猪瘟免疫程序优化及免疫效果评价

南文金，黄健强，吴静波，胡鸿惠，彭国良

（1.韶关学院 动物疫病实验室，韶关 512005；2.韶关学院 英东农业科学与工程学院，韶关 512005；3.粤北生猪生产及疫病防控协同创新发展中心，韶关 512005）

猪场兽医

猪瘟免疫程序优化及免疫效果评价

南文金1，3，黄健强1，3，吴静波1，3，胡鸿惠1，3，彭国良2，3

（1.韶关学院 动物疫病实验室，韶关 512005；2.韶关学院 英东农业科学与工程学院，韶关 512005；3.粤北生猪生产及疫病防控协同创新发展中心，韶关 512005）

为了提高猪瘟疫苗免疫效果，增强猪群抵抗猪瘟病毒感染能力，采用ELISA方法对某猪场仔猪母源抗体消长情况进行监测，根据母源抗体消长规律对猪瘟疫苗首免日龄由原来的20日龄调整为35日龄，二免日龄由60日龄调整为65日龄。连续两批商品猪的猪瘟抗体监测数据表明，免疫程序调整后猪群的猪瘟抗体合格率上升，变异系数下降，疫苗免疫效果提高明显。

猪瘟；母源抗体；免疫程序；免疫效果

猪瘟（Classical Swine Fever， CSF）是一种高度接触性传染病，被世界动物卫生组织（OIE）列为必须上报的传染病［1］，是目前危害养猪业发展的主要传染病之一。我国对猪瘟采取强制免疫措施，有效防控了猪瘟的暴发和流行，但非典型猪瘟在部分猪场存在，一旦发生，影响猪场整体健康和生产成绩，造成较大的经济损失。非典型猪瘟的发生和猪瘟疫苗免疫程序和免疫效果关系密切，本研究通过对某规模化猪场猪瘟抗体水平进行监测，通过抗体水平变化规律，对该猪场猪瘟免疫程序进行优化，调整后的猪瘟疫苗免疫效果提高明显，增强了猪群对猪瘟病毒侵袭的抵抗力。该研究以期为规模化猪场如何进行猪瘟疫苗的科学免疫提供了参考。

1　材料与方法

1.1 试验猪场基本情况

试验于广东某猪场进行，存栏基础母猪900多头，分区饲养，全进全出。种猪每年猪瘟疫苗普免3次，每次4头份，商品猪猪瘟免疫程序为20日龄首免猪瘟疫苗1头份，60日龄二免猪瘟疫苗2头份，猪瘟疫苗为某公司生产的猪瘟ST传代细胞苗。

1.2 检测试剂盒与判定标准

猪瘟病毒抗体检测试剂盒（阻断ELSIA），美国IDEXX公司产品，批号：D361，按试剂盒说明书进行操作，所有孵育反应都在23 ℃恒温箱中进行，在阴性和阳性对照成立，检测结果有效时通过计算样本阻断率来判定抗体水平，具体判断标见表1。

表1　猪瘟抗体检测结果判定标准

1.3 第1次猪瘟免疫抗体监测

为评价该猪场现行的猪瘟免疫程序免疫效果，随机选择20头母猪、猪瘟疫苗首免1个月的保育猪20头和二免后1个月的生长育肥20头，前腔静脉采集血液样本3～5 mL，实验室离心分离血清，使用猪瘟病毒抗体检测试剂盒对样本抗体水平进行检测，对检测数据进行统计分析。

1.4 仔猪母源抗体监测及首免日龄确定

为科学地确定该猪场猪瘟免疫程序，选择分娩时间相差1 d的10窝仔猪进行母源抗体监测，每窝仔猪随机选择2头仔猪，打好耳号，分别于出生7、14、21、28、35和42日龄前腔静脉采血，实验室检测猪瘟母源抗体水平，根据母源抗体变化规律和该场仔猪断奶日龄，对该场仔猪猪瘟首免时间调整为35日龄，二免时间为65日龄。

1.5 免疫程序优化后的猪瘟免疫效果监测

连续监测了2批猪瘟免疫程序优化后的商品猪群抗体水平，分别在猪瘟疫苗首免和二免后1个月，每批猪每次随机选择20头前腔静脉采血分离血清进行猪瘟抗体水平检测。

2　结果

2.1 第1次猪瘟免疫抗体监测结果

检测结果显示，该场母猪猪瘟免疫效果较好，抗体合格率达到95%，抗体平均阻断率85.65%，抗体变异系数为24.47%。但商品猪采用的猪瘟20日龄首免，60日龄二免的免疫程序免疫效果较差，首免和二免后30天猪瘟抗体合格率分别为35%和60%，抗体水平不均匀，变异系数较高（表2）。

2.2 仔猪母源抗体消长规律监测结果

母源抗体监测结果表明，14日龄前仔猪母源抗体都维持较高水平，抗体合格率为100%，平均阻断率在80%以上，变异系数小于10%；14日龄到28日龄抗体水平随日龄增长逐步下降，28日龄时母源抗体合格率还能达到70%；28日龄后母源抗体迅速下降，35日龄母源抗体合格率为40%，平均阻断率为48.17%，42日龄时母源抗体合格率仅20%，平均阻断率下降到32.29%，变异系数升高到33.66%（见表3）。

2.3 优化后的猪瘟免疫抗体监测结果

对免疫程序优化后的两批猪首免和二免后1个月猪瘟抗体水平检测结果表明，猪瘟抗体合格率和平均阻断率都有较大幅度提升，抗体水平更加均匀，变异系数明显下降（表4）。

表2　第1次猪瘟免疫抗体检测结果

表3　仔猪猪瘟母源抗体检测结果

表4　猪瘟免疫程序优化后商品猪群抗体水平

3　讨论

抗体合格率、平均阻断率和变异系数是评价猪瘟疫苗免疫效果几个重要参数，杜希珍等的研究报道［2］，猪瘟控制较好，没有隐性感染的猪场，猪群抗体合格率可以达到90%以上，抗体变异系数小于25%。在对该猪场第1次猪瘟抗体检测中，所检测的母猪样品猪瘟抗体较为理想，抗体合格率达到95%，变异系数低于25%，平均阻断率高于80%，但商品代猪群猪瘟抗体水平较差，猪瘟疫苗首免和二免后1个月抗体率仅为35%和60%，且抗体变异系数较高，说明该猪场采用的20日龄首免猪瘟疫苗，60日龄加强免疫的商品代猪瘟免疫程序没有达到免疫效果，尚未达到农业部规定的猪瘟抗体合格率70%最低要求，免疫失败。

猪瘟疫苗是我国兽用疫苗中为数不多的仅有一个疫苗毒株的商品疫苗，虽然猪瘟病毒流行毒株呈现多样性，基因亚型也不断复杂［3，4］，但研究表明［5］用于生产疫苗的“C”株仍然可以对现在流行的猪瘟野毒有很好的保护作用。仔猪可以通过吮吸免疫母猪初乳获得对猪瘟的被动免疫保护，但母源抗体随着仔猪日龄增长而降低［6］，因此需要通过接种疫苗产生主动免疫来增加猪群对猪瘟野毒感染抵抗力。养猪生产实践中，猪瘟免疫失败时有发生，影响猪瘟免疫效果有多种因素，但学者［7］普遍认为，猪瘟疫苗首免日龄不当是造成猪瘟免疫失败的主要原因之一。表3对仔猪母源抗体检测数据可知，21日龄和28日龄仔猪母源抗体合格率分别为85%和70%，而研究表明首免后猪瘟抗体上升率和上升幅度和母源抗体水平呈负相关［8-9］，母猪母源抗体对疫苗接种仔猪的主动免疫有明显抑制作用［10］，而该场采用的20日龄首免猪瘟疫苗时间过早，母源抗体和疫苗抗原形成抗原抗体复合物被机体免疫系统清除，首免没有形成记忆细胞从而导致二免后猪瘟抗体水平上升缓慢，是导致商品猪群免疫失败主要原因。

通过对母源抗体消长规律研究，将该猪场商品代猪群的猪瘟免疫程序调整为35日龄首免，65日龄二免，免疫剂量为2头份，通过对调整后两批商品代猪群抗体水平检测，抗体合格率大幅度提高，变异系数降低，整体抗体水平显著提高，但同时也发现，首免后的抗体合格率还没有超过70%，因为条件所限，试验只采取了一种免疫程序和免疫剂量，免疫程序是否还有进一步优化空间还需增加免疫程序试验进行比较。

通过仔猪猪瘟母源抗体消长规律来选择合适的免疫程序可以发挥猪瘟疫苗免疫最大效果，提高猪场疫病防控能力。

［1］ 赵德明，张仲秋，沈建忠.猪病学［M］.9版.北京：中国农业出版社，2009，325-335.

［2］ 杜希珍，高丽娜，赵海山，等. 规模化猪场母猪群猪瘟抗体血清学调查［J］.猪业科学，2009，26（6）：86-88.

［3］ 叶丙鑫，兰邹然，田夫林，等.山东省猪瘟流行毒株E2基因主要抗原编码区序列差异分析［J］.甘肃农业大学学报，2010，45（1）：20-24.

［4］ 陈田娇，何奇松，颜健华，等.广西猪瘟病毒E0和E2基因的克隆及序列分析［J］.中国畜牧兽医，2015，42（4）：789-795.

［5］ 宋立，王琴，涂长春，等.猪瘟兔化弱毒抗体对不同野毒株体内外中和保护试验的相关性研究［J］.中国兽医学报，2005，25（2）：113-115.

［6］ L A U N A I S M，A Y N A U D J M，CORTHIER G.Hoh vholrts vitud：active immunization of piglets with the Thiverval strain in the presence and absence of colostral passive immunity［J］.Veterinary of Microbiology，1978（3）：31-43.

［7］ G AR RANZ A A I，AMB R OG I A，PELLIZA B R，et al.Passive antibodies response and effect of the age of the swine on the swine on the vaccination against classical swine fever virus［J］. Rev Colom Ciene Pecua. 2007，20：484-489.

［8］ 慕国辉.规模化猪场仔猪猪瘟免疫主要相关因素的研究［D］.杨凌：西北农林科技大学，2013.

［9］ 王继英，牛晓燕，郝小静，等.21日龄猪瘟疫苗首次免疫前后仔猪抗体水平变化［J］.华北农学报，2011（S1）：57-61.

［10］ VANDEPUTTE J，TOO H L，NG F K，et al.Adsorption of colostral antbodies against classical swine fever， persistence of maternal antibodies， and effect on response to vaccination in baby pigs［J］. American journal of veterinary research，2001，62（11）：1805-1811.

2016-04-12）

韶关市科技计划项目（2013CX/N09，2014CX/N319）。

南文金（1981-），男，河南灵宝人，助理研究员，硕士，主要从事动物疫病防控技术研究