一种兽用补气健脾复方颗粒制剂对仔猪免疫功能和生长性能的影响

郭　磊，李　新

（1.周口市川汇区动物疫病预防控制中心，河南 周口 466000；

2.商丘市畜产品质量监测检验中心）

一种兽用补气健脾复方颗粒制剂对仔猪免疫功能和生长性能的影响

郭磊1，李新2

（1.周口市川汇区动物疫病预防控制中心，河南 周口 466000；

2.商丘市畜产品质量监测检验中心）

为观察一种兽用补气健脾复方颗粒制剂对仔猪免疫功能和生长性能的影响，试验以杜长大仔猪为试验动物，黄芪多糖为对照药物（200 mg/kg饲料），采用高、中、低（8 g/kg、4 g/kg、2 g/kg饲料）3个剂量，通过检测猪瘟抗体效价，检测血清中IL-2和IFN-γ含量。结果显示，该复方制剂高、中剂量（8 g/kg、4 g/kg饲料）能促进仔猪的生长发育，提高血清中IL-2、IFN-γ含量和猪瘟抗体水平。

补气健脾复方制剂；免疫功能；仔猪

目前，尽管在养猪生产中对许多疾病采用相应的疫苗进行预防，由于病原种类极其复杂，而且不断变异，使疫苗的研制往往滞后于疫病的发生，单纯依赖疫苗不能解决疫病的防治问题。解决猪疫病防治问题应从提高其内在免疫机能入手，通过增强其自身的抗病能力，达到预防疫病的目的。

中药具有高效、低毒、低残留等优点，其中许多种类还是很好的免疫增强剂，可以提高机体的免疫水平［1］。中药以其在提高免疫功能方面的独特优势，在畜禽业中得到了越来越普遍的推广应用。该试验为观察一种兽用补气健脾复方颗粒制剂（以下简称“复方制剂”）对仔猪免疫功能和生长性能的影响，对该复方制剂进行临床试验，进一步考察该制剂的疗效和毒副反应，为该制剂的大规模生产及应用提供合理、科学的临床试验数据。

1　材料与方法

1.1试验时间、地点

2012年4月15日至2013年5月8日河南省周口市某猪场、周口市川汇区动物疫病预防控制中心。

1.2材料

1.2.1试验动物选用200头断奶仔猪，由河南省周口市某猪场提供，仔猪品种为杜长大猪，断奶日龄为出生25～35 d（平均30 d），猪只健康状况良好。

1.2.2试验药品和试剂某复方制剂，批号：20120302；黄芪多糖粉，北京某公司，批号：20111123；猪瘟疫苗，广东永顺生物制药有限公司，批号：2011046；猪瘟正向血凝诊断抗原、阳性血清、阴性血清及稀释液由中国农科院兰州兽医研究所提供，批号为20121009、20121003和20121003；猪血清IL-2 ELISA检测试剂盒，天津索罗门生物科技有限公司；猪瘟血清IFN-γ ELISA检测试剂盒，天津索罗门生物科技有限公司；仔猪饲料，北京某饲料有限公司提供。

1.2.3主要仪器设备促凝管，湖南安信医用高分子材料有限公司，湘食药监械（准）字2009第2410045号；酶标仪（RT2100C），美国雷杜公司；电子天平（MR200A），上海第二天平仪器厂；电热鼓风干燥箱，北京市永光明医疗仪器厂；恒温培养振荡器（ZHWY-103D），上海智城分析仪器制造有限公司；超净工作台（LGJ-10），北京四环科学仪器厂。

1.3方法

1.3.1试验分组及处理将体质量相近、健康仔猪100头（公母各半），按照性别、体质量、窝别对等分配原则随机分为5组：试验组（A组、B组、C组）、黄芪多糖对照组（D组）和空白对照组（E组）。每组20头。试验组（A组、B组、C组）于平均31日龄（免疫前3 d）开始，按高、中、低三个剂量（8 g/kg、4 g/kg、2 g/kg饲料）拌料添加复方制剂1 w；黄芪多糖对照组（D组）同时段拌料添加黄芪多糖（200 mg/kg饲料）；空白对照组（E组）不添加任何药物。平均日龄34 d用1头份剂量（按说明书）进行猪瘟疫苗首免，于平均日龄65 d用1头份剂量进行猪瘟疫苗二免。并分别于平均日龄34 d、48 d和60 d称量各猪只体质量，计算料重比；静脉采血2 ml，析出血清，备用。试验分组及处理详见表1。

表1　试验动物分组及处理

1.3.2试验猪的管理试验猪于哺乳期（23 d）进行公猪去势，平均日龄30 d时断奶，转栏（由产仔房转入保育舍），分组，平均日龄60 d时称重结束试验。试验猪自由采食，自由饮水，试验组与对照组饲料配方相同，40 d更换保育猪后期料。

1.3.3测定指标及方法

1.3.3.1猪瘟抗体效价检测分别于平均34日龄、48日龄和60日龄试验猪静脉采血2 ml，析出血清，按试剂盒说明书采用正向间接血凝试验检测猪瘟抗体水平。

1.3.3.2血清中IL-2含量的检测对34日龄、48日龄和60日龄试验猪静脉采血制备的血清，用ELISA试剂盒检测其IL-2的含量，其操作方法和判定标准，均按说明书进行。

1.3.3.3血清中IFN-γ含量的检测对34日龄、48日龄和60日龄试验猪静脉采血制备的血清，用ELISA试剂盒检测其IFN-γ的含量，其操作方法和判定标准，均按说明书进行。

1.3.3.4生长性能测定34日龄和60日龄时分别称重，计算出初始平均体质量、结束时的平均体质量和平均增重；逐日逐栏称量记录饲料消耗量，计算饲料报酬（料重比）。料重比＝饲养期内所耗标准饲料量（kg）/同期增重（kg）

此外，还对试验猪群的精神状态、食欲、粪便状态及发病情况、死亡淘汰情况等进行临床观察。

1.4统计方法

采用spss19.0统计软件对数据进行统计分析。

2　结果与分析

2.1对仔猪猪瘟抗体效价的影响

34日龄，各组猪瘟抗体水平相近，差异不显著（P＞0.05）。48日龄，猪瘟抗体水平A、B组显著高于C、E组，差异显著（p＜0.05）。60日龄，猪瘟抗体水平，A、B组高于C、E组，差异显著（p＜0.05或p＜0.01）；D组高于E组，差异显著（p＜0.05）。结果详见表2。

表2　对仔猪猪瘟抗体效价的影响（pg/ml）

2.2对仔猪血清IL-2含量的影响

34日龄，各组仔猪血清IL-2含量水平相近，差异不显著（P＞0.05）。48日龄，血清IL-2含量，A组和B组显著高于E组，差异显著（p＜0.05）；C组、D组和E组，差异不显著（P＞0.05）。60日龄，血清IL-2含量，A组和B组显著高于C组和E组，差异极显著（p＜0.01）。结果详见表3。

表3　对仔猪血清IL-2的影响（单位：pg/ml）

2.3对仔猪血清IFN-γ含量的影响

34日龄，各组仔猪血清IFN-γ含量水平相近，差异不显著（P＞0.05）。48日龄，血清IFN-γ含量，A组和B组高于E组，差异显著（p＜0.01或p＜0.05）；D组和其他各组相比较，差异均不显著（P＞0.05）。60日龄，血清IFN-γ含量，A组和B组显著高于C组和E组，差异极显著（p＜0.01）；D组和其他各组相比较，差异均不显著（P＞0.05）。结果详见表4。

表4　对仔猪血清IFN-γ的影响（单位：pg/ml）

2.4对仔猪生长性能及饲料利用的影响

34日龄各组仔猪平均体质量相近，差异不显著（P＞0.05）。60日龄平均体质量和试验期平均增重，A组和B组高于C组和E组，差异显著（p＜0.05）；D组与其他各组相比，无显著差异（P＞0.05）。A组和B组的料重比低于D组，差异显著（p＜0.05）；D组低于C组和E组，差异显著（p＜0.05）。料重比A组和B组低于D组，差异显著（p＜0.05）；D组低于C组和E组，差异显著（p＜0.05）。结果详见表5。

表5　对仔猪生长性能及饲料利用率的影响

2.5对仔猪其他生理状况的影响

复方制剂刚添加到饲料中时，未见不良反应。通过对各组猪群的精神状态、食欲、粪便状况及发病、死亡等情况的临床观察，轻度腹泻C组和E组各2头次（发病率为8%）、B组和D组各1头次（发病率为4%），A组无腹泻猪只，各组之间无显著差异（P＞0.05）。其他情况各组均未显现异常，均无死亡。

3　讨论

该复方制剂中有黄芪、刺五加、甘草、茯苓等成分，其中多种中药能增强动物的体液免疫和细胞免疫。张训海等研究表明，黄芪多糖也可以作为体液免疫增强剂［2］。刺五加对多种动物具有免疫增强作用，能促进免疫器官的发育，增强免疫功能［3-5］。甘草多糖具有多种免疫增强功能，能激活网状内皮系统［6］，具有抗补体活性［7］，直接刺激B淋巴细胞增殖，诱导IgM、IgG的产生，还能诱生和促诱生干扰素，增强机体的杀伤细胞的活性［8］。王旭贞等报道，黄芪提取物能提高鸡血清ND和IBD抗体效价［9］。Han等研究表明刺五加多糖可以使分泌IgM的B细胞数量显著增加［10］。刘新义等通过检测猪瘟疫苗抗体水平，证实了黄芪多糖对猪免疫功能的增强作用［11］。刘霞等证实甘草多糖具有促进淋巴细胞增殖的作用［12］。邓媛媛等报道，茯苓不同提取物质部位能不同程度促进小鼠腹腔内吞噬百分率和吞噬指数，能明显增加小鼠血清内免疫因子IL-2和TNF-α含量［13］。邵珊等研究发现，黄芪多糖能增强猪对PRRSV灭活疫苗的免疫应答能力，主要通过极大地促进外周血淋巴细胞的增殖，使抗体提早产生并提高抗体滴度和IL-2表达水平［14］。

体液免疫是由B淋巴细胞介导的一种重要的特异性免疫反应，是机体抗御传染病的主要因素之一，主要评价指标为抗体水平。IL-2即白细胞介素2，是参与免疫应答的重要细胞因子。IFN-γ是由机体活化的T淋巴细胞和NK细胞产生的一种糖蛋白，除具有抗病毒、抗胞内寄生虫、抗细胞增殖外，还具有强大的免疫调节功能。故笔者将猪瘟抗体效价、血清IL-2含量、血清IFN-γ含量作为免疫功能的检测指标。

试验结果显示，复方制剂高、中剂量能显著升高仔猪猪瘟疫苗的抗体水平、血清IL-2含量、血清IFN-γ含量，且其效果均优于黄芪多糖。另外，复方制剂高、中剂量组平均体质量和试验期平均增重显著高于对照组，料重比显著低于对照组。说明复方制剂高、中剂量组能促进仔猪的生长发育，降低料重比。应该与复方制剂中富含有多种氨基酸、糖、叶酸、甜菜碱、亚麻酸、VA和VB，以及Fe、Ca、Mn、 Zn、Cr、Co等多种微量元素有关。

4　结论

经过该研究可以发现，复方制剂具有增强机体免疫功能和促进仔猪生长发育作用，综合试验结果和临床实际情况，建议以中剂量，即4 g/kg为推荐剂量。给药方式为：拌料，推荐剂量为：每千克饲料加入4 g复方制剂，连续使用7 d。

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