参蒜混合液对高脂膳食大鼠的抗氧化作用试验

白雪松，郗艳丽，杜　鹃，李善姬

（吉林医药学院公共卫生学院，吉林 吉林 132013）

参蒜混合液对高脂膳食大鼠的抗氧化作用试验

白雪松，郗艳丽，杜鹃，李善姬

（吉林医药学院公共卫生学院，吉林 吉林 132013）

研究不同配比的黑参黑蒜混合液对高脂膳食大鼠的抗氧化作用。方法将50只成年Wisrar大鼠按体重随机分为5组，即空白对照组、高脂模型组、参蒜混合液A1、A2、A3给药组，每组10只（雌雄各半）。其中，空白对照组给予普通饲料；其余各组给予高脂饲料；A1、A2、A3组分别以3种不同配比参蒜混合液灌胃。每天1次，连续30 d。试验结束后处死大鼠，取大鼠肝脏和肾脏称重，计算其肝体指数和肾体比值，并检测肝、肾超氧化物歧化酶（Superoxide Dis⁃mutase，SOD）的活力和丙二醛（Malondialdehyde，MDA）的含量。结果A3给药组的大鼠肝体指数较高脂模型组显著降低（P<0.05）；A1给药组大鼠的肾体比值与高脂模型组相比显著降低（P<0.05）；3个参蒜混合液给药组大鼠肝脏SOD活性与高脂模型组相比均显著提高（P<0.05）；A1、A3给药组大鼠肝脏组织中MDA含量与高脂模型组相比显著降低（P< 0.05）；A2给药组大鼠肾脏组织中MDA含量与高脂模型组相比显著下降（P<0.05）。结论是参蒜混合液可提高高脂膳食大鼠的抗氧化能力。

黑参黑蒜混合液；高脂膳食；大鼠；抗氧化

人参是五加科多年生草本植物，性温味甘，具有大补元气、安神生津之功效[1]。人参中含有的人参皂苷、人参多糖、黄酮等活性物质均具有较强的抗氧化活性。黑参是鲜人参经反复蒸制干燥而成的炮制品，炮制过程中的加热处理能够提高人参的自由基清除能力，相比于白参、红参具有更好的抗氧化作用[2]。大蒜是一种药食兼用食物，含有多种氨基酸、丰富的维生素和矿物质、30余种含硫成分，有较强的抗氧化活性，在抗动脉粥样硬化、冠心病、老年性退行性病变等与氧化损伤相关的疾病中发挥着重要作用[3]。但生蒜化学物质不稳定，无法令人体更好吸收和达到满意的临床疗效。黑蒜是由新鲜生蒜在高温高湿的环境下，不添加任何添加剂自然发酵而成。黑蒜没有大蒜的刺激味，味道酸甜，口感好，可直接食用。本试验通过建立高脂膳食大鼠动物模型，研究了不同配比的黑参黑蒜混合液对高脂膳食大鼠的抗氧化作用，为二者在食品、保健品、药用等方面的进一步开发和利用提供科学依据。

1　材料与方法

1.1实验动物50只健康成年Wistar大鼠，雌雄各半，体重210±20 g。由吉林医药学院动物实验中心提供。饲养于温度22℃±2℃，湿度50%±5%。

1.2试验饲料高脂饲料配方：蛋黄粉10%、猪油10%、胆固醇1%、牛胆盐0.2%、基础饲料78.8%。

1.3动物分组与处理将50只大鼠在试验环境下适应性喂养3 d后，按体重随机分为5组，即空白对照组、高脂模型组、高脂A1给药组、高脂A2给药组和高脂A3给药组，每组10只（雌雄各半），连续喂养30 d。空白对照组给予普通饲料，其他各组给予高脂饲料。空白对照组和高脂模型组每天灌胃生理盐水，高脂给药组给予不同浓度参蒜混合液灌胃，A1给药组：黑参∶黑蒜=4∶1；A2给药组：黑参∶黑蒜=1∶1；A3给药组：黑参∶黑蒜=1∶4。连续灌胃30 d后，禁食16 h，水合氯醛麻醉，眼眶取血，颈椎脱臼处死大鼠，迅速取出肝脏和肾脏，按常规方法制成10%组织约浆液备用（组织∶生理盐水=1∶9）。

1.4黑参黑蒜提取液的制备将700 g新鲜吉林市售大蒜去皮洗净后放入发酵罐中蒸制30 h，制得黑蒜，烘干后加2 500 mL蒸馏水煮18 h制备2 200 mL黑蒜提取液，用旋转蒸发仪浓缩至375 mL。人参为吉林省通化市集安市售5年参，取500 g人参放入发酵罐中蒸制30 h后变为黑参，阴凉处风干后加3 000 mL蒸馏水煮18 h制备2 700 mL黑参提取液，用旋转蒸发仪浓缩至400 mL。分别用高压蒸汽法消毒灭菌，冷藏备用。

1.5试剂胆固醇、牛胆盐、蛋黄粉（郑州龙晨食品添加剂有限公司）；超氧化物歧化酶试剂盒、丙二醛试剂盒、蛋白定量测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；按照试剂盒检测方法测定，发酵罐（韩国）。

1.6数据处理所有的数据用SPSS11.5软件进行统计分析，数据均以平均值±标准误差（Mean± SE）表示，各试验组差异检验使用单因素方差分析，两两比较使用Duncan′s multiple range test。

2　结果

2.1参蒜混合液对高脂大鼠体重、肝体指数、肾体比值的影响试验结果表明，A3给药组的肝体指数较高脂模型组显著降低（P<0.05），A1给药组、A2给药组以及A3给药组大鼠的肾体比值与空白对照组相比显著降低（P<0.05）；A1给药组大鼠的肾体比值与高脂模型组相比显著降低（P<0.05）。结果见表1。

表1　参蒜混合液对高脂大鼠体重、肝体指数、肾体比值的影响 （n=10，±s）

表1　参蒜混合液对高脂大鼠体重、肝体指数、肾体比值的影响 （n=10，±s）

注：*：与空白对照组有显著性差异（P<0.05）；#：与高脂模型组有显著性差异（P<0.05），下表同

肝脏　肾脏　肝体　肾体组别　体重/g　重量/g　重量/g指数/%　指数/%空白对照组 309.64±79.22　8.44±2.25 2.04±0.50 2.75±0.16 0.0065±0.00038高脂模型组 318.88±75.71　9.03±1.99 1.97±0.40 2.89±0.52 0.0063±0.0010 A1给药组　328.79±85.25　8.52±1.76 1.86±0.46 2.64±0.34 0.0057±0.00036*#A2给药组　328.11±89.39　8.73±2.06 1.96±0.54 2.69±0.17 0.0060±0.00032*A3给药组　343.27±101.25 8.73±2.33 2.04±0.56 2.57±0.17#0.0061±0.00061*

2.2参蒜混合液对高脂大鼠肝脏、肾脏的SOD活力和MDA含量的影响本次试验结果表明，高脂模型组大鼠肝、肾SOD活力较空白对照组明显降低，有显著性差异（P<0.05），A1、A2、A3给药组大鼠肝脏SOD活力较高脂模型组均显著升高（P< 0.05）。高脂模型组大鼠肝、肾MDA含量与空白对照组相比显著增高（P<0.05），A1、A3给药组大鼠肝脏MDA含量较高脂模型组均显著降低（P< 0.05）。A2给药组大鼠肾脏组织中MDA含量与高脂模型组相比显著下降（P<0.05）。结果见表2。

表2　参蒜混合液对高脂大鼠肝脏、肾脏的SOD活力和MDA含量的影响 （n=10，±s）

表2　参蒜混合液对高脂大鼠肝脏、肾脏的SOD活力和MDA含量的影响 （n=10，±s）

肝SOD活力肾SOD活力肝MDA含量　肾MDA含量组别　（U/mgprot）（U/mgprot）（nmol/mgprot）（nmol/mgprot）空白对照组210.86±3.17 101.52±2.75 34.32±11.02　17.41±1.78高脂模型组191.71±10.25*94.26±3.26*44.53±4.30*　44.92±2.06*A1给药组　201.16±7.00*#95.13±6.18*21.94±4.00*#　45.43±1.17*A2给药组　200.60±7.55*#100.37±2.81 34.70±20.66　40.14±0.88*#A3给药组　202.49±3.78*#99.74±4.39 33.58±6.21#　44.30±0.94*

3　讨论

人参经深加工后可获得黑参，药理作用与生晒参药理作用相似。据报道，与传统的白参和红参相比，黑参更具抗氧化活性[4]。黑蒜中除含有大蒜素类、氨基酸、维生素类外，还有还原糖、蔗糖、多聚糖等。据报道，采用发酵工艺将这种普通大蒜加工成的黑蒜，它在保留生大蒜原有成分的基础上，使生大蒜的抗氧化、抗酸化功效大大提升[5]。黑蒜的抗氧化能力的增加在一定程度上与其含有的总酚和美拉德反应产物的增加有关[6]。肝脏是脂类代谢的重要场所，肝脏中的脂肪含量约占肝脏重量的5%，而在高脂血症状态下，输入肝脏的脂质和脂肪酸过多，肝脏脂蛋白合成代谢就会发生障碍，导致脂质代谢的紊乱，而脂肪酸氧化不足时，脂肪就会在肝脏沉积发生脂肪变性或形成脂肪肝，体积变大，重量增加。肾脏肥大是出现最早、最明显的肾脏病理改变[7]。本次试验研究结果表明，3个参蒜混合液给药组肝系数与高脂对照组相比均有降低趋势，但只有A3给药组的降低作用显著。可能原因为试验周期较短，高脂模型组肝脏病理变化不明显。试验结果表明，参蒜混合液对高脂膳食大鼠具有降低肝体指数的作用，预防脂肪肝的形成，具有护肝作用。3个参蒜混合液给药组的肾体比值较高脂模型组有下降趋势，但只有A1给药组对肾体比值降低作用显著。结果表明，参蒜混合液对高脂膳食大鼠肾体比值有一定降低作用，在一定程度上可以预防与肾脏肥大相关的病理改变。SOD是一种有效的抗氧化剂，是体内清除自由基的主要酶，对机体的氧化与抗氧化平衡起着非常重要的作用。因此，SOD活性高低反映了机体抗氧化的能力[8]。MDA作为细胞膜不饱和脂肪酸过氧化反应的最终产物，可反映机体内脂质过氧化的程度，MDA含量的增减代表着脂质过氧化作用的强弱，间接反映出细胞的受损程度[9]。本次试验研究结果表明，A1、A3给药组大鼠肝脏中MDA含量低于高脂模型组。A2给药组大鼠肾脏组织中MDA含量与高脂模型组相比显著下降，这表明参蒜混合液可通过提高酶类抗氧化物质来调节氧化应激水平，减少脂质过氧化物的产生，起到保护肝、肾功能的作用。

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S865.1+2

B

0529-6005（2016）07-0095-02

2015-12-10

吉林省教育厅“十二五”科学技术研究（吉教科合字2015第400）；吉林省卫生计生科研项目（2015Z070）

白雪松（1978-），男，副教授，硕士，研究方向为膳食营养与健康，E-mail：baixueso@163.com

李善姬，E-mail：shanji@hotmail.com