血液检测HBsAg酶联免疫吸附试验拖带现象分析

阮　忠，张加成

(湖北省孝感市中心血站　432000)



·经验交流·

血液检测HBsAg酶联免疫吸附试验拖带现象分析

阮忠，张加成

(湖北省孝感市中心血站432000)

目的通过对使用永久性钢针在酶免检测中出现阳性拖带现象进行分析，以寻找解决拖带现象的办法。方法采用同一份标本和相同试剂进行手工反复检测比较，分析酶免阳性标本拖带污染对其他标本结果的影响。结果对Metis 200-8全自动血库系统使用永久性钢针时阳性标本产生拖带污染的后续3个标本，经重新检测，结果均为阴性，证实为拖带现象所致。结论永久性钢针在检测过程中对其他标本会带来不同程度的拖带污染，可以通过对同一份标本进行对比检测，以保证结果的可靠性。

永久性钢针；拖带污染；酶联免疫吸附试验

采供血机构是一个特殊行业，具有独特的工作环境及工作模式。现在很多血站检验科在血液检测过程中，使用一管血样进行酶联免疫吸附试验(ELISA)、血型、生化检测，这在一定程度上减轻了操作人员的工作强度和降低了一定成本[1]，也避免了手工加样而带来的人为误差，使检测结果更加准确，更有可比性。采用全自动加样仪进行分样，当遇到滴度高的阳性标本时，永久性钢针可造成同时用该阳性标本加样针后几个标本出现假阳性[2]，本文对实际工作中遇到的这种情况进行分析，现报道如下。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂仪器为奥斯邦酶免检测系统STAR/FAME、爱康公司Metis200-8全自动血库系统、东芝公司R40生化仪。试剂盒采用为国产ELISA诊断试剂。

1.2标本检测流程用同一标本进行了分样，先进行ELISA检测分样，再生化检测，最后进行了血型检测。

1.3方法根据试剂盒说明书在STAR/FAME、Metis200-8全自动血库系统的仪器上编制各项试验的工作程序。加样的流程是第一步先用奥斯邦STAR加样，FAME进行后处理、孵育、洗板、读板；第二步，东芝R40生化仪再次进行分样；第三步最后为Metis200-8全自动血库系统进行分样检测血型[3-4]。加样方法参照文献[3]。

2　结　　果

分样假阳性拖带标本的确定，在检测过程中FAME吐板[乙型肝炎表面抗原(HBsAg)]，试验中断，重新再次进行分样试验(原标本已经通过了酶免分样、生化分样、血型分样)，检测完毕后出现F2、F3、F4、F5、F6孔阳性，OD值逐渐降低，分别为2.768、1.321、0.287、0.148、0.119。用同源血辨标本和同源核酸标本进行了复试。见表1。

表1　　拖带阳性检测结果

注：-表示检测结果为阴性。

3　讨　　论

目前，我国大多数血站都使用永久性钢针设备对血液标本进行检测，加样系统采用的是非一次性的Teflon涂层钢针，这些都容易造成标本携带污染[4-5]，但也极大提高了检测效率，避了手工加样的人为误差，提高了血液检测质量。永久性钢针对标本的拖带污染问题需引起关注。阳性拖带现象的产生主要是由于钢针处理强阳性标本后，不易被冲洗干净，附着在针的内壁上，接着吸取下一个标本时发生污染，并且随着钢针被重复使用次数的增加，其内壁可能吸附蛋白质或脂质等污物，阳性拖带现象会更加严重[6]。同一加样针会使其后的多个标本出现不同程度的污染，引起假阳性结果。如果将假阳性的标本误判为阳性将造成血液的浪费，同时也会给献血者带来心理负担，因此设法避免该现象的发生成为大家关心的问题[7]。

从首次检测结果来看，F2孔位标本为强阳性，F3、F4、F5、F6均为阳性，OD值逐渐降低，复试这5份标本，结果同首次一样，但是与此同源的血辨标本结果为F2(样品)强阳性，F3、F4、F5、F6(样品)均为阴性，再次复试，笔者用同源核酸标本进行再次检测，结果为F2(样品)强阳性，F3、F4、F5、F6(样品)均为阳性，另外M-208加样顺序为F1～F6，F1为阳性对照，F2为强阳性，F3～F6 OD值依次降低。可以确定，F3～F6标本阳性结果系钢针拖带所致。在检测过程中，设备会在每一次加样后对钢针进行冲洗，通常可以避免标本加样过程中的拖带污染，但是对于高浓度抗原或抗体标本，拖带污染还是不能完全控制，找到造成阳性拖带的强阳性标本和不同阳性标本的区别方法，不仅能够有效地减少再检次数，节约试剂，还能够做能迅速判断拖带现象并减少因拖带导致的误检[8]。因此，在以后的检测中，应该人为地减少这种拖带现象的发生。笔者分析产生拖带现象的主要原因有：参数设置不当,仪器维护保养不良和标本原因[9]。

笔者采取以下对应措施：(1)在条件允许情况下，尽量使用一次性加样尖，或者加大冲针的水量和延长冲针时间。(2)血站可以在采标本的同时多加一个血样留存，以便仪器出现故障之后的复查，这样就能避免钢针拖带所致的污染。还需要找辫子血样来做平行双孔再检，因为试管血样已被污染，失去检测意义，用血辫血样再检，不能轻易判定为假阳性，否则使阳性血流入临床，造成严重后果[10]。当然考虑设备所致的污染同时，还应该加强自身建设，提高专业知识和检验技能，在检测过程中提高警惕，减少不必要的故障，从而使检测结果安全、准确、及时。

[1]王永胜．关于全自动酶联免疫分析仪加样携带污染的探讨[J]．检验医学与临床，2011，8(16)：2029．

[2]朱金平，方丽婉，张莉．全自动酶标加样仪的携带污染分析[J]．中国输血杂志，2015，28(8)：914-915．

[3]陈新，许建军．Microlab STAR液体处理工作站携带污染分析与对策[J]．中国实用医药，2014，9(32)：272-273．

[4]潘志勇．ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的对策分析[J]．中国实用医药，2011，6(27)：147．

[5]朱美芹，王莉莉．全自动酶联免疫检测仪与手工酶联免疫检测的比对评价[J]．检验医学与临床，2014，11(1)：21-22．

[6]朱安友，王凤超，杨萍，等．全自动酶免分析仪加样中拖带阳性的解决方法探讨[J]．蚌埠医学院学报，2010，35(8)：817-819．

[7]修淑丽，李燕，吴硕，等．阳性拖带现象产生的原因和解决方法[J]．中国输血杂志，2006，19(3)：218-219．

[8]王宏．全自动加样器阳性拖带现象的分析[J]．中国实用医药，2014，9(7)：257-258．

[9]王林，张国平，韩惠云，等．全自动加样系统出现强阳性标本拖带现象分析[J]．当代医学，2008，14(20)：47．

[10]赵旭勇，张宁宁，王棚，等．HBsAg检测中强阳性拖带污染的分析[J]．内蒙古中医药，2009，28(23)：90．

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.059

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1673-4130(2016)17-2489-02

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