高效液相色谱法在药物分析中的应用

卫莉玲 简艳婷 林晓旭 林亮（中国广州分析测试中心， 广东 广州 510070）

高效液相色谱法在药物分析中的应用

卫莉玲 简艳婷 林晓旭 林亮
（中国广州分析测试中心， 广东 广州 510070）

高效液相色谱法具有测量速度快、灵敏度高、回收率好等多项优点，已经在多个领域得到广泛应用，本文将对该法在药物分析中的应用进行简要介绍。

高效液相色谱法；药物分析；应用

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）是在气相色谱理论的基础上发展起来的，该法在高压下测量，色谱柱压降明显，测量速度快，可达到0.1-10.0mL/min；灵敏度高，耗样量少，分离效果好等多项优点，为实现对药品的快速、高效、高灵敏度的分离测定奠定了基础［1］。本文将围绕高效液相色谱法在药物分析中的应用进行分析。

1 高效液相色谱法在药物分析中的应用

1.1 1HPLC在天然药物分析中的应用

天然药物主要来源于植物，此外，动物和矿物也是药物来源的重要组成部分。天然药物化学成分复杂，因此其药效可能有一种，也可能有多种，这就给药物质量控制提出了严格的要求。HPLC法的利用可对天然药物的成分进行准确分析，并能对其含量进行精确测定。以西洋参为例：西洋参是五加科植物，味苦、性凉、入心、肺、肾经，具有显著的补益功能。西洋参的主要成分是皂苷类，尤其是Rb1、Rb2、Rc、Rd等7种皂苷质量分数达到90%以上，成为评价西洋参药性的重要指标。2005年，陈军辉等［2］利用HPLC法对12种西洋参的7种人参皂苷进行测定，测定条件如下：梯度洗脱，Alltima Cu色谱柱，流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液；流速控制在1.2mL/min，温度设定为35℃。实验仪器采用上海声源超声波仪器设备有限公司的高效液相色谱仪。在最佳色谱条件下，各种成分在一定浓度范围内呈现较好的线性关联性，7种人参皂苷的回收率达到94.%～97.9%，结果令人满意。表1为实验结果记录数据。

表1 人参皂苷加样回收率试验结果（n=3）

1.2 HPLC在抗生素类药物分析中的应用

抗生素是通过微生物或其他方法产生的化学物质，该物质在高度稀释的情况下，仍然有很强的抑制或灭杀微生物的性能，因此在临床得到了广泛应用。传统的分析方法分析时间长、专一性较差，而高效液相色谱法在抗生素类药物检测中发挥了巨大的作用。Raphael Denooz等［3］利用高效液相色谱和紫外检测器对人体血浆中的5中β-内酰胺类抗生素进行了检测，流动相采用乙腈-磷酸盐缓冲溶液（pH7.4），梯度洗脱；血浆样品经过固相萃取柱净化后进入HPLC进行分析，血浆样品回收率达到93.2%以上，结果令人满意。

1.3 HPLC在毒物分析中的应用

甲基苯丙胺（MA）的主要活性代谢物苯丙胺（PA）与MA具有类似的药理作用，但其毒性较强，成人一次用量达到PA30mg就会出现中毒反应，达到200mg就会使人中毒致死；MA和PA是滥用药物“摇头丸”的常见成分。杨小红等［4］利用HPLC法对临床中毒患者血浆中的MA和PA含量进行了测定。测定方法如下：先将血浆样品碱化，然后通过固相萃取柱净化，再用盐酸（0.3%）溶液洗脱；色谱柱选用岛津CLCC18柱，流动相选用乙腈-甲醇-磷酸二氢钾（25mmol/L）缓冲溶液，检测波长定为210nm，检测时间为60min，为临床的快速诊断和抢救提供了可靠的依据。

1.4 HPLC在药代动力学中的应用

HPLC法除可对药物成分和含量进行分析外，还能对药物在肌体内的浓度进行测定，然后结合相关的数据分析技术，对药物代谢动力学进行分析。Gholamreza Bahramin等［5］利用高效液相色谱法对人血清中的阿奇霉素进行了分析，方法如下：利用己烷对血清样品进行处理后用FMOC-Cl进行衍生，然后荧光检测；色谱柱选用苯基柱；流动相选用磷酸盐缓冲-甲醇，定量方法为内标法。血药浓度在10-500ng/mL范围内呈现较好的线性关系，检测灵敏度可达到10ng/mL。HPLC法在药代动力学上的研究可为药代动力学软件提供数据，经过专业的数据分析后可获得吸收半衰期、消除半衰期、达峰时间、最大血药浓度一系列动力学参数，为药物的深入分析和研制提供了参考。

2 结语

随着科学技术的不断发展，HPLC技术将与其他的先进技术联合使用，进一步提高药物分析的速度、质量和灵敏度，为我国医学水平的提高和医疗事业的发展提供重要保障。

［1］刘丽敏.高效液相色谱在中草药和抗生素类药物分析中的应用［D］.西南大学，2008.

［2］朱余兵，周志娟，于翠霞，邹建军，张晶晶，杨小红.HPLC法测定人血浆中奈韦拉平的浓度［J］.中国药房，2011，06：512-513.