边疆民族地区矿难事故中亲权鉴定的应用

刘浩东柴家建向妍刘文星程宝文谢红良

（1.云南省曲靖市公安局刑侦支队技术大队DNA室 云南曲靖 655000；2.云南省公安厅刑侦总队技术处 云南昆明 650000）

边疆民族地区矿难事故中亲权鉴定的应用

刘浩东1柴家建1向妍1刘文星1程宝文2谢红良1

（1.云南省曲靖市公安局刑侦支队技术大队DNA室 云南曲靖 655000；2.云南省公安厅刑侦总队技术处 云南昆明 650000）

目的：确定矿难事故中遇难人员的亲权关系，为矿难亲权鉴定提供参考。方法：采用Chelex法提相关检材的DNA后，用多套检测系统试剂盒进行复合扩增，用AB-3130XL自动遗传分析仪进行扩增产物的电泳分离，用Genemapper ID X软件进行STR基因分型分析。结果：准确推导所送样本的亲权关系。结论：100名遇难者采用三联体通过STR来认定亲权关系，12名遇难者采用二联体通过STR、Y-STR及X-STR来认定亲权关系，1名遇难者采用二联体通过mtDNA来认定亲权关系。

亲权鉴定 遗传标记 常染色体 X染色体 Y染色体 线粒体DNA 亲权相对机会

亲权鉴定是通过对人类遗传标记的检测,根据遗传规律分析,对个体之间血缘关系的鉴定［1］。用于亲子鉴定的遗传分析系统由一定数量的遗传标记组成,通常有常染色体短串联重复序列（STR）、Y染色体短串联重复序列（Y-STR）、X染色体短串联重复序列（XSTR）及线粒体DNA（mtDNA）的测序等,在一些特殊的灾害性事故以及特殊亲子鉴定中,往往要通过多套检测系统共同来确认亲缘关系,为解决特殊灾难性事故的亲缘关系认定提供有力的证据。

1 材料与方法

1.1 样本的来源

曲靖市位于云南省的东北部,煤炭储量及开采量均居云南省首位,众所周知煤炭开采是高风险行业,经笔者统计,2011年以来,经公安机关DAN实验室检验进行亲权鉴定（尸源认定）的遇难矿工一共6起共有113人,分别是：2011.3.6富源县嘎拉煤矿事故致9人死亡（简称2011FY1-9）；2011.11.10师宗县私庄煤矿事故致43人死亡（简称2011SZ1-43）；2012.12.5富源县上厂煤矿事故致17人死亡（简称2012FY1-17）；2014.4.7麒麟区下海子煤矿事故致22人死亡（简称2014QL1-22）；2014.4.21富源县红土田煤矿事故致14人死亡（简称fy2014FY1-14）；2014.9.23宣威市小河边煤矿事故致8人死亡（简称2014XW1-8）。

1.2 方法

1.2.1 常染色体STR分析

按行标GA/T383-2002中Chelex法提相关检材的DNA,用Identifiler（AB）系统,经聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reation,PCR）方法复合扩增STR基因座（AmpF1STRidentfiler Plus ,AB）,用AB-3130XL序列分析仪进行基因分析得到STR多态性检验结果。

1.2.2 Y-STR分析

样本用Chelex-100法提,AmpFISTRR YfilerR PCR Amplification Kit体系扩增,扩增产物用AB-3130XL序列分析仪进行基因分析。

1.2.3 X-STR多态性的检验

样本用Chelex-100法提,IdtyperX-12试剂盒及相应的扩增体系,扩增产物用AB-3130XL序列分析仪进行基因分析

1.2.4 mtDNA多态性的检验

样本用Chelex法提,采用nested-PCR,PCR产物直接测序法对线粒体DNA D-环区高变区I（hypervariable Region,HV-I）进行测序。

2 亲权鉴定结果

2.1 三联体的亲子鉴定

遇难者有可疑父、母或妻、子的相关样本,与遇难者的生物样本组成三联体,四年来,113名遇难矿工中有100名遇难者的通过三联体的检验计算,100名遇难者的RCP＞99.99%,即可给出肯定或否定的亲权认定的鉴定意见,从而认定尸源。

表1 16人的STR多态性检验结果见

续表1

表2 8人的Y-STR多态性检验结果

续表2

2.2 二联体的亲子鉴定

2.2.1 遇难者与可疑父或可疑子的亲子鉴定

遇难者,只有父亲或者只有儿子健在的,在曲靖近年来的矿难中有8人是这种情况,我们在遇到这样的遇难者,根据STR基因座单亲PI计算方法［2］计算出RCP（亲权相对机会）,当RCP＜99.975%,增加Y-STR多态性的检测。

2.2.2遇难者与可疑母或可疑女儿的亲权鉴定

遇难者,只有母亲或者女儿健在的,在曲靖近年来的矿难中有4人是此情况,我们在遇到这样的遇难者,根据STR基因座单亲PI计算方法计算出RCP（亲权相对机会）,当RCP＜99.975%,增加XSTR多态性检验检测。

2.3 mtDNA HV-I区测序分析的亲权鉴定

遇难者,只有姐姐或妹妹健在的,在曲靖近年来的矿难中有1人是此情况,遇到这样的遇难者,通过mtDNA检验进行初步的亲缘确定。

四年以来,113名的遇难者,所检样本300余分,有100名遇难者通过三联体STR确定其亲权关系,12名遇难者通过二联体STR及二联体加测性别染色体STR来确定亲权关系,1名遇难者通过mtDNA测序初步确定其亲权关系。

3 讨论

随着各级政府对矿难的重视,一旦发生矿难,需要及时准确确定遇难人数和遇难者身份,在确定遇难者身份的过程中,由于矿山工作人员的装备没有到位,加之矿藏中强酸的存在,一旦发生矿难,遇难者大多体无完肤,常规手段无法准确确定遇难者的身份,这就需要通过DNA来确定遇难者的身份。DNA是遗传物质,稳定地从亲代遗传给子代,通过DNA检验确定假设的父母与子女之间是否存在亲生血缘关系或假设个体与待检验的个体或物证之间是否存在亲缘关系,可以进行亲子鉴定或亲权鉴定［3］。

3.1 三联体是被检测男子、孩子生母与孩子的样本称为三联体，确定遇难者身份的过程中，三联体是比较理想的检验样本

表3 8人的STR多态性检验结果

表4 2人的X-STR多态性检验结果

续表4

图1 兄妹2人HV-I区序列图

根据国际实验室的标准,肯定亲权关系的标准RCP≥99.95%或者PI值大于2000比较妥当,当PI＜1999,RCP＜99.95%时,应加测遗传标记以达到认定或否定的正确结论［4］。近四年以来的这几起矿难的三联体的其亲权相对机会RCP＞99.95%通过三联体SRT多态性的检测能给出准确可靠的鉴定意见。

3.2 二联体的亲权鉴定是指被检测男子或女子与孩子的亲权关系鉴定

国内目前还没有二联体亲子鉴定结果的判定标准正式出台,许多实验室在用各自的标准完成此类判定。吕德坚等［5］在2003年也提出单亲案的认定标准应该要比双亲案有更高的要求。有学者建议鉴定实验室按照国际惯例只需出具基因型结果和似然比计算结果,不必提供“是”与“非”的判定。这种建议与我们国家的情况不适合。如果专业人员都不能给出判断,把这种判断的责任转嫁给法官或当事人［6］。本实验室参照RCP大于99.975%作出“不排除”鉴定意见,反之则作出“排除”的鉴定意见。即在二联体的亲权鉴定中检测发现三个或三个以上不符合基因座时,可以排除亲权关系；当15个STR的基因座都符合,且RCP大于99.975%,不可以排除亲子关系；RCP小于99.975%时,建议补充样本的基因座个数或增加检测样本的其他遗传标记［7］。

根据我们实验室的实际情况我们检测Y-STR或者X-STR。YSTR和X-STR为性染色体,性染色体的遗传特性可以在缺少双亲的兄弟（姐妹）认亲、同父异母的半兄弟（姐妹）认亲、隔代认亲等亲权鉴定和发生突变基因座的亲权鉴定中发挥很大的优势［8］。Y染色体上遗传标记按父系遗传方式传递,可以确定样本是否来源于同一父系,适用于男性同胞之间、隔代或旁系的亲权鉴定,如再结合孟德尔遗传的遗传标记检验,可以正确确定样品间的亲缘关系［9］。X染色体STR基因座为性连锁遗传,由于遗传标记的定向性,使X-STR分型在法医实际中具有独特的应用价值,在父母不同的同父异母姐妹等等、祖母-孙女关系鉴定、父女关系鉴定案件以及个体识别中性别的铺助鉴定、混合样本的判定等案件中发挥着重要作用［10］。因此我们在单亲的亲权认定上STR的检测15个位点,当RCP小于99.975%不能排除亲权关系时我们结合Y-STR和X-STR的检测,若位点一致,我们得出的结论为肯定亲权关系的存在。

人类线粒体DNA（Mitochondrial DNA,mtDNA）是独立于细胞核染色体外的一种基因组,其独特的遗传学特点在系统进化、群体遗传、人类学及法医学鉴定等研究领域有着重要的价值［11］由于线粒体是按母系遗传方式遗传,可疑确定检验样本是否来自于同一母系,适用于同胞之间,隔代或旁系亲缘鉴定,对于有些鉴定要结合孟德尔遗传的遗传标记检验,可以正确确定样本间的亲缘关系。

亲权鉴定在法医鉴定中有重要的意义,主要有三联体鉴定、二联体鉴定、祖孙亲缘关系鉴定、兄弟（姐妹）亲缘关系鉴定等,在鉴定中,我们要根据相关信息采取不同的鉴定方法。对于矿难中的遇难者,根据遇难者在矿山上生前提供的个人信息记录,寻找与其亲缘关系最近的亲属作为鉴定样本,及时、准确的给出鉴定意见,为矿难者的处置和善后的赔偿提供的可靠的依据。

［1］李莉，李成涛，柳燕，等.亲权鉴定技术规范［S］.2010，1.

［2］李莉，柳燕，赵珍敏，等.单亲鉴定案例STR选择探讨和PI值计算方法评价［J］.中国司法鉴定.2000，63（32）.

［3，4］郑秀芬.法医DNA分析［M］，北京：中国人民公安大学出版社，2002，12：429-432

［5］ 吕德坚，刘秋玲，卢慧玲，等.15STR在单亲鉴定中的排除分型［J］.中国法医学杂志，2003，18（6）：332-334.

［6，7］王琳，王毅，王晓梅，等.亲子鉴定中二联体鉴定结果判定标准的探讨［J］.分子诊断与治疗杂志 2010， 2（3）175.

［8］刘秋玲，吕德坚，张建苗，等.X-STR体系在特殊亲子鉴定案中的应用1例［J］.中国法医学杂志，2011，26（2）：147-148.

［9］徐卫华，符生苗，赵英.亲权鉴定方法概述［J］.海南医学，2011，22（23）：5.

［10］刘秋玲，吕德坚，赵虎.应用X染色体STR进行祖母与孙女鉴定1例［J］.中国司法鉴定，2010，1：89-90.

［11］冯国英.人类线粒体DNA多态性检测及其在群体遗传学中的应用［J］.齐齐哈尔医学院学报，2010，31（10）：1613-1615.

［R89］

A

1674-2060（2016）03-0133-03

刘浩东（1978-）， 男，法医师，主要从事遗传学、法医学科研、司法鉴定工作。

谢红良（1978-），男，生物学硕士，助理法医师，主要从事遗传学、法医学科研、司法鉴定工作。