葛根素的大孔树脂纯化及抗氧化性研究

吕梦

摘 要：主要研究了大孔树脂纯化葛根素工艺及抑菌性质。以葛根素吸附率为指标，通过正交试验确定大孔树脂纯化葛根素最佳工艺条件，即上样液浓度0.8 g·mL-1，吸附流速9 BV·h-1，乙醇浓度80%，洗脱流速4 BV·h-1。同时试验结果表明，葛根素对羟自由基具有较强清除能力，因此，葛根素具有较好的抗氧化活性。

关键词：葛根素；大孔树脂；纯化；抗氧化性

中图分类号：TS202.3 文献标识码：A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.08.004

Abstract： This study mainly discussed the purification of puerarin by macroporous resin adsorption and its antioxidant activity. Taking the adsorption rate of puerarin as indicator， the optimum condition of purification of puerarin by macroporous resin adsorption were also determined by orthogonal test， they were sample concentration for 0.8 g·mL-1， adsorption current velocity for 9 BV·h-1， ethanol concentration for 80%， desorption current velocity for 4 BV·h-1. And the experimental results showed that puerarin had strong scavenging ability to hydroxyl free radical， so puerarin had strong antioxidant activity.

Key words： puerarin； macroporous resin adsorption； purification； antioxidant activity

葛根是将野葛根部干燥加工得来，具有较高的药用价值，通常作为中药成分适用，味甘、辛、性平，有生津、壮阳、退热、透疹等多种功能，目前已被我国收入到药食资源目录当中。葛根中富含的葛根素具有较高的保健功能和价值，是保健食品常用成分之一。葛根素有利于提高心肌功能、疏通血管、扩张冠脉、增强心肌收缩性、加快血液循环等，在治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞、视网膜动脉静脉阻塞、耳聋等疾病方面有不错的效果[1-3]。

为提高葛根素利用价值和经济效益，解决葛根素生产成本过高的问题，本试验采用大孔树脂吸附法提取葛根素，这种方法操作简单，成本较低，有助于进一步改进葛根素提纯工艺，促进行业技术水平发展[4]。

1 材料和方法

1.1 原料与试剂

葛根：广东省农科院提供；AB-8大孔树脂：广东环凯生物科技公司；葛根素标准品：广东环凯生物科技公司；乙醇、硫酸、氢氧化钠、石油醚、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚等：实验室提供。

1.2 试验仪器与设备

HK-02型小型中药粉碎机（湖南中诚制药机械厂）；UV-1900紫外分光光度计（美析仪器）；电子天平（深圳立远仪器）；TG16-WS台式高速离心机（上海美伊设备公司）；RV 8 V旋转蒸发仪（德国IKA）等。

1.3 试验方法

1.3.1 大孔树脂纯化葛根素工艺流程 葛根素提取液→上柱→AB-8大孔树脂→乙醇洗脱→收集→减压浓缩→冷冻干燥→葛根素[5-6]。

1.3.2 葛根素的测定

吸附率=（C0-C1）/ C0×100%[7-8]

式中，C0为原液中葛根素浓度，mg·mL-1；C1为吸附液中葛根素浓度，mg·mL-1。

1.3.3 羟自由基清除能力的测定 采用邻二氮菲-Fe2+氧化法测定[9-12]。

2 结果与分析

2.1 大孔树脂纯化葛根素工艺优化

2.1.1 不同乙醇浓度的纯化效果 选取40%，50%，60%，70%，80%，90%等6个水平的乙醇浓度，设定其他各因素条件，在不同梯度乙醇浓度下，观察葛根素纯化效果。由图1可以看出，乙醇浓度为70%时，葛根素纯化效果较好。

2.1.2 不同吸附流速的纯化效果 选取3，5，7，9，11，13 BV·h-1等6个水平的吸附流速，设定其他各因素条件，在不同梯度吸附流速下，观察葛根素纯化效果。由图2可以看出，吸附流速为9 BV·h-1时，葛根素纯化效果较好。

2.1.3 不同洗脱流速的纯化效果 选取2，4，6，8，10，12 BV·h-1等6个水平的洗脱流速，设定其它各因素条件，在不同梯度洗脱流速下，观察葛根素纯化效果。由图3可以看出，洗脱流速为6 BV·h-1时，葛根素纯化效果较好。

2.1.4 不同上样液浓度的纯化效果 选取0.2，0.4，0.6，0.8，0.10，1.2 g·mL-1等6个水平的上样液浓度，设定其他各因素条件，在不同梯度上样液浓度下，观察葛根素纯化效果。由图4可以看出，上样液浓度为0.8 g·mL-1时，葛根素纯化效果较好。

2.1.5 葛根素纯化条件优化试验 由表1、表2可以看出，葛根素的大孔树脂纯化工艺的各因素主次顺序为D > B >A>C，即洗脱流速>吸附流速>上样液浓度>乙醇浓度。葛根素的大孔树脂纯化工艺条件最优组合为A2B2C3D1，即上样液浓度0.8 g·mL-1，吸附流速9 BV·mL-1，乙醇浓度80%，洗脱流速4 BV·h-1。