三种不同免疫检验方法检测HIV结果可靠性的对比研究

朱 澜

（抚顺市中心医院检验科，辽宁 抚顺 113006）



三种不同免疫检验方法检测HIV结果可靠性的对比研究

朱 澜

（抚顺市中心医院检验科，辽宁 抚顺 113006）

【摘要】目的 对免疫层析试验、酶联免疫吸附试验和明胶颗粒凝集试验检测HIV结果的可靠性进行对比分析。方法 运用ELISA、PA、ICA三种检测方法检测人体血清中含有的HIV1+2抗体。结果 ELISA法1∶16382阳性，PA法1∶2046阳性，ICA法1∶4092阳性。结论 ELISA有很高的灵敏度和特异性，操作简单，仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用，特别适合于试验室大规模筛检使用。

【关键词】HIV抗体检测；酶联免疫吸附试验；明胶颗粒凝集试验；免疫层析法

HIV病毒，会对人体免疫力造成威胁。构成人体免疫系统最重要的因素，就是T淋巴细胞，而HIV尤其会破坏该细胞，使人体免疫功能下降，从而感染各种疾病，甚者会导致恶性肿瘤，病死率较高，会导致危害性极大的传染病艾滋病。这严重影响了人们的生活，威胁人类身体健康。随着艾滋病患者的不断增加，人们越来越重视对HIV的检查。目前，医院、疾病预防控制中心等HIV抗体初筛实验室普遍采用ELISA、PA、ICA对可疑高危人群进行筛查。不同的检测方法都有不同的优点和缺陷，这对结果的准确性，会造成一定的影响。本次研究分别对患有HIV病毒的患者进行 ELISA、PA、ICA试剂试验分析。

1 材料与方法

1.1标本来源：本次接受试验的146例HIV患者，均经过国家疾病预防控制中心用免疫印迹法（WB）检测确认。其中，HIV抗体阳性患者96例，HIV抗体阴性患者50例。国家卫生部临床检验中心，提供了本次试验的质控品，抗-HIV1+2抗体高值（500 NCU/mL）和低值（1 NCU/mL）。

1.2检测试剂：ELISA试剂由上海川翔生物科技有限公司提供；PA试剂由浙江爱康生物专业供应；ICA试剂则使用美国雅培公司产品。

1.3仪器：RT-6100酶标仪。

1.4检测方法。ELISA法：主要原理是根据抗体和抗原间的特殊反应，进行检测。该反应的主要呈现形式，就是通过催化水解试验和氧化还原反应，看二者结合后，是否会有颜色变化，如果结合后，呈现出颜色，那么样本患有HIV1+2；PA法：对HIV-1抗体和HIV-2抗原进行重组，然后将他们包被在人工载体明胶颗粒上，观察明胶颗粒和HIV-1或HIV-2抗体的反应，如果其发生凝集现象，可以检出血清和血浆中的HIV-1/2抗体；ICA法：主要操作原理，就是在免疫层析基础上，检验样本中是否含有HIV1+2抗体，如果存有此抗体，那么它会和硒胶体结合，检测仪器上会出现明显标识，一条红线。

2 结 果

2.1三种方法检测HIV抗体高值、低值质控血清结果：分别用ELISA、PA和ICA检验HIV高、低值质控血清。检测结果见表1。

表1　三种方法检测HIV抗体高、低值质控血清结果

2.2三种方法检测的符合率：96例患有HIV抗体的阳性标本，ELISA法、PA法和ICA法的检出符合率分别是100%、99.1%、97.9%，通过三种方法进行对比，符合率差距不大。

2.3三种方法结果比较：用ELISA法、PA法和ICA法对96例HIV抗体阳性患者样本，50例HIV抗体阴性患者样本进行HIV抗体检测，并对检测结果的敏感性、特异性和准确性，进行分析对比，结果见表2。

表2　三种方法HIV抗体检测结果比较

ELISA法检测的敏感度为96.0%（96/100）、特异度为92.0% （46/50）、准确度为97（142/146）；PA法检测的敏感度为97.9% （95/97）、特异度为94.0%（47/50）、准确度为97.3%（142/146）；ICA法检测的敏感度为92.1%（94/102）、特异度为84.0%（42/50）、准确度为90.4%（132/146）。

2.4HIV抗体检测阳性血清结果：研究表明 ELISA法1∶16382阳性，PA法1∶2046阳性，ICA法1∶4092阳性。

3 讨 论

本次研究对HIV样本分别进行ELISA法、PA法和ICA法检测，ELISA有很高的灵敏度和特异性［1-2］，操作简单，仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用。颗粒凝集实验是另一种操作简单方便，成本低廉的检测方法，该方法结果可通过肉眼判定，灵敏度很高，特别适合发展中国家或大量筛选供血员时使用，缺点是必须使用新鲜样品，特异性较差。人类免疫缺陷病毒抗体口腔黏膜渗出液检测试剂盒（胶体金法）就属于侧向免疫层析法（金免疫）类别［3-4］，基于免疫层析技术通过手工操作、肉眼读取结果、20 min即可定性得出检测结果的快速诊断试剂，用于检测口腔黏膜渗出液样本中的HIV-1型和HIV-2型抗体。可用于自愿咨询检测、不愿采血、晕针患者的初筛。该方法适用于初筛检测，凡由该试剂测定为阳性者，需进行进一步筛查确认。综上所述，ELISA适合于试验室大规模筛检使用。

参考文献

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［2］ 王琳琳，杨娜，袁悦，等.人叶酸受体自身抗体IgG酶联免疫吸附试验检测方法的建立及评价［J］.北京大学学报（医学版），2014，46（3）: 483-487.

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［4］ 朱健铭，陈真诚.特征光谱成像法测量人血清前列腺特异性抗原浓度的研究［J］.光谱学与光谱分析，2013，33（3）:762-765.

中图分类号：R512.91；446

文献标识码：B

文章编号：1671-8194（2016）04-0144-01