凝胶渗透GC-QQQ法测定白酒中六六六与滴滴涕农药残留

姜　利　侯素丽　汤有宏,2　刘国英,2　张光耀　高江婧　张大军

(1.安徽古井贡酒股份有限公司，亳州 236800；2.安徽省固态发酵工程技术研究中心，亳州 236820)



凝胶渗透GC-QQQ法测定白酒中六六六与滴滴涕农药残留

姜利1侯素丽1汤有宏1,2刘国英1,2张光耀1高江婧1张大军1

(1.安徽古井贡酒股份有限公司，亳州 236800；2.安徽省固态发酵工程技术研究中心，亳州 236820)

采用三重串联四级杆气质联用仪，建立了白酒中六六六和滴滴涕残留的快速检测方法。白酒去酒精后，采用二氯甲烷+丙酮提取，有机相用凝胶渗透进行净化、浓缩；经HP-5MS毛细管柱分离后进行质谱分析，采用选择性离子检测模式，以子离子丰度比定性，内标法定量。六六六与滴滴涕在0.01～0.2mg/L质量浓度范围内线性关系良好(相关系数均大于0.99)，方法检出限为0.20～1.0μg/L。白酒中六六六与滴滴涕的3个添加水平的回收率在80.2%～108.2%，重复性的相对标准偏差(RSD)在2.0%～4.6%之间。该方法准确可靠，适用于白酒中六六六与滴滴涕残留的定性定量分析。

三重串联四级杆气质联用仪凝胶渗透色谱白酒六六六滴滴涕

20世纪40年代 DDT、六六六两种有机氯化合物杀虫药开始使用，由于它们防治面广，药效比当时的其他农药好，还由于它们的急性毒性低，而且残留毒性尚未被发现，因而被广泛用于防治作物的害虫。六六六与滴滴涕的缺点是不易被生物分解，造成残留而污染环境,至今仍在全球范围的各种环境介质中广泛存在。有机氯农药因其高残留性及高危害性引起了人们的广泛重视[1]。白酒是以高粱等粮食为主要原料经糊化、发酵、蒸馏而成，虽然经过高温过程，减少了农药残留量，但仍有一部分可能会残留在酒中，存在潜在威胁。因此建立一种准确、灵敏的分析白酒中有机氯农药残留的检测方法具有重要意义[2]。

目前国内外有关有机氯农残检测的研究报道很多，主要是以GC-ECD、GC-MS为主，样品前处理是农残检测的关键步骤，液态样品的前处理主要有固相萃取、分散固相萃取、固相微萃取、凝胶渗透等[3]。本实验采用凝胶渗透色谱处理样品，建立了三重串联四级杆气质联用仪MRM方法测定白酒中六六六与滴滴涕的方法，该方法定性准确，灵敏度与准确度均能满足农残的分析要求。

1　材料与方法

1.1仪器

安捷伦三重串联四级杆气质联用仪7000C(配EI源)；瑞士步琪R210型旋转蒸发仪；上海磐合Lctech Gmbh型全自动凝胶渗透色谱仪。

1.2试剂

有机氯标准品(六六六4种异构体：α-666、β-666、γ-666和δ-666；DDT的4种异构体：p.p’-DDT、o.p’-DDT、p.p’-DDE和p.p’-DDD，农业部环境保护科研检测所)；环氧七氯(100mg/L，农业部环境保护科研检测所)；二氯甲烷(HPLC);丙酮(HPLC);无水硫酸钠(分析纯，烘干后储存于干燥器中，冷却后备用)。

1.3色谱条件

色谱柱：安捷伦HP-5MS毛细管柱(30m×0.25 mm(内径)×0.25μm)[4]；进样口温度250℃；传输线温度：280℃；载气：氦气，纯度99.999%；流速：1mL/min；进样方式：不分流进样；进样体积：1μL[5,6]。

1.4标准曲线的建立

吸取六六六与滴滴涕的混合标准品，加入一定量的环氧七氯，用正己烷定容分别配制成不同浓度的标准溶液。在MRM方法条件下测定，以环氧七氯为内标绘制标准曲线。

1.5样品前处理方法

1.5.1样品的提取

吸取25mL酒样(加入一定量内标)于旋转蒸发瓶中，40℃旋蒸除去酒精。去除酒精后将样品转移至分液漏斗中，加入20mL二氯甲烷+丙酮(4∶1)萃取，静置分层后取有机相(经25g无水硫酸钠)。重复上述步骤2次，合并有机相于样品瓶中[7]。

1.5.2样品的净化

有机相在线浓缩后进入凝胶渗透柱净化，流动相为环己烷+乙酸乙酯(1∶1)；

收集洗脱液并进行在线浓缩定容，上样进行分析。

1.6样品的定性

若样品中待测物质与标准品的保留时间一致，同时所选定性离子的相对丰度比与标准品对应的离子相对丰度比一致或偏差在允许范围内，即可进行定性确认，判定样品阳性检出。

2　结果与讨论

2.1质谱仪器条件的优化

通过进行试验，选定六六六、滴滴涕与环氧七氯9种物质的母离子、子离子以及碰撞能。具体内容见表1。

表1　MRM参数的确定

2.2线性关系与定量限

按1.4方法，以六六六和滴滴涕化合物标准溶液的浓度为横坐标，定量离子对的峰面积为纵坐标对一系列的标准溶液进行测定，各物质标准含量在0.01～0.2mg/L范围内呈现良好的线性关系，其相关系数均大于0.995，满足定量要求。本方法采用空白基质进行加标试验，以其定量离子色谱峰的信噪比(S/N)3确定六六六与滴滴涕四种异构体的检出限为0.20～1.0μg/L，图1为六六六、滴滴涕标准溶液(MRM)谱图。

2.3方法重现性与加标回收率试验

取同一白酒样品共18份，平均分为3组，各组分别添加不同浓度的六六六与滴滴涕混合标准溶液，进行样品加标回收实验，每个水平测定6次，在3个浓度添加水平上，六六六与滴滴涕的平均回收率均在80.2%～108.2%。结果见表2。

表2　各个农药组分的回收率

3　结论

实验研究建立了凝胶渗透GC-QQQ法检测白酒中的六六六与滴滴涕残留的快速测定和确证方法，该方法样品前处理操作简便，与公开报道的方法相比，测定结果线性关系良好，相关系数R2均大于0.995，检出限为0.20～1.0μg/L，加标回收率在80.2%～108.2%之间，精密度与准确度较好，方法的回收率和重现性能满足白酒中的六六六与滴滴涕残留定性和定量检测要求，适用于进行白酒中六六六与滴滴涕的监控检测及质量安全评估[8]。

[1] 杨抗震,张云,李洁莉,等.食品中六六六和滴滴涕残留检测方法研究进展[J].北京农业,2012,(3):108-109.

[2] 李俊,王震,庞宏宇,等.白酒中多种拟除虫菊酯类农药残留检测方法[J].酿酒科技,2013,(11):98-100.

[3] 张志罡,李勇,朱兆洲.GC-MS分析中的样品制备和前处理技术[J].生命科学仪器,2010,(8):31-33.

[4] 王蓉,袁东,付大友,等.气质联用测定白酒中的有机氯农药残留[J].酿酒科技,2007,(12):102-104.

[5] 李媛,肖丽和,殷果,等.分散固相萃取-气相色谱-三重四级杆串联质谱法测定蒺藜中17中农药残留[J].药物分析杂志,2013,33(4):661-668.

[6] 施家威,李绩革,王玉飞,等.固相萃取-气相色谱/三重四级杆串联质谱分析蔬菜中43种农药残留[J].色谱,2010,(12):1137-1143.

[7] 陈楠楠,高红波,钟其顶,等.分散固相萃取GC-MS法快速测定葡萄酒和葡萄中22种农药残留[J].酿酒科技,2012,(7):119-123.

[8] DB34/T 1075-2009,蔬菜、水果、粮食、茶叶中30种有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留同时测定方法——气相色谱法[J].

Determination of pesticide residues of BHC and DDT in liquor by gel permeation chromatography(GPC)and GC-QQQ.

Jiang Li1,Hou Suli1,Tang Youhong1,2,Liu Guoying1,2, Zhang Guangyao1,Gao Jiangjing1,Zhang Dajun1

(1.AnhuiGujingGongjiuCo.Ltd.,Bozhou, 236820,China; 2.AnhuiSolid-StateFermentationEngineeringTechnologyResearchCenter,Bozhou236820,China)

After the evaporation of alcohol from liquor, the organic phase is extracted by methylene chloride and acetone，then purified and condensed by gel permeation chromatography method. The target analyte is detected by selective ion detection mode， qualitatively confirmed by abundance ratio of ions，and quantified by internal standard method.BHC and DDT have a good linear relationship (correlation coefficients are greater than 0.99) in mass concentration of 0.01-0.2 mg/L, the detection limit is 0.20-1.0 μg/L. At three spiked levels of BHC and DDT in liquor，the average recovery rates are from 80.2% to 108.2% and the repeatability relative standard deviations (RSDs) are between 2.0% and 4.6%. The method is accurate and reliable，it can be used for the qualitative and quantitative analysis of BHC and DDT residues in liquor.

gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry (GC-QQQ); gel permeation chromatography; liquor; BHC;DDT

姜 利，女，助理工程师，安徽古井贡酒股份有限公司技术中心研究员，从事酿酒发酵技术研究。

10.3936/j.issn.1001-232x.2016.02.010

2015-07-09