孔，37℃孵育30 min；冼板4次，最后一次拍干。

1.5.4加底物每孔加底物溶液50μL；室温避光10～15 min。

1.5.5测OD值每孔加终止液50μL，用450 nm波长测定各孔OD450 nm值。

1.6结果判定

按如下公式计算阻断率（PB）：

当阳性对照阻断率（PB）大于60，阴性对照阻断率（PB）小于或等于40，试验有效。计算待检样品阻断率（PB），待检样品阻断率（PB）大于50判为阳性，小于等于50则判为阴性。统计阳性样品数即为免疫合格数。

2　结果

2.1个体检测结果

2014～2015年，共对85个场（户）的血清样品分4次进行了PPR抗体检测，检测1 340份，阳性1 062份，阳性率为79.25%；其中规模场检测1 156份，阳性935份，阳性率80.88%；散养户184份，阳性127份，阳性率69.02%；结果详见表1。

2.3各时间段检测结果

2014年11月、2015年2月、2015年5月和2015年11月检测份数依次分别140份、900份、108份和192份，阳性份数依次分别为123份、702份、79份和158份，阳性率依次分别为87.86%、78.00%、73.15%和82.29%。

3　结果分析与讨论

表1　天水市羊小反刍兽疫免疫检测结果统计

2.2场（户）免疫合格情况

85个场（户）中72个场（户）免疫抗体阳性率在70%以上，合格率为84.71%。47个规模场中43个场抗体阳性率在70%以上，合格率为91.49%；38户散养户中29户抗体阳性率在70%以上，合格率为74.36%；结果详见表2。

表　天水市规模场和散养户羊群体免疫合格结果统计

检测结果显示，85个养殖场（户）的1 340份样品个体免疫抗体合格率为79.25%，场（户）群体小反刍兽疫免疫抗体合格率为74.36%，均达到农业部要求70%以上的标准要求。说明免疫效果良好，能较好地起到保护作用。

规模场免疫抗体合格率明显高于散养户。本次共检测规模场47个，43个规模场抗体阳性率达到70%以上，合格率为91.49%；检测散养户38户，29户抗体阳性率在70%以上，合格率为74.36%；散养户群体合格率虽然达标，但仅为74.36%，处于中低保护水平，存在不能完全抵抗病毒感染的风险。规模场合格率高可能与饲养管理和日常补免工作到位有关，而散养户合格率低与养殖比较分散，日常补免工作难以到位，饲养管理措施跟不上有关。

从监测的四个时间段分析，4次检测结果变化没有规律性。分析原因，可能和采样方法有一定关系。本试验中，各时间段采样并不是固定于同一场户或同群羊，由于不同羊群的个体差异，可能造成检测结果的波动。

4　小结

检测发现，虽然被检测场户的免疫抗体水平达到了比较理想的免疫效果，降低了疫情传入天水市的风险，但也反映出免疫中的薄弱环节，散养户的防疫应该引起足够的重视。血清学抗体监测无法区分免疫抗体和感染抗体，只能测出有没有抗体或抗体效价的高低。因此，为更好地做好全市小反刍兽疫防控工作，要切实加强检疫监管和流行病学调查，综合评估天水市小反刍兽疫疫情风险；完善应急机制，规范应急程序，充实应急物资储备，做好各项应急准备工作；发现疫情或检出阳性病例，立即采取应急处置措施。争取到2020年实现全市退出免疫的目标。

［本文获甘肃省首届兽医系统征文比赛二等奖］

（编辑：赵鹏飞）

S858.26

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1006-799X（2016）17-0005-02

成小莉（1967-），女，甘肃秦安人，高级兽医师，主要从事动物疫病防治工作。