不同后处理富硒酵母对小鼠抗氧化力、免疫力及硒沉积的影响

邹　楠，王学东，阎　兵，李　彪，胡先勤，胡骏鹏，刘　琼（.武汉轻工大学，湖北武汉43003；.安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌443003）

不同后处理富硒酵母对小鼠抗氧化力、免疫力及硒沉积的影响

邹楠1，王学东1，阎兵1，李彪2，胡先勤1，胡骏鹏2，刘琼1
（1.武汉轻工大学，湖北武汉430023；2.安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌443003）

为研究不同后处理方式对富硒酵母应用效果的影响，本试验比较了活性富硒酵母、酶解富硒酵母和机械粉碎富硒酵母对饲喂霉变日粮小鼠生理生化机能的影响。结果显示，活性富硒酵母组在提高小鼠肝脏谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）水平上表现最佳，但与其他组差异不显著（P＞0.05）；机械粉碎富硒酵母组血清总超氧化物歧化酶（TSOD）和血凝集指标显著优于其他各组（P＜0.05）；而酶解富硒酵母组肝脏硒含量显著优于其他各组（P＜0.05）。该试验说明，不同后处理富硒酵母均具有缓解霉变日粮对动物负面影响的作用，但后处理方式不同，作用效果有差异。

富硒酵母；后处理；小鼠；抗氧化；免疫

［Abstract］Ⅰn order to explore the application effect of different post-processing selenium-enriched yeast（Se-Yeast），this paper compared the physiological activity changes ofmice fed moldy diet，which was treated with active Se-Yeast，hydrolysised Se-Yeast or crushed Se-Yeast.Results showed that the liver glutathione peroxidase（GSH-Px）in active Se-Yeastgroup was the highest，while therewas no significant difference among all groups（P＞0.05）.The serum total superoxide dismutase（T-SOD）and anti-SRBC antibody level in crushed Se-Yeast group was significantly higher than those of other groups（P＜0.05）.While the contentof tissue Se in the hydrolysised Se-Yeast group was higher than thatof other groups significantly（P＜0.05）.This experiment indicated that all the Se-Yeast above-mentioned could decrease the negative effects caused bymoldy diet，meanwhile the effect could be influenced by the post-processingmethods.

［Key words］selenium-enriched yeast；post-processing；mice；antioxidant；immunity

霉菌毒素污染会对动物机体的抗氧化和免疫机能等造成诸多负面影响，而硒具有提高动物机体抗氧化能力和免疫水平的作用。发酵制备的富硒酵母，可以通过不同的后处理技术得到不同类型的产品，其中包括具有酵母菌活性的富硒酵母（简称活性富硒酵母）、经机械粉碎失去酵母菌活性的富硒酵母（简称机械粉碎富硒酵母）及经过酶解自溶失去酵母活性的富硒酵母（简称酶解富硒酵母）等。为探讨不同后处理富硒酵母的应用效果差异，本试验比较了活性富硒酵母、酶解富硒酵母和机械粉碎富硒酵母对饲喂霉变日粮小鼠生理生化机能的影响，以期为选择富硒酵母的后处理方式提供参考。

1　材料与方法

1.1试验材料试验动物：雄性昆明小鼠48只，单只体重约20g，购自湖北省疾病控制中心。

富硒酵母：活性富硒酵母、酶解富硒酵母、机械粉碎富硒酵母，均为实验室自制。

试验日粮：对小鼠普通日粮进行人工霉变处理（高温高湿环境致霉）。检测其中主要霉菌毒素含量，如表1所示。由表1可以看出，试验日粮霉菌总数、黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮均已超标。

主要试剂：谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）检测试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒、丙二醛（MDA）检测试剂盒、考马斯亮蓝蛋白检测试剂盒、溶菌酶（LZM）测试盒等，均购自南京建成生物工程研究所。

表1　发霉饲料主要霉菌毒素指标检测结果及相应卫生标准

主要设备：低温冷冻离心机（CR22GⅠⅠ，日本日立Hitachi）；组织匀浆机（FG200，潍坊三水检验设备公司）；电子天平（PL-2002，上海精密科学仪器有限公司）；分光光度计（T6，北京普析有限公司）；恒温水浴锅（HH-S2，常州普天仪器制造有限公司）。

1.2试验方法试验动物分组与样品采集：为消除不同饲养环境对试验结果造成的影响，采用完全随机分组的方法，将48只小鼠随机分配成4组，即空白对照组（发霉饲料，灌胃0.86％生理盐水）、机械粉碎富硒酵母组（发霉饲料，灌胃机械粉碎富硒酵母悬液）、酶解富硒酵母组（发霉饲料，灌胃酶解富硒酵母悬液）和活性富硒酵母组（发霉饲料，灌胃活性富硒酵母悬液），每剂型组有12只小鼠，实行混笼饲养。先预饲养1周，然后进行灌胃试验，灌胃时间为4周。于每天15：00灌胃一次。各富硒酵母组中每天灌胃的硒剂量随小鼠体重调节，按照每10 g体重给予0.9μg硒计算。小鼠自由采食、饮水、每天更换一次垫料，保证鼠笼内的环境清洁（张宾和王予辉，2007）。在第35天试验结束后对小鼠进行体重称量，全群利用摘除眼球法采血，之后处死并对其解剖，采集肝脏，低温匀浆备用。血样于离心管内，放置约1 h，将凝固血与管壁剥离，使血清充分析出，2000 r/min离心10 min，收集血清，-20℃保存。

抗氧化指标检测：GSH-Px活性、T-SOD活性和MDA值均依照南京建成生物工程研究所提供的方法进行测定。

免疫指标检测：迟发型变态反应指标参照Corsini等（1997）提供的方法测定；血清溶血素的测定采用血凝集法（徐学瑛，1979）；溶菌酶的测定（比浊法）参照南京建成生物工程研究所提供的溶菌酶试剂盒LZM中的测定。

硒含量指测定：参照GB/T 5009.93-2003进行。

1.3数据处理所有数据均以 “平均数±标准差”表示，用SPSS12.0.1软件进行统计分析。

2　试验结果与分析

2.1不同后处理富硒酵母对小鼠肝脏抗氧化指标的影响不同后处理富硒酵母对小鼠肝脏抗氧化指标的影响结果见表2。由表2可以看出，添加富硒酵母各组的GSH-Px值均显著高于空白硒组（P＜0.05），其中，活性富硒酵母组最高，但各不同后处理富硒酵母组间无显著差异 （P＞0.05）；机械粉碎富硒酵母组T-SOD值显著高于空白硒组和酶解富硒酵母组 （P＜0.05）；MDA值各组之间未见显著差异（P＞0.05）。

表2　肝脏组织抗氧化指标

本试验中，饲喂霉变日粮后，小鼠肝脏GSHPx和T-SOD值下降，MDA值上升，提示霉菌毒素对小鼠机体的抗氧化能力有负面作用，富硒酵母具有缓解上述负面作用的趋势，但不同处理组间存在一定差异。

2.2不同后处理富硒酵母对小鼠血清免疫指标的影响不同后处理富硒酵母对小鼠血清免疫指标的影响结果见表3。由表3可见，血凝集抗体积数指标上机械粉碎富硒酵母组显著高于其他各组（P＜0.05），另外两个免疫指标迟发型变态反应和溶菌酶含量各组之间差异不显著（P＞0.05）。

表3　血清的各项免疫指标

本试验中，饲喂霉变日粮后，小鼠肝脏迟发型变态反应和血凝集抗体积数升高，溶菌酶含量下降，提示霉菌毒素对小鼠机体的免疫能力有负面作用。从数值上看，富硒酵母缓解了迟发型变态反应，提高了溶菌酶活力，显示出改善免疫机能的作用。机械粉碎富硒酵母组血凝集抗体积数提高，这可能与机械破碎后酵母细胞壁的形态有关，具体原因还有待进一步探讨。

2.3不同后处理富硒酵母对小鼠肝脏硒含量的影响不同后处理富硒酵母对小鼠肝脏硒含量的影响见表4。表4结果表明，添加不同后处理富硒酵母的各组肝脏硒沉积量均极显著高于空白组（P＜0.01）。各富硒酵母组之间也存在一定差异，酶解富硒酵母组硒沉积量显著高于活性富硒酵母组和机械粉碎富硒酵母组（P＜0.05）。

表4　肝脏组织样硒的含量

本研究中各富硒酵母组肝脏硒水平均在2.0 mg/kg以上。这提示，摄入霉变日粮后，小鼠机体需要更多的硒储备，以利于缓解霉菌毒素的负面影响。

3　讨论与小结

硒元素具有提高动物机体抗氧化能力和免疫水平的作用 （王冠兴等，2008；Kouadio等，2007）。不同来源的硒应用效果不同，这与各种形态的硒在吸收、转运和代谢的方面的差异有关。同一来源的硒，受各种因素的影响，应用效果也可能不同（陈忠法等，2003）。

富硒酵母是发酵生产的制剂，其最初是单细胞形态，也可继续通过酶解或机械加工打开细胞壁，以促进其中硒成分的释放。研究显示，单细胞形态的富硒酵母在动物消化道内会发生自溶现象，释放出包含硒成分的内容物组分，发挥补硒的作用（阎兵等，2011）。目前，关于不同后处理工艺制备的富硒酵母的应用效果研究较少。

本试验中，小鼠饲喂发霉日粮后，其机体抗氧化和免疫能力受到一定程度的负面影响，通过应用富硒酵母，上述负面作用得到缓解。不同后处理方法制备的富硒酵母在应用效果上存在一定差异。活性富硒酵母在提高小鼠肝脏GSH-Px水平上表现最佳，但与其他组差异不显著（P＞0.05）；机械粉碎富硒酵母组血清T-SOD和血凝集指标显著优于其他各组（P＜0.05）；而酶解富硒酵母组肝脏硒含量显著优于其他各组（P＜0.05）。

本试验结果提示，富硒酵母的后处理工艺影响硒的释放及其在机体内的吸收利用。同时，由于富硒酵母自身除硒元素外，还含有其他诸多成分，这些成分也会收到后处理的影响，进而最终影响产品的应用效果，其原因还有待今后深入探讨。

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S816.7

A

1004-3314（2016）08-0040-03

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20160811