贵阳市蛋鸡禽流感、新城疫抗体监测结果及分析

任荣清，黄 波，艾 国，李干洲，张锦华*

(1.贵州省畜牧兽医研究所，贵州贵阳550005；2.铜仁市印江自治县饲草饲料工作站，贵州印江555200)

贵阳市蛋鸡禽流感、新城疫抗体监测结果及分析

任荣清1，黄 波1，艾 国2，李干洲1，张锦华1*

(1.贵州省畜牧兽医研究所，贵州贵阳550005；2.铜仁市印江自治县饲草饲料工作站，贵州印江555200)

为了掌握贵阳市2014年蛋鸡禽流感(H5、H9)、新城疫免疫情况及免疫抗体水平，对贵阳市6个规模化养鸡场28个不同批次蛋鸡进行抽样，用血凝抑制试验检测H5(re-5株/re-6株)、H9及新城疫免疫抗体，共检测血清840份。结果：28个不同批次蛋鸡H9、鸡新城疫免疫抗体合格率分别为96.4%、100%，免疫效果良好；H5免疫抗体合格率为57%，抗体水平整体较低，且变异系数较大。

H5、H9；新城疫；免疫抗体

禽流感(AI)、鸡新城疫(ND)分别是由正黏病毒科的禽流感病毒和副黏病毒科的新城疫病毒引起的急性高度接触性传染病，传播迅速，呈流行性或大流行，是近几年来养禽业最大的威胁，对鸡群造成严重危害；高致病性禽流感(H5)感染鸡群暴发会引起大面积的死亡，而新城疫、低致病性禽流感(H9)的感染则造成蛋禽产蛋下降[1]。疫苗免疫接种是预防病毒性传染病的重要手段，为了掌握贵阳市蛋鸡禽流感(H5、H9)、鸡新城疫的免疫情况及免疫抗体水平，更好地预防和控制其发生和流行，2014年对贵阳市辖区内6个规模化养鸡场33～500日龄，共28个不同批次的42.3万只蛋鸡进行禽流感(H5、H9)、鸡新城免疫抗体抽样检测，现将检测结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 被检血清：采自贵阳市6个规模化蛋鸡养殖场，分别用A、B、C、D、E、F表示，每场按被检测批次鸡群数量的1‰～3‰采集样品，样本数不少于30个，每个样品采血量2 mL用于制备待检血清。抽样禽场均已按照农业部禽流感、新城疫免疫技术规范进行免疫。

1.1.2 检测试剂：禽流感(H5、H9)、鸡新城疫血凝抑制试验(HI)标准抗原，阴性血清(批号20131008)，阳性血清(批号20131225)，来自青岛立见诊断技术发展中心。

1.1.3 1%红细胞的制备：按照《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T18936—2003)制备。

1.2 检测方法 检测标准抗原的血凝价，制备4单位抗原并验证，采用血凝抑制试验分别检测血清样品禽流感(H5、H9)及鸡新城疫抗体的效价，操作方法按《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T18936—2003)和《新城疫诊断技术》(GBT/16550—2008)进行。

1.3 判定标准 以完全抑制4 个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为 HI滴度。禽流感(H5/H9)以阴性对照孔血清滴度小于2 log2 ，阳性对照孔血清误差不超过 1个滴度时，HI小于或等于 3 log2 判定 HI试验阴性；HI价等于4 log2为可疑，需重复试验；HI价大于或等于5 log2为阳性[2]。新城疫HI效价大于或等于4 log2为阳性，且当阴性血清与标准相对照的HI滴度不大于2 log2，阳性血清与标准抗原对照的HI滴度与已知抗原滴度相差在1个稀释度范围内，所有阴阳性血清不发生自凝的情况下，判断结果有效[3]。

2 结果

6个养鸡场28批次不同日龄蛋鸡有27个批次禽流感H9免疫抗体合格率达到83.3 %以上，只有 1个批次合格率低于70%；鸡新城疫免疫抗体合格率28个批次合格率均达90%以上，达到国家标准，不同群体抗体水平略有差距。禽流感H5免疫抗体水平差距较大，6个养鸡场28个不同批次蛋鸡，16个批次合格率达到国家规定的水平，批次合格率仅为57%；100 d以下鸡群合格率仅为21%，50 d以下更低平均抗体滴度只有3.6，其中33 d合格率为 0.35 d合格率为13%；400～500 d 6个批次中仅1个批次达到国家标准，其他批次抗体水平也较低，变异系数较大，见表1～6。

表1 A场禽流感(H5、H9)、鸡新城疫免疫抗体检测结果

由表1可知，A场共检测4批鸡群，新城疫和H9免疫合格率达100%；H5免疫合格率平均为33%，其中35 d免疫合格率最差为13%，变异系数大。220、480 d合格率分别为70%、57%，均达不到国家规定水平。

表2 B场禽流感(H5、H9)、鸡新城疫免疫抗体检测结果

由表2可知，B场H5、H9和新城疫免疫抗体水平均达到97%以上，免疫合格率100%。

表3 C场禽流感(H5、H9)、鸡新城疫免疫抗体检测结果

由表3可知，C 场检测5个鸡群，H9和新城疫每个鸡群免疫抗体合格率为100%；H5在检测5个批次鸡群中只有3个合格率达到国家标准，合格率为60%。

表4 D场禽流感(H5、H9)、鸡新城疫免疫抗体检测结果

由表4可知，D场205～338 d共4个批次，H5、H9及新城疫免疫抗体全部达到国家标准，合格率100%。

表5 E场禽流感(H5、H9)、鸡新城疫免疫抗体检测结果

由表5可知，E场5个批次新城疫与H9免疫抗体合格率为100%；H5免疫抗体全部不合格，合格率最高鸡群只有60%，抗体滴度不均匀，变异系数较大。

表6 F场禽流感(H5、H9)、鸡新城疫免疫抗体检测结果

由表6可知，F场检测6个批次鸡群，新城疫、H9免疫抗体全部达到国家标准，合格率100%；H5合格率为33%，487 d鸡群合格率只有16%，抗体整齐度也很差，变异系数较大。

3 小结与讨论

3.1 监测结果可见，各场新城疫、H5、H9免疫抗体水平差距较大，整体来看只有B、D 2个场达到国家规定的免疫标准，其他养殖场都达不到国家规定的免疫水平，主要是H5免疫抗体滴度较低，变异系数大，尤其是50 d以下的鸡群或接近淘汰的高龄蛋鸡，合格率低于50%，其原因可能是幼龄家禽免疫器官发育不健全，或不重视将要淘汰鸡群的免疫，是养殖场潜在的威胁，必须高度关注。

3.2 免疫效果与很多因素有关，如：养殖环境，疫苗生产厂商[4]，注射时间[5]、方法、剂量，鸡苗的质量及母源抗体水平等。建议：(1)选择好的鸡苗、疫苗，检测鸡苗母源抗体，根据母源抗体水平与消长规律制定科学的免疫程序，可获得较高的免疫抗体水平，有研究表明注射二价疫苗与单价疫苗对免疫抗体水平有差异[6]；(2)育雏阶段加强管理，消除安全隐患；(3)对中大鸡加强免疫监测，及时进行补免，提高整个鸡场的安全性，防止重大传染病的发生和流行。

3.3 低致病性禽流感H9及新城疫免疫抗体水平：除1个批次抗体水平合格率达不到国家标准外，其余各场不同批次不同年龄免疫抗体滴度较高，整齐度较好，均达到国家标准以上，说明使用的免疫程序合理、免疫方法与剂量合适，能有效保护鸡群健康。

3.4 近几年各种文献资料与行业论坛不断主张提高鸡新城疫和禽流感的免疫临界值，认为免疫抗体行业标准应调整到H5、H9>7，ND>6，甚至主张免疫抗体H5、H9>8[7]，ND>7，这个标准没有确切的研究报告和数据来支持，但是临床上确有较高免疫抗体的鸡群发生疫情，应引起高度重视。

[1] 甘孟侯.中国禽病学[M].北京：中国农业出版社，1997.7.

[2] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会.高致病性禽流感诊断技术：GB/T 18936—2003[S].北京：中国标准出版社，2003.

[3] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会.新城疫诊断技术：GB/T16550—2008[S].北京：中国标准出版社，2008.

[4] 赵全兴，刘方娜，吴焕荣，等.不同厂家生产的禽流感H5亚型灭活疫苗防疫效果对比试验[J].山东畜牧兽医，2010，12(7)：7-10.

[5] 任荣清，汪德生，黄波，等.蛋鸡高致病性禽流感免疫程序的优化[J].中国家禽，2015(11)：64-65.

[6] 吴贇竑，赵灵燕，张东华，等.家禽H5亚型禽流感(Re-6株)疫苗免疫抗体消长规律研究[J].中国预防兽医学报，2015(37)：44-48.

[7] 刘会芳，刘军同.养鸡场在禽流感防控中出现的问题[J].今日畜牧兽医，2011(2)：38-39．

Monitoring Results and Analysis of Avian Influenza and Newcastle Disease Antibody in Guiyang City

Ren Rongqing1，Huang Bo1，Ai Guo2，Li Ganzhong1，Zhang Jinghua1*

(1.Guizhou Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Guiyang Guizhou 550005，China；2.Guizhou Province Yinjiang County Forage Workstation，Yinjiang Guizhou 552000，China)

In order to master the Guiyang city 2014 layer bird flu (H5，H9)，Newcastle disease vaccine immunity and immune antibody level of Guiyang city six large scale chicken farm field 28 batches of different layer sampling，by hemagglutination inhibition anti body and H9 and Newcastle disease immunity test for detection of H5 re-5 plants/re-6 strain，840 serum were tested. Results：28 different batches of chicken H9，Newcastle disease immune antibody qualified rate of 96.4% and 100% respectively，good immune effect; H5 immune antibody qualification rate was 57%，antibody level is relatively low as a whole and coefficient of variation of the larger.

H5、H9; Newcastle Disease; Immune Antibody

2015-12-11

蛋鸡健康养殖关键技术集成与示范【黔农科院院专项(2012)006号】；花溪麦坪基地省级农业科技园区-蛋鸡健康养殖标准化示范基地建设项目【黔科合成转字(2014)5086号】；石阡县蛋鸡产业化关键技术集成与示范【黔科合农字(2013)5092号】

任荣清(1968—)，男，副研究员，从事畜禽传染性疾病防治研究。E-mail：277528403@qq.com

*通讯作者

S851.34

B

1007-1474(2016)02-0009-04