梅州地区2010-2014年儿童肺炎支原体感染及耐药情况分析

李舟文，肖光文，张国雄，徐美兰，乔亚峰，曾令斌



梅州地区2010-2014年儿童肺炎支原体感染及耐药情况分析

李舟文1，肖光文1，张国雄2，徐美兰1，乔亚峰1，曾令斌1

1.嘉应学院医学院，梅州514031；2.梅州市人民医院检验科，梅州514031

摘要：目的了解儿童社区获得性肺炎患者肺炎支原体感染及药敏情况，为临床诊断和治疗提供有力依据。方法对2010年1月到2014年12月期间梅州地区3家医院儿科门诊及住院部治疗的5 076例社区获得性肺炎患儿进行咽拭子肺炎支原体培养，并检测对红霉素、罗红霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素和克拉霉素6种药物的敏感性。结果对肺炎支原体培养的结果表明，肺炎支原体阳性者1 782例，总阳性率为35.11%，其中2012年感染率最高达43.68%，为流行高峰期。季节分布方面，一年四季均可发病，春夏季节感染率高于秋冬季节，季节间阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。性别方面，女性阳性率(35.91%)高于男性(34.36%)，但差异无统计学意义。患儿年龄方面，1～3岁组感染率最高为42.42%，6～12岁组感染率最低为16.49%，且各年龄组间阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。药敏实验结果显示，红霉素、罗红霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素和克拉霉素的敏感率分别为41.98%(748/1 782)、55.22%(984/1 782)、66.84%(1 191/1 782)、69.25%(1 234/1 782)、67.79%(1 208/1 782)和59.32%(1 057/1 782)。其中红霉素、罗红霉素、阿奇霉索和乙酰螺旋霉素2010—2014年的敏感率呈现明显的逐年下降趋势，这4种药物不同年份敏感率之间的差异有统计学意义(均P<0.05)。克林霉素2010—2014年敏感率波动不明显，克拉霉素虽然也呈现逐年下降的趋势但幅度不大，这两种药物不同年份敏感率之间的差异没有统计学意义(均P>0.05)。结论社区获得性肺炎患儿中肺炎支原体感染率较高，婴幼儿期发病率较高，易发于春夏季节。对社区获得性肺炎患儿应尽早进行肺炎支原体培养及药敏检测，使患儿得到及时正确的治疗，减少耐药株的出现。

关键词：社区获得性肺炎；肺炎支原体；儿童；药敏试验

Supported by the Guangdong Medical Scientific Research Funds (No. B2015036) and the Meizhou City Science and Technology Plan Projects (No. 2015B041)

肺炎支原体 (Mycoplsmapneumoniae，Mp) 是一类引起人类非典型性肺炎和其他呼吸道疾病的病原体之一。它无细胞壁，通过飞沫传播，其引起的疾病小儿肺炎支原体肺炎( Mycoplasma Pneumonia Pneumonia，MPP ) 具有起病突然，进展快，病程比较长等临床特征，以及出现肺部哮鸣音突出，喘憋、呼吸困难等临床表现。一些患儿病情比较严重时，还有导致肺外并发症的可能，对患儿的成长发育产生严重影响，甚至引起患儿的死亡[1]。文献表明儿童MPP的发病率和其病原体耐药性存在地域差异性，目前已成为社区获得性肺炎(Community Acquired Pneumonia，CAP)最常见的病原体[2]。为了了解近五年来CAP患儿Mp感染及耐药的形势，为小儿MPP的预防和治疗提供指导，本研究对梅州地区3家医院2010年1月至2014年12月门诊和住院的CAP患儿Mp感染及其耐药情况进行了分析，报告如下。

1资料与方法

1.1研究对象2010年1月到2014年12月，本市3家医院儿科门诊及住院部治疗的CAP患儿5 076例，其中，男2 628例，女2 448 例；～1岁组2 028例，～3岁组1 530例，～6岁组954例，～12岁组564例；病程3～15 d；全部病例均行胸部X线检查，诊断标准按照《社区获得性肺炎诊断和治疗指南》。其中支气管肺炎3 042例，大叶性或节段性肺炎562例，支气管炎1 230例，毛细支气管炎242例。

1.2试剂支原体快速鉴定培养药敏试剂盒(陕西百盛园生物科技信息有限公司)。检测原理：支原体利用培养基快速生长因子进行增殖，分解糖类，产生氢离子使培养基的pH值降低，使培养基中的指示剂由原来的红色转变成淡黄色。培养基由红变黄，并且液体澄清，即证明有Mp生长。药敏板中有9种抗菌药物，利用9种抗菌药物的高低浓度在体外对微生物的抑制作用，对微生物作耐药性分析。药敏结果判读:两孔均呈黄色为敏感；低浓度孔呈红色、高浓度孔呈黄色为中介；两孔均呈红色为耐药。

1.3Mp的分离培养与药敏试验统一入院次日早晨采集所有患儿的咽拭子标本立即送检。操作步骤如下：1)取1支分装干粉培养基，在无菌条件下打开盖子，加入1.5 mL超纯水，完全溶解至澄清后，在药敏板阴性孔中加入50 μL培养液。2)将棉拭子置于培养瓶内，搅动数次，提取棉拭子并对着瓶壁尽量挤压出其中液体，取出棉拭子弃之，用加样器吹打数次后分别吸取50 μL加入各药敏板孔中。3)在每个板孔中滴加1滴石蜡油封口后，将瓶中剩余培养基弃去，药敏板置于37 ℃电热培养箱培养24 h。4)取出观察结果并统计阳性标本及阳性标本红霉素、罗红霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素、和克拉霉素6种药物的药敏结果。

1.4统计方法数据采用SPSS20.0统计学软件进行分析，对于不同年份、性别、季度以及年龄阶段的儿童CAP之Mp感染率与耐药性的比较分析采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.12010—2014年Mp的流行情况5 076例CAP患儿咽拭子标本中，Mp培养阳性数为1 782例，总阳性率为35.11%。其中2012年感染率最高达43.68%，明显高于各组，与其他各组中感染率最高的2014年比较，差异有统计学意义(χ2=35.82，P<0.05)；2010年感染率最低为30.02%；剔出2012年的数据，2010—2014年Mp的感染率呈现逐年升高的趋势。

2.2CAP患儿Mp感染阳性率与性别的关系男感染903例，感染率为34.36%；女感染879例，感染率为35.91%。女性感染率略高于男性，对2组进行比较，差异无统计学意义(χ2=1.33，P>0.05)。

表1梅州地区CAP患儿不同年份Mp的感染率[例(%)]

Tab.1Infection-rates of Mp in different year groups in children with CAP in Meizhou area[case (%)]

年份YearMp+-合计Total感染率Infectionrate201025459284630.022011328724105231.182012498642114043.68a201332965798633.372014373679105235.45合计Total17823294507635.11

注：a与2014年组比较，χ2=35.82，P<0.05。

Note: aCompared with Group 2014 year, χ2=35.82，P<0.05.

2.3CAP患儿Mp感染阳性率与年龄的关系四个不同年龄组Mp感染阳性率比较，差异有统计学意义(χ2=21.24，P<0.05)。其中～3岁组感染率最高为42.42%，～12岁组感染率最低为16.49%。各年龄组感染率的顺序为～3岁组>～1岁组>～6岁组>～12岁组。见表2。

表2梅州地区CAP患儿不同年龄组Mp的感染率[例(%)]

Tab.2Infection-rates of Mp in different age groups in children with CAP in Meizhou area[case (%)]

年龄组(岁)Agegroup(years)Mp+-合计Total感染率Infectionrate0—18081120202839.841—3649881153042.423—623272295424.326—129347156416.49合计Total17823294507635.11

注：四个不同年龄组间感染阳性率比较，χ2=21.24，P<0.05。

Note: The comparison of infection positive rate between four different age groups, χ2=21.24,P<0.05.

2.4CAP患儿Mp感染阳性率与季节的关系四个不同季节组Mp感染阳性率比较，差异有统计学意义(χ2=35.58，P<0. 05)。其中5～7月组感染率最高为38.18%，8～10月组感染率最低为27.43%。各年龄组感染率的顺序为5～7月组>2～4月组>11～1月组>8～10月组。见表3。

表3梅州地区CAP患儿不同季节Mp的感染率[ 例(%)]

Tab.3Infection-rates of Mp in different season groups in children with CAP in Meizhou area[case (%)]

季节组(月份)Seasongroup(month)Mp+-合计Total感染率Infectionrate2—46231066168936.895—77121153186538.188—1023762786427.4311—121044865831.91合计Total17823294507635.11

注：四个不同季节组间感染阳性率比较，χ2=35.58，P<0.05。

Note: The comparison of infection positive rate between four different seasons groups, χ2=21.24,P<0.05.

2.52010—2014年Mp培养阳性菌株的药敏情况本文对儿童常用的6种抗菌药物的敏感情况进行了分析，2010—2014年红霉素、罗红霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素、和克拉霉素的敏感率分别为41.98%(748/1 782)、55.22%(984/1 782)、66.84%(1 191/1 782)、69.25%(1 234/1 782)、67.79%(1 208/1 782)和59.32%(1 057/1 782)。其中红霉素、罗红霉素、阿奇霉索和乙酰螺旋霉素2010—2014年的敏感率呈现明显的逐年下降趋势，这4种药物不同年份敏感率之间的差异有统计学意义(χ2b=32.35，χ2c=56.15，χ2d=37.55，χ2e=22.57，均P<0.05)。克林霉素2010—2014年敏感率波动不明显，克拉霉素虽然也呈现逐年下降的趋势但幅度不大，这两种药物不同年份敏感率之间的差异没有统计学意义(χ2f=1.603，χ2g=1.384，均P>0.05)。见表4。

3讨论

根据国内外相关文献报道[3-4]，目前某些地区Mp的感染率已经超过肺炎链球菌而成为CAP最主要的病原体。不同地区和时期小儿MPP发病率相差较大，这可能跟各地区气候、地理、经济、卫生环境、检测手段和检测年份等不同密切相关[2]。国外有文献报道感染率达50%[5]，近几年国内的感染率在30%附近[4,6]。本研究检测的5 076例CAP患儿咽拭子标本中，Mp培养阳性数为1 782例，总阳性率为35.11%，高于国内近几年的相关报道，这可能与标本采集及检测方法，不同地区的气候条件、地理

表4　2010—2014年Mp培养阳性菌株对6种抗菌药物的敏感率[株(%)]

注：抗菌药物不同年份间敏感率的比较，χ2b=32.35，χ2c=56.15，χ2d=37.55，χ2e=22.57，均P<0.05；χ2f=1.603，χ2g=1.384，均P>0.05。

Note: The sensitive rate comparison of antimicrobial agents between the different years, χ2b=32.35,χ2c=56.15,χ2d=37.55,χ2e=22.57, are allP<0.05;χ2f=1.603,χ2g=1.384, are allP>0.05.

位置以及不同地区不同医院抗菌药物使用情况等不同有关。咽拭子标本在用药前和用药后收集对实验结果的影响颇大，本研究为消除用药对实验结果的影响，所有标本均收集于用药前。分离培养法是Mp诊断的“金标准”，传统的培养法费时长、培养条件要求高和容易造成污染等使得临床运用少。而改良后的Mp快速鉴定培养法[4]具有特异性好、敏感性高、检测快速、方便等特点，目前被广泛运用到Mp的诊断和药敏上。本研究所采用的咽拭子快速鉴定培养法大大的提高了Mp的检出率。

过去30年欧洲、美国和日本的大量流行病学研究[7-9]均证实了Mp的流行呈现一定的周期性。由于Mp具有2～3周较长的潜伏期以及其较低的传播率，导致流行期一般持续1年左右，继而维持数年较低感染率，3～7年后再出现流行高峰。本研究中2012年感染率最高达43.68%，明显高于各组，与其他各组中感染率最高的2014年比较，差异有统计学意义(χ2=35.82，P<0.05)。说明梅州地区Mp的流行在2012年形成了一个流行的高峰期，但每次高峰期间隔的年限，因为研究年限不够而不明。关于形成流行高峰期的原因可能和Mp两种不同基因型之间不断的转变有关[10]，而造成基因型的转变的机理可能和人群免疫状况的改变有关。本研究剔出2012年的数据，2010～2014年梅州地区Mp的感染率呈现逐年升高的趋势，表明该地区Mp感染的形势越来越严峻，应该引起卫生防疫部门和临床医师的重视。

大多数临床报道表明，男性和女性患儿MPP的发病率差异无统计学意义，但也有女性患儿发病率高于男性的报道[11]，本研究中男性和女性Mp的感染率差异无统计学意义。由于儿童免疫力较低，又往往无症状或急性呼吸道感染症状轻微而不去就诊，MPP的发病率高于其他年龄组人群，成为可能的Mp储存宿主，在传播中起重要的作用。在芬兰针对CAP患者进行的研究，有21%Mp感染者是5岁以下儿童，西班牙加泰罗尼亚Mp暴发时5岁以下儿童占18%，而5～14岁仅占8.2%[12]；国内阳爱梅等[4]的研究也表明，0～3岁组的感染率远远高于其他年龄组；本研究中6～3岁组感染率最高为42.42%，其次是0～1岁组感染率为39.84%，最低的是6～12岁组感染率仅16.49%，4个不同年龄组Mp感染阳性率比较，差异有统计学意义(χ2=21.24，P<0.05)；说明近年来Mp的感染逐渐呈现低龄化，1～3岁可能为最容易感染的年龄段，其原因可能是这个年龄段的儿童免疫功能还不够成熟但是相对于婴幼儿人群接触有所增加。早前的研究认为Mp感染的发生与季节性变化关系不大，但近年的研究结果很多支持与季节性相关，但各地报道的发表季节高峰不尽相同。韩国报道[13]的高峰在秋季和冬季，而日本的报道[9]反而是夏秋季节感染率高于冬春季节，尤其是8月份感染率最高。在我国因为幅员辽阔，各地地理气候差异巨大，所以报道高峰也不尽相同。本研究结果表明，梅州地区一年四季均可发病，夏春(2～7月)感染率较高，这可能与该地区该时段平均温度和平均湿度较适合Mp的繁殖有关。

Mp由于没有细胞壁而对β内酰胺类抗生素具有天然的耐药性，而对大环内酯类、四环素类等抑制微生物蛋白质合成的抗菌药物，以及喹诺酮类等抑制DNA复制的抗菌药物敏感。但四环素类抗生素对儿童骨骼和牙齿的发育有抑制作用，仅仅适合于较大的儿童；而喹诺酮类抗菌药物对肌肉骨骼系统有一定的损害，所以只是在其他抗菌药物无效时考虑使用。大环内酯类抗生素就成为了国内外小儿MPP治疗的首选药物，在治疗中被大量的使用，这也造成了Mp对这一类药物的耐药现象越来越严重。自2001年日本首次出现Mp耐药菌株(Macrolide-resistance Mycoplasma pneumoniae，MRMP)的报道以来，国内外相继出现了很多的MRMP，尤其以中国和日本最为突出。从2002年到2010年，日本MRMP的感染率已从0%上升到60%[14]，呈现逐年上升的趋势；从国内来看，郑定容等[15]报道的深圳地区2011—2012年对罗红霉素的敏感率为30.5%(39/128)；孔庆东等[6]报道沈阳地区2012—2014年Mp对红霉素的敏感率为仅为7%(23/326)。本研究选择了用试剂盒检测9种药物中儿童常用的6种进行药敏分析，2010—2014年该地区红霉素、罗红霉素、阿奇霉索、乙酰螺旋霉素、克林霉素、和克拉霉素的敏感率分别为41.98%(748/1 782)、55.22%(984/1 782)、66.84%(1 191/1 782)、69.25%(1 234/1 782)、67.79%(1 208/1 782)和59.32%(1 057/1 782)。其敏感率普遍高于郑定容[15]、孔庆东等[6]的报道，与阳爱梅[4]的报道接近。但是其中红霉素、罗红霉素、阿奇霉索和乙酰螺旋霉素2010—2014年的敏感率呈现明显的逐年下降趋势，这可能与诊断不及时及滥用抗生素有关， 应引起临床医生及相关人员的高度重视。克林霉素2010—2014年敏感率波动不明显，克拉霉素虽然也呈现逐年下降的趋势幅度不大，这可能与本地区这两种药物用量较少有关。

综上所述，通过对梅州地区CAP患儿Mp感染流行及耐药状况的研究表明，Mp是本地区CAP的主要病原体，一年四季均可发病，春夏季节感染率更高，1～3 岁是其高发年龄。目前，本地区Mp对大环内酯类抗菌药物耐药情况较为严峻，敏感率呈现逐年下降趋势。所以在治疗小儿MPP时，经验型用药同时建议尽早采集咽拭子做Mp培养及药敏试验，根据药敏结果调整用药，高度警惕耐药肺炎支原体肺炎的存在，避免不合理使用抗生素。

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DOI:10.3969/j.issn.1002-2694.2016.03.019

通讯作者：肖光文，Email：270591805@qq.com

中图分类号：R375

文献标识码：B

文章编号：1002-2694(2016)03-0306-06

Corresponding author:Xiao guang-wen,Email：270591805@qq.com

收稿日期：2015-10-08；修回日期:2016-01-06

Mycoplasma pneumoniae infection and drug resistance in children in Meizhou area from 2010 to 2014

LI Zhou-wen1,XIAO Guang-wen1,ZHANG Guo-xiong2,XU Mei-lan1,QIAO Ya-feng1,ZENG Ling-bin1

(1.MedicalCollege,JiayingUniversity,Meizhou514031,China；2.ClinicalLaboratory,thePeople'sHospital,Meizhou514000,China)

Abstract:In order to survey the Mycoplasma pneumoniae (Mp) infection and drug resistance in children with Community Acquired Pneumonia(CAP) to provide a rational basis for the clinical diagnosis and treatment of Mp infection, a total of 5 076 throat swabs were collected from children with CAP, who visited the pediatric outpatient department or received treatment in the pediatric ward of three hospitals in Meizhou area from January 2010 to December 2014. The swabs were cultured to detect Mp. The drug sensitivity of Mp to erythromycin, roxithromycin, azithromycin, acetylspiramycin , clindamycin and clarithromycin was evaluated. According to the result of the cultivation of Mp, 1 782 (35.11%) were Mp-positive. The year of 2012 was the epidemic peak, the infection of Mp rate was up to 43.68%. There were cases of Mp infection in all four seasons of the year but infection rates in spring and summer were significantly higher than those in autumn and winter (P<0.05). The infection rate in females was higher than that in males (35.91% vs 34.36%; P>0.05). For the age of the sick children, the infection rate for the age group of younger than 3 years old was the highest as 42.42%. The age group of younger than 12 years old was the lowest as only 16.49%, and there were significant differences in the infection rate among all age groups (P<0.05). According to the results of drug sensitive test, the sensitive rate of erythromycin, roxithromycin, azithromycin, acetylspiramycin, clindamycin and clarithromycin was 41.98% (748/1 782), 55.22% (984/1 782), 66.84% (1 191/1 782), 69.25% (1 234/1 782), 67.79% (1 208/1 782) and 59.32% (1 057/1 782), respectively. The sensitive rate of erythromycin, roxithromycin, azithromycin and acetylspiramycin significantly declined year by year from 2010 to 2014, the differences of their sensitive rate between different years were statistically significance (all P<0.05). The sensitive rate of fluctuations of clindamycin was not obvious and the sensitive rate of clarithromycin had dropped year by year slightly from 2010 to 2014, the differences of their sensitive rate between different years were no statistically significance (all P>0.05). In conclusion, Mp infection rate was very high among children with respiratory tract infection．The incidence of Mp infection was relatively high among infants and young children and children are more susceptible to Mp infection in spring and summer than those in autumn and winter. Throat swabs should be cultured and drug sensitivity tests should be performed as early as possible in children with CAP, so that proper intervention can be undertaken in time to reduce drug-resistant strains of Mp.

Keywords:community acquired pneumonia; Mycoplsma pneumoniae; child; drug sensitivity test

广东省医学科学研究基金(No.B2015036)和梅州市科技计划

项目(No.2015B041)联合资助