脑出血闭脱证病人血浆胰岛素样生长因子-1及其结合蛋白3表达的临床观察

高丽丽，吴成翰，吕　剑



脑出血闭脱证病人血浆胰岛素样生长因子-1及其结合蛋白3表达的临床观察

高丽丽1，吴成翰1，吕剑2

1.福建省第二人民医院(福州350003)，E-mail：gaolilidexingfu@163.com；2.泰山医学院附属莱芜钢铁集团有限公司医院

摘要：目的观察急性脑出血(ICH)病人血浆中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其结合蛋白3(IGFBP3)的表达与出血中风闭脱证的关系。方法180例急性脑出血病人根据中医辨证分为3组：阴闭组、阳闭组、脱证组。同期180名健康体检者作为对照组。取观察者空腹静脉血检测IGF-1及IGFBP3的表达，研究IGF-1及IGFBP3的表达与中医闭、脱证的关系。结果ICH病人血浆中IGF-1及IGFBP3的表达明显低于正常对照组(P<0.01)。ICH病人中阳闭、阴闭、脱证3组之间血浆IGF-1及IGFBP3表达差异有统计学意义(P<0.01)，按IGF-1及IGFBP3表达大小顺序排列为：阳闭组>阴闭组>脱证组。结论急性脑出血后血浆中IGF-1及IGFBP3表达量的高低反映了病情的轻重。

关键词：脑出血；胰岛素样生长因子-1；闭证；脱证；中风

胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1，IGF-1)是一种重要的调节神经生长的生物活性物质，在脑损伤后等病理状态下对机体发挥重要保护作用。IGF-1有抑制细胞凋亡的作用[1-2]。脑损伤后IGF-1系统被激活，外周血中IGF-1通过血脑屏障转运至脑内，对受累神经细胞起保护作用。同时还激活其他保护因子[3]，发挥神经保护作用。胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)是血液中数量最多、作用最强的结合蛋白，对IGF-1的生物活性起着决定性的作用。只有与IGFBP3结合的IGF-1才能透过血脑屏障。本研究检测脑出血(intracerebral hemorrhage，ICH)后病人血浆IGF-1及其结合蛋白3的表达，观察ICH病人血浆IGF-1及其结合蛋白3的表达情况与中风闭脱证的关系。

1资料与方法

1.1临床资料收集180例2013年7月—2015年7月在福建中医药大学附属第二人民医院神经内科住院的脑出血病人。所有病人均在入组前由病人及/或家属签署了知情同意书，同意参加本研究。其中男性92例，女性88例，年龄55岁(45岁～70岁)，病程4.5 h(2 h～10)h。将180例病人采用随机数字表法依辨证分为阳闭证(60例)、阴闭证(62例)和脱证(58例)3组。阳闭证组男性31例，女性29例；平均年龄52岁(45岁～67岁)：平均病程4 h(3 h～9 h)。阴闭证组男性31例，女性31例；平均年龄61岁(50岁～66岁)，平均病程5 h(3．25 h～10 h)。脱证男性29例，女性29例；平均年龄60岁(48岁～70岁)，平均病程5 h(3 h～10 h)。3组在病情程度、性别及年龄分布上差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2病例纳入标准所选病例均需符合脑出血的诊断要点，参照1994年全国第四届脑血管病学术会议《各类脑血管疾病诊断要点》。所有病例均须经CT(或MRI)确诊。入组均需符合中风中医诊断标准，根据症状体征，结合舌象、脉象，按《中风闭证和脱证标准》进行辨证，归类闭证(阳闭、阴闭)、脱证，分为阳闭组、阴闭组、脱证组，诊断标准详见文献[4-5]。

1.3病例排除标准其他脑血管疾病；合并有心、肝、肾、造血系统等严重原发性疾病、精神病者；严重感染、恶性肿瘤、结缔组织性疾病以及1年内患组织损伤性疾病如心肌梗死、长期接受免疫抑制剂治疗者；合并糖尿病等代谢性疾病。

1.4对照组来源选取健康对照者180名，无心、肝、肾、造血系统和内分泌系统等相关病变，无糖尿病等代谢性疾病。入组前由本人签署知情同意书，均经医院伦理委员会审查并批准。

1.5观察指标及方法

1.5.1美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分按参考文献进行评分[6]。

1.5.2GCS评分按参考文献进行评分[7]。

1.5.3IGF-1及IGFBP3检测方法入组病例于入院后第2天空腹抽取静脉血4 mL进行血浆IGF-1及IGFBP3的检测，健康对照组空腹抽取静脉血4 mL进行血浆IGF-1及IGFBP3的检测。IGF-1及IGFBP3的检测均采用酶联免疫吸附(ELISA)方法，试剂购自美国Diagnostic System Laboratories(DSL)公司，严格按试剂说明书进行操作。

2结果

2.1ICH病人血浆IGF-1、IGFBP3表达水平与对照组比较：ICH病人血浆IGF-1、IGFBP3表达均明显低于正常对照组(P<0.01)。ICH病人的IGF-1表达按表达大小顺序排列为：阳闭组>阴闭组>脱证组。阳闭组IGF-1表达最高，脱证组表达最低。3组经单因素方差分析后，两两对比差异具有统计学意义(P<0.01)。详见表1。

nmol/L

2.2ICH病人各组间GCS、NIHSS评分比较ICH病人GCS评分大小顺序排列为：阳闭组>阴闭组>脱证组，经单因素方差分析后，两两对比差异具有统计学意义(P<0.01)。3组NIHSS评分大小顺序排列为：脱证组>阴闭组>阳闭组，经单因素方差分析后，两两对比差异具有统计学意义(P<0.01)。详见表2。

表2　ICH病人3组间GCS、NIHSS评分比较(±s)　分

2.3ICH病人IGF-1、IGFBP3表达与NIHSS评分及GCS评分之间的相关性分析经Spearman相关性统计，IGF-1及IGFBP3表达量与GCS评分呈正相关(P<0.01)。IGF-1及 IGFBP3表达量与NIHSS评分呈负相关(P<0.01)。详见表3。

表3　ICH病人IGF-1与出血量、NIHSS评分及GCS

3讨论

脑出血属祖国医学“中风”范畴，中风依据神志情况分为中经络和中脏腑。有神志障碍者为中脏腑，属中风重症。中脏腑根据正邪的盛衰情况又有闭证和脱证之别。《金匮要略》根据病情轻重缓急的差别，将中风分为中经络、中脏腑两大类，中经络无神志改变，病位较浅，病情较轻；中脏腑常有神志不清，病位较深，病情较重[5]。

细胞凋亡是脑出血后血肿周边细胞死亡的主要形式[8]。细胞凋亡是参与脑出血后继发性损伤的主要因素[9]。脑出血后血肿周围存在一个半暗带，若在一定时间窗内给予抑制细胞凋亡的干预，可明显改善神经功能恢复[10]，提高病人生活质量。IGF-1有抑制细胞凋亡的作用[1-2]。另外，IGF-1还能阻止N-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-aspartic acid，NMDA)受体介导的迟发性细胞死亡[11]。IGF-1能诱导胶质细胞的增殖。增殖的胶质细胞本身具有支持和保护作用，并可表达IGF-1及IGF结合蛋白(IGFBP)，进而发挥其营养和保护作用[12]。IGF-1为大分子物质，不易通过血脑屏障，主要通过与IGFBP3结合发挥作用，IGFBP3能直接调节IGF-1与其受体的作用，从而控制IGF-1的生物效应，使其更有效地发挥作用。

本结果显示，脑出血病人血浆IGF-1、IGFBP3表达下调，与正常对照组比较有统计学意义，相关性分析显示IGF-1、IGFBP3表达与NIHSS评分呈负相关(r =-0.72、-0.73，P<0.01)，与GCS评分呈正相关(r =0.71、0.72，P<0.01)，反映了IGF-1及IGFBP3参与了脑出血后的神经保护，且其表达与病情的轻重有关。同时，发现中风脱证组血浆中IGF-1及IGFBP3的表达明显低于闭证组，表达情况由低到高顺序为脱证>阴闭>阳闭，符合脱证组病变范围大和病势严重的病理形态学表现。可见，血浆中IGF-1及IGFBP3的表达程度可反映脑出血后损伤的程度，故可较为便捷地观察病人病情的轻重及预后。

综上所述，对脑出血后IGF-1及IGFBP3的表达研究有望为脑出血治疗找到新的途径，对其与GCS、NIHSS量表评分及中风闭脱证的关系研究，有望为祖国医学出血中风的辨证提供量化依据，且为脑出血病人病情的轻重与预后的判断提供较为简便的检测方法。

参考文献：

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[5]王永炎.中医内科学[M].第6版.上海：上海科学技术出版社，1997：124.

[6]王忠诚.王忠诚神经外科学[M].武汉：湖北科学技术出版社，2005：380-381.

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(本文编辑王雅洁)

基金项目：国家自然基金(No.81503431)；福建省卫计委青年课题(No.2015-1-85)；福建中医药大学校管课题(No.XB2014037)；福建省自然科学基金项目(No.2016J01558)

中图分类号：R743.34R255.2

文献标识码：A

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.13.011

文章编号：1672-1349(2016)13-1475-03

(收稿日期：2015-12-07)

Analysis of the Expression of Serum IGF-1 and IGFBP3 in Acute Intracerebral Hemorrhage Patients with Shutting Syndrome and Collapse Syndrome

Gao Lili，Wu Chenghan，Lü Jian

Second People’s Hospital of Fujian Province，Fuzhou 350003， Fujian，China Corresponding Author：Gao Lili

Abstract：ObjectiveTo observe the expression of serum insulin-like growth factor-1(IGF-1) and IGFBP3 in acute intracerebral hemorrhage(ICH) patients，to investigate the relationship between IGF-1，IGFBP3 and excess syndrome，depletion syndrome.Methods One hundred and eighty patients were divided into 3 groups：yin excess syndrome(n=60)， yang excess syndrome (n=60)and depletion syndrome group(n=60).Serum IGF-1 and IGFBP3 levels were determined in 180 patients with ICH as well as in 180 controls．The correlation between the expression of IGF-1，IGFBP3 and excess syndrome，depletion syndrome was observed.Results The expression of serum IGF-1 and IGFBP3 in ICH patients significantly reduced in comparison with the normal control groups (P<0.01).The expression of IGF-1 and IGFBP3 was significantly different among yang excess syndrome，yin excess syndrome and the depletion syndrome (P<0.01).The expression of IGF-1 and IGFBP3 of depletion syndrome was the lowest，yin excess syndrome second，yang excess syndrome last.Conclusion The expression of IGF-1 and IGFBP3 can reflect the degree of brain impairment.

Key words：cerebral hemorrhage；insulin-like growth factor-1；excess syndrome； depletion syndrome；stroke