消炎止痛膏质量控制方法研究

许　辉　刘　军　代鹏程　李红兵（中国人民解放军第291医院　包头　014040）

消炎止痛膏质量控制方法研究

许辉刘军代鹏程李红兵（中国人民解放军第291医院包头014040）

目的：建立消炎止痛膏有效的质量控制方法。方法：采用薄层色谱法鉴别血竭、冰片；运用高效液相色谱法测定血竭中的血竭素含量。结果：薄层色谱方法简便、专属性强、重复性好；含量测定结果准确，血竭素的平均回收率为98.07%（RSD=1.53%，n=6）；血竭素在0.1～0.6μg/mL范围内呈良好的线性。结论：本方法可有效控制消炎止痛膏的质量。

消炎止痛膏 薄层色谱法 高效液相色谱法

消炎止痛膏是我院临床应用40多年的自制制剂，由血竭、冰片等六味药材组成，消炎收敛、止血止痛、生肌，用于肛裂、内痔、外痔、混合痔等肛门疾病和术后出血疼痛。本试验采用薄层色谱法对处方中血竭、冰片进行薄层色谱鉴别。血竭是方中主药，因此选定血竭素为该制剂的含量测定项目，以制定该制剂的质量标准。

1仪器与试药

1.1仪器：UltiMate3000高效液相色谱仪（Thermo Fisher），包括UltiMate3000 RS双三元泵，UltiMate3000 RS二极管阵列检测器，UltiMate3000 RS自动进样器，UltiMate3000 RS柱温箱，变色龙7色谱工作站。

滤膜0.45um，Φ13mm（上海兴亚净化材料厂）

硅胶G薄层板，青岛海洋化工厂（供薄层层析用）

血竭、冰片等阴性样品自制。

中药饮片经鉴定均符合《中国药典》2015年版（一部）规定。

血竭高氯酸盐对照品（批号0811—9302供含量测定用）血竭对照药材（批号906—9607供鉴别用）冰片对照品（批号743—8902供鉴别用）均由中国药品生物制品检定所提供；消炎止痛膏委托加工自制制剂；乙腈为色谱纯；其他试剂均为分析纯。

2定性鉴别

2.1冰片的薄层鉴别：取本品2g，加甲醇20mL，60℃加热旋摇5min，低温过滤。滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2mL使溶解，作为供试品溶液。另取冰片对照品，加醋酸乙酯制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。阴性供试品制备：按处方不加冰片制成对应膏剂，按照供试品的制备方法，制备阴性对照液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷—醋酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%香草醛硫酸溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性供试品在相应的位置上无斑点。

2.2血竭的薄层鉴别：取本品2g，加甲醇20mL，60℃加热旋摇5min，低温过滤。滤液作为供试品溶液，另取血竭对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取血竭素高氯酸盐对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。阴性供试品制备：按处方不加血竭制成对应膏剂，按照供试品的制备方法，制备阴性对照液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0502）试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各5μL、对照品溶液2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—甲醇（19∶1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性供试品在相应的位置上无斑点。

3血竭素含量测定

3.1色谱条件及系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-5%醋酸水（50∶50）为流动相，柱温40℃，检测波长471nm。理论板数按血竭素峰计算应不低于13000。

3.2对照品溶液的制备：精密称取适量血竭素高氯酸盐标准品，加入3%磷酸甲醇溶液，配制成每毫升含45μg血竭素的溶液。

3.3供试品溶液的制备：精密称取消炎镇痛膏2.0g于研钵中，加入3.0g硅藻土，精密称定，研磨均匀。精密称取2.0g混合粉于磨口锥形瓶中，精密加入20.00mL 3%磷酸甲醇，称定重量。摇匀，放置过夜，超声20min，称重，补足失重，摇匀，过滤，取续滤液。

3.4测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

3.5阴性试验：按样品工艺制备缺血竭素的阴性对照品，按供试品溶液的制备项下操作，结果HPLC图谱在与血竭相应的位置上没有吸收峰，表明其他成分对测定无干扰。

3.6精密度试验：按“3.3”项下制备供试品溶液，重复进样6次，按血竭素峰面积计算，RSD＜2%。

3.7重现性与稳定性试验：按正文平行制备六份供试品溶液，每份进样2次，取平均值计算血竭素含量，RSD＜2%。取其中一份供试品溶液于0、11、13、16、27h测定，结果27h峰面积基本不变，血竭素的RSD为1.51%。

3.8线性关系的考察：配制50μg/mL的血竭素高氯酸盐标准品溶液（换算成血竭素重量=血竭素高氯酸盐重量/1.377），分别进样2，4，6，8，10，12μL，以峰面积为纵坐标（Y），被测组分浓度（μg/mL）为横坐标（X），进行线性回归，得到血竭素的回归方程：Y=0.2119X-0.0198（R2=1）。

3.9回收率试验：精密称取消炎止痛膏1.0g，加入对血竭素含量80%、100%、120%的对照品，按“3.3”项下制备供试品溶液，注入色谱仪，计算回收率，RSD＜2%。

3.10样品测定

三批样品含量测定

按2015版中国药典血竭含量测定项下规定血竭素含量不低于1%，折算本制剂每克含量血竭素应不低于0.11mg/g。三批样品均高于上述值，故采用药典规定折算值0.11mg/g。

4讨论

4.1色谱条件的选择：参考有关文献，本实验以乙腈-5%醋酸水（50∶50）为流动相，替代磷酸缓冲盐体系，指标成分保留时间比较恰当。在此条件下血竭素高氯酸盐的理论塔板数大于13000，分离度、拖尾因子均符合药典要求。

4.2检测波长的选择：取血竭素高氯酸盐对照品溶液用DAD检测器进行检测，结果最大吸收波长为471nm。选择在471nm处测定含量最为理想，峰形较好，干扰较少。

4.3由于本品为膏剂，在甲醇中超声无法分散，导致血竭素提取不完全，故参考相关文献加入硅藻土研磨分散。用量以研磨均匀后易成松散粉为宜，经试验膏剂与硅藻土用量为2∶3。

4.4文献表明酸化有利于血竭素的转化，经实验确定本制剂在3%磷酸甲醇中酸化12h以上，血竭素含量达到最高水平。

［1］国家药典委员会.中国药典［S］.第一部，中国医药科技出版社，2015：142.

［2］国家药典委员会.中国药典［S］.第一部，中国医药科技出版社，2015：57.

［3］谢艳，马克昌，谢文.酸化对血竭中血竭素含量测定的影响［J］.中草药，2000，31（4）：265.

Study on the Quality Control Method of Xiaoyan Zhitong Ointment

Xu Hui Liu Jun Dai Pengcheng Li Hongbing（The 291st Hospital of PLA，Baotou，Inner Mongolia 014040，China）

Objective：To establish an effective quality control method of Xiaoyan Zhitong Ointment.Methods：Thin-Layer Chromatography （TLC）was used to identify Daemonorops draco and Borneol；then the content of Dracorhodin in Daemonorops draco was determined by High Performance Liquid Chromatography.Results：The TLC method is simple with strong specificity and good repeatability；and content can be determined accurately.The average recoveries of Dracorhodin was 98.07%（RSD=1.53%，n=6）.Dracorhodin shows good linear relationship within the scope of 0.1～0.6μg.Conclusions：The method can effectively control the quality of Xiaoyan ZhitongOintment.

Xiaoyan Zhitong OintmentTCL HPLC

R286

A

1672-8351（2016）08-0009-02