新疆圆柏叶的质量标准研究

陈　燕　谭 　为　李晨阳　徐　芳　赵　军　邢建国*

1. 新疆医科大学，新疆　乌鲁木齐　830011；2. 新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆　乌鲁木齐　830004



药物研究

新疆圆柏叶的质量标准研究

陈燕1,2谭 为2李晨阳2徐芳2赵军2邢建国2*

1. 新疆医科大学，新疆乌鲁木齐830011；2. 新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆乌鲁木齐830004

目的：建立新疆圆柏叶的质量控制方法。方法：采用性状、显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分测定、总灰分测定、酸不溶性灰分测定、浸出物测定、挥发油含量测定等方法。结果：建立新疆圆柏叶性状和显微、薄层色谱等的鉴别方法，制定其水分不得过9.5%，总灰分不得过7.0%，酸不溶性灰分不得过1.0%，醇溶性浸出物不得少于23.0%，挥发油含量不得少于1.8%(mL/g)。结论：制定的新疆圆柏叶质量标准全面、可控。

新疆圆柏叶；质量标准；显微鉴别；薄层色谱鉴别

新疆圆柏又名砂地柏、叉子圆柏和臭柏等，为柏科圆柏属植物SabinavulgarisAnt.的常绿匍匐灌木，广泛分布于我国新疆、甘肃、内蒙和陕北的干旱荒山和沙地之中[1]。多年来，新疆以圆柏叶代替侧柏叶供药用，为本地习用品[2]。新疆圆柏叶入蒙药(伊曼—阿日查)，能清热、利尿、止血、消肿、治伤及祛黄水、主治肾与膀胱热、发症、痛风、游痛症等[3]，并具有治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、小便不利等疾病的功效[4]。本所码依拉·买买提依明[5]等只收集一批药材对其的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、挥发油测定进行了初步探讨。，本文收集了不同产地的14批新疆圆柏叶药材，按2010版《中国药典》要求对新疆圆柏叶的性状、水分、灰分、浸出物及挥发油等质量方面进行较为系统的研究，以期为新疆圆柏叶的质量控制提供试验数据。

1　仪器与材料

1.1仪器CX31RTSF型显微镜(奥林巴斯(中国)有限公司)；AL204型电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)；AS10200AD型超声波清洗器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)；WHF-203B三用紫外分析仪(上海精科实业有限公司)。

1.2药材新疆圆柏药材均于2014年6月采集自全疆各地，共14批；经何江副研究员鉴定为柏科植物新疆圆柏 Sabina vulgaris Ant. Var.vulgaris 的干燥叶，批号分别为20140604、20140605-1、20140605-2、20140605-3、20140605-4、20140608-1、20140608-2、20140609-1、20140609-2、20140610-1、20140610-2、20140402、20140508-1、20140508-2。

1.3试药芦丁对照品(批号：100080-200707)；槲皮苷(批号：111538-200504)；其他试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1性状鉴别本品叶贴伏于枝上，深绿色或黄绿色。叶二型，鳞叶交互对生，相互紧覆，菱形或菱状卵圆形，长1～2.5mm，先端钝或微尖，全缘，背面中部生有椭圆形腺体；刺叶生于幼龄植株上，有时壮龄植株亦有少量刺叶，常交互对生或兼有三叶交叉轮生，排列紧密，向上斜展，长3～7mm，先端刺尖，上面凹，下面拱圆，中肋明显，被白粉。叶质脆，易折断。气清香，味苦涩、微辛。见图1。

2.2显微鉴别表皮细胞类长方形，长38～133μm，宽10～25μm；气孔甚多，凹陷形，略木质化，副卫细胞环式，气孔长36～57μm，宽21～37μm；纤维细长，单个或成束，有的壁较厚，孔沟狭窄，有的壁较薄，孔沟宽，直径7～35 μm；木薄壁细胞多见，呈念珠状，略为木质化，长20～119μm，宽11～36μm。偶见梯纹或具缘纹孔管胞。见图1。

叶横切面呈类椭圆形或不规则形，中央为小枝部分，周边为鳞片状叶。外被厚角质层，表皮细胞整齐1列，叶肉栅栏细胞短柱状，海绵组织细胞环状排列，细胞间隙较疏松，其间有1～2个树脂道；嫩枝部分韧皮部细胞细小，排列整齐，形成层1列，木质部由管胞组成，中央髓部细胞类圆形、扁小。见图2。

2.3薄层色谱鉴别取药材粉末5g，加50mL石油醚(60℃～90℃)，加热回流提取3次，每次1h，弃去石油醚液，药渣挥干，加甲醇20mL，超声处理20min，滤过，将滤液浓缩至2mL，作为供试品溶液。另取芦丁对照品、槲皮苷对照品，加甲醇分别制成每1mL含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-水-甲酸(7∶3∶1∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点。见图3。

2.4水分[6]水分测定参照中国药典2010年版一部附录IX H水分测定法(甲苯法)，结果见表1。根据测定结果，新疆圆柏叶水分平均为6.57%，最高7.99%，以最高值的20%设限，建议制定新疆圆柏叶水分限度为不得过9.5%。

2.5总灰分和酸不溶性灰分[6]总灰分和酸不溶性灰分测定参照中国药典2010年版一部附录IX K灰分测定法，结果见表1。根据测定结果，新疆圆柏叶总灰分平均4.57%，最高5.76%，酸不溶性灰分平均0.37%，最高0.54%，以最高值的20%设限，建议制定新疆圆柏叶总灰分限度不得过7.0%，酸不溶性灰分限度不得过1.0%。2.6浸出物测定[6]浸出物测定参照中国药典2010年版一部附录ⅩA浸出物测定法，以70%乙醇为溶剂，采用热浸法测定，结果见表1。根据测定结果，新疆圆柏叶热醇法浸出物含量平均29.01%，幅度23.85%～40.69%，建议制定新疆圆柏叶醇溶性浸出物限度为不得少于23.0%。

2.7挥发油含量测定[6]挥发油含量测定参照中国药典2010年版一部附录ⅩD挥发油测定法测定，结果见表1。根据测定结果，新疆圆柏叶挥发油含量平均2.33%，含量幅度0.60%～4.20%，以平均值的80%设限，建议制定新疆圆柏叶挥发油含量限度为不得少于1.8%(mL/g)。

表1　新疆圆柏叶水分、灰分、浸出物和挥发油含量测定结果

3　讨论

3.1新疆圆柏为裸子植物，在显微鉴别中，新疆圆柏叶的气孔比较特殊，当做粉末制片，加入间苯三酚时，气孔可以染成红色，原因为新疆圆柏叶为沙地荒山植物，喜干旱，保卫细胞侧壁较厚，凹陷型，为了防止水分蒸发，略为木质化。

3.2张文斌等[2]在文献中记载新疆圆柏叶槲皮素的含量测定，流动相为乙腈-0.4%磷酸(45∶55)，槲皮素平均含量为1.04%。李晨阳等[6]在文献中记载，对新疆圆柏叶中槲皮苷的含量测定，流动相为乙腈-0.0036mol/L磷酸。结果，槲皮苷2.2～88.0μg/mL与峰面积的线性关系良好(r=0.9999)，样品在32h稳定。两者都采用乙腈-磷酸为流动相对新疆圆柏叶的不同成分进行了测定，实验结果稳定、可行，为新疆圆柏叶的进一步研究提供了一定的数据基础。3.3黄酮类化合物是新疆圆柏中所含的主要化学成分之一，其中芦丁和槲皮苷在是其中含量较高的成分。芦丁具有抗炎、抗病毒等作用，在临床用于防治脑溢血、高血压、视网膜出血、紫瘢和急性出血性肾炎[8-10]；槲皮苷具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗病毒等多种生物活性[11-12]；两者药理活性与新疆圆柏叶抗炎、活血止痛的功能主治相符合。在薄层色谱鉴别中，以芦丁和槲皮苷为对照品进行新疆圆柏叶药材质量标准的研究。本文通过对不同展开剂的筛选，优选出了适合新疆圆柏叶药材中芦丁和槲皮苷的薄层色谱鉴别方法。

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第7卷)[M].北京:科学出版社,1978:360.

[2] 张文斌,赵汝海,程斌.HPLC法测定新疆圆柏叶中槲皮素的含量[J].解放军药学学报,2004,20(3)：223-224.

[3] 田旭平,胡开峰.不同季节新疆圆柏总黄酮含量的变化[J]生物科技通讯[J],2006,17(3):387-388.

[4] 江苏新医学院.中药大辞典(下册)[M].上海:上海科学技术出版社,1977:1886.

[5] 玛依拉·买买提明，满而哈巴·海如拉，于睿，等.新疆圆柏叶药材质量标准的探讨[J].时珍国药医药，2010,21(7)：1686-1687.

[6] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010：附录52,53,62,63.

[7] 李晨阳,高慧,陈燕，等,HPLC法测定不同产地新疆圆柏叶中槲皮苷[J].华西药学杂志，2015,30(6):720-721.

[8]黄尚荣.药用芦丁化学成分提取方法及其药理学研究进展[J].现代农业科技,2009(23): 100-103.

[9] 孟祥颖,郭良,李玉新,等.芦丁的来源、用途及提纯化方法[J].长春中医学院学报，2003(2):61-64.

[10] 徐魁,孙兆伟,蔡艳丽.荷花中芦丁含量测定方法研究[J].药学研究,2013(8):452-454.

[11] 刘丽,侯立强,满莹.槲皮苷对扑热息痛诱导的大树急性肝损伤的保护作用研究[J].中国现代医生,2007,8(10):98.

[12] 杨琳.槲皮苷药理活性研究进展[J].亚太传统医药,2015,3(6):61-62.

(编辑：穆丽华)

Study on the Quality Standard ofSabinaVulgarisFolium

CHEN Yan1,2TAN wei2LI chenyang2XU fang2ZHAO jun2XING jianguo2*

1. Chinese Medicial Department , Xinjiang Medicial University,Urumqi 830011,China;2.Xinjiang Institute of Materia Medica, Urumqi 830004, China

Objective To establish the quality standard ofSabinaVulgarisFolium. Methods It was indentified by macroscopical identification, microscopical identification and TLC identification. The methods for quality control were also including the determination of water, total ash, acid-insoluble ash, extract and volatile oil. Results To establish the characters in macroscopical identification, microscopical identification and TLC identification of Leaves ofSabinaVulgaris. The maximum of moisture should not exceed 9.5%. The maximum of total ash and acid-insoluble ash should not exceed 7.0% and 1.0%, respectively. The yield of ethanol extracts should not be less than 23.0%. The content of volatile oil should not be less than 1.8%(mL/g). Conclusion The quality standard established can be used for the quality control of the Leaves ofSabinaVulgaris.

SabinaVulgaris.; Quality Standard; Microscopical Identification; TLC Identification

2016-05-27

新疆维吾尔自治区科技支撑计划项目(201433103)。

陈燕(1985-)，女，在读研究生，助理研究员，主要从事维吾尔药材质量和化学成分研究。E-mail:chenmaomao158@163.com

邢建国(1968-)，男，汉族，硕士研究生，研究员，研究方向为中药及维吾尔药新剂型制剂。E-mail: xjgdd@163.com

R282.5

A

1007-8517(2016)16-0014-03