妊娠相关血浆蛋白A及CRP在急性冠状动脉综合征进展中的诊断效能评价

曾昭伟，常艳敏

(天津市南开医院 检验科，天津300100)



妊娠相关血浆蛋白A及CRP在急性冠状动脉综合征进展中的诊断效能评价

曾昭伟，常艳敏

(天津市南开医院 检验科，天津300100)

摘要：目的评价妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)与CRP在急性冠状动脉综合征(ACS)患者中的诊断效能。方法回顾性分析96例ACS患者、30例稳定性心绞痛及62例正常对照者的PAPP-A及CRP浓度指标。用化学发光法测定血清PAPP-A，用散射光比浊法测定血清CRP含量。比较ACS组和正常对照组间PAPP-A、CRP指标的浓度差异，分析各指标在ROC曲线下的面积、特异性及敏感性。结果PAPP-A及CRP在AMI组、UAP组之间差别无统计学意义(P>0.05)，在AMI、UAP组与SAP、正常对照组之间差别有统计学意义(P<0.05)，在SAP及正常对照组间差别无统计学意义(P>0.05)。PAPP-A与CRP正相关。检测ACS组，ROC曲线下的面积：PAPP-A >CRP，面积分别为：0.808、0.767。PAPP-A、CRP诊断ACS临界值分别为：15.56 mIU/L、2.80 mg/L。结论通过ROC曲线评价，诊断ACS时，作为单一检测指标时，PAPP-A比CRP更优。

关键词：ROC曲线；急性冠状动脉综合征；妊娠相关血浆蛋白A；C反应蛋白

(ChinJLabDiagn,2016,20:0933)

急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS) 是我国常见的一种心血管系统疾病，约占急诊患者的20%，其恶性转归甚至死亡的危险性极大，患者主要表现为不稳定性心绞痛，包括ST段抬高型心肌梗死及非ST段抬高型心肌梗死[1]，发病急、危险性大。目前的检测手段如心电图、心肌酶谱等出现明显变化时间点较晚，不利于早期诊断，ACS临床症状又常常不典型，所以上述诊断手段难言满意，寻求一种早期灵敏的诊断指标成为当务之急[2]。

研究表明[3]，妊娠相关血浆蛋白A(pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A)其在ACS患者血管斑块中高表达，其作为一种潜在的特异标志物值得深入研究。C反应蛋白(CRP)是一种重要的急性时相反应蛋白，与冠状动脉的急性损伤、病变恶化发展有着密切的联系，往往被用于心血管疾病如ACS的检测指标[4]。

本研究旨在观察急性冠状动脉综合征患者血清中PAPP-A及CRP含量变化，用受试者工作特征(ROC)曲线评价利用PAPP-A及CRP预测ACS的临床价值，确定最佳临界值并评价两者对ACS早期诊断的意义，为ACS早期诊断寻找更优指标。

1对象与方法

1.1对象随机选取自天津市南开医院心内科2013年12月-2014年03月期间入院治疗急性冠状动脉综合征患者96例，诊断均符合美国心脏病学会(ACC)和美国心脏病协会(AHH)制定的诊断标准，患者经冠状动脉造影及病理学改变为金标准证实，其中不稳定型心绞痛41例，急性心肌梗死55例，男67例，女29例，平均年龄(52.1±10.8)岁。另入选稳定型心绞痛30例，其中男19例，女11例，平均年龄(50.2±9.6)岁。经住院行冠状动脉造影未发现任何斑块或狭窄的健康体检者为对照组，62例，其中男39例，女23例，平均年龄(56.2±10.2)岁。所有患者从发生ACS至入院30 min 内完成常规12导联心电图检查，并抽取静脉血检测生化、血脂、凝血指标、心肌酶( CK、CK-MB) 和cTnT等指标。搜集所有患者的年龄、性别、体重指数、吸烟史、高脂血症等一般临床资料。

纳入标准：AMI、UA、稳定型心绞痛(stable anginapectoris，SAP)的诊断以ACC/AHA2004年冠心病有关指南命名和诊断标准为依据。排除标准：所有研究对象均排除妊娠、高血压、严重肝肾疾病、严重心力衰竭等。

1.2方法

1.2.1血浆标本的收集所有研究对象均于发病12h内采集肘静脉血4 ml，肝素抗凝，4 000 r/min离心5 min取血浆，检测或-40℃保存备用。

1.2.2基于微球标记的PAPP-A检测

①抗体标记受体微球带有滤膜的离心管中加入0.1 mg抗体，9 000 rpm离心8 min，缓冲液洗涤，重复6次，在抗体液中加入0.5 mg受体微球，10 μl的25 mg/ml NaBH3CN、1.5 μl 10%Tween-20，加PBS至100 μl，37℃振荡48 h，受体微球浓度2 mg/ml。

②生物素标记抗体离心管中加入标记抗体1 mg，9 000 rpm离心8 min，用缓冲液重复洗涤6次，在50 μl抗体溶液中加入5 μl浓度22 mg/ml生物素，室温振荡20 h，用带有滤膜的离心管去除剩余生物素。

③标本检测在96孔板中加入25 μl生物素化抗体(1∶2000)，25 μl受体球(1∶100)，25 μl血清样本，37℃孵育30 min。避光条件下加入175 μl供体微球，于37℃孵育10 min，以定值血为质控，制备标准品并测定信号值。

1.2.3CRP检测CRP 含量测定采用美国Beckman全自动免疫特种蛋白分析仪，利用散射光比浊法测定。

2结果

2.1一般临床资料比较ACS组与SAP组比较，P>0.05，差异无统计学意义(表1)。

表1　一般临床资料的比较±s)

注：性别、吸烟史等指标及表格中指标，均P>0.05。

2.2各组别PAPP-A及CRP检测对比PAPP-A及CRP检测在ACS与SAP、对照组浓度差别有统计学意义(P<0.05)，SAP与对照组差别无统计学意义(P>0.05，图1)，且在ACS标本组PAPP-A及CRP的相关系数r=0.9754，P<0.05，两者正相关，相关性良好。

注：A为PAPP-A浓度对比图，B为CRP浓度对比图。其中，*P<0.05，#P>0.05。

2.3ROC评价绘制ROC图比较其临床诊断意义，分析结果显示：在针对ACS检测中，PAPP-AROC曲线下面积为0.808，而CRP为0.767，PAPP-A、CRP诊断ACS临界值分别为15.56mIU/L、2.80mg/L。PAPP-A检测比CRP临床价值高(表2、图2)。

表2　PAPP-A及CRP检测对ACS临床诊断价值的性能评价

图2　PAPP-A 和CRP检测的ROC曲线分析

3讨论

ACS发病率高，其发病转归主要为生成的动脉硬化斑块破裂[5]，进而生成血栓，引起相关器官组织的梗死，危险性极大。随着社会的发展及老龄化社会的到来，导致ACS的危险因素越来越多，比如环境、遗传及个体差异等，老年人口的相对增多使得ACS发病率必然有增无减。早期发现和早期治疗是延长患者生存期、降低死亡率的关键。

PAPP-A是一种基质金属蛋白酶，主要由胎盘合体滋养层细胞合成、分泌。研究表明，其在ACS患者中浓度也有升高。最初发现PAPP-A在孕妇胎盘合体滋养层细胞合成并分泌，后来研究表明PAPP-A在心血管斑块破裂中起到分解纤维帽胞外基质的作用，其表达增高[6]。CRP是一种重要的急性时相反应蛋白，细胞因子如白介素诱导大量CRP的产生是ACS发病机制之一[7]。CRP水平的升高与心血管危险性呈正相关,并被认为是致心血管疾病的独立危险因子[8]。

本研究随机选择标本，以病理诊断为金标准分为三组：ACS、SAP、正常对照组。各组基本临床资料差别均无统计学意义。利用基于微球的化学发光检测体系检测PAPP-A与CRP检测结果对比。结果表明，PAPP-A及CRP在ACS组高于SAP及正常对照组，差别有统计学意义，PAPP-A与CRP有正相关，相关性良好，回归方程为：YCRP=5.294 7+2.348 6XPAPP-A，(r=0.9754，P<0.05)。所以两者均可以作为指标之一对ACS进行检测[9]。

ROC曲线能评价一个和多个的效能并通过曲线下面积(AUC)直观表示[10],便于不同方法间的比较。面积在0.5以下时无诊断价值，面积在0.5-0.7时有较低的准确性，面积在0.7-0.9 时有较高的准确性，面积在0.9以上时准确性最高。本研究发现，PAPP-A与CRP的AUC均大于0.7，分别为0.808、0.767。所以，PAPP-A在ACS诊断方面价值高于CRP。

总之，PAPP-A与CRP在检测ACS方面均有临床价值，但是PAPP-A的诊断效能更佳。我们后续可以扩大标本量，利用PAPP-A与其他高效新颖的检测指标联合建立针对ACS的检测体系，为优化ACS的早期诊断打下坚实基础。

参考文献：

[1]CarrizoS,PeinadoRP,Sanchez-RecaldeA,etal.Clinicalandangiographiccharacteristicsofpatientswithacutecoronarysyndromeassociatedwithsuddencardiacdeath[J].HellenicJCardiol,2015,56(2):136.

[2]LodhM,GoswamiB,ParidaA,etal.Assessmentofserumleptin,pregnancy-associatedplasmaproteinAandCRPlevelsasindicatorsofplaquevulnerabilityinpatientswithacutecoronarysyndrome[J].CardiovascJAfr,2012,23(6):330.

[3]JespersenCH,VestergaardKR,SchouM,etal.Pregnancy-associatedplasmaprotein-Aandthevulnerableplaque[J].BiomarkMed,2014,8(8):1033.

[4]AltunI,OzF,ArkayaSC,etal.Effectofstatinsonendothelialfunctioninpatientswithacutecoronarysyndrome:aprospectivestudyusingadhesionmoleculesandflow-mediateddilatation[J].JClinMedRes,2014,6(5):354.

[5]BurgmaierM,HellmichM,MarxN,etal.Ascoretoquantifycoronaryplaquevulnerabilityinhigh-riskpatientswithtype2diabetes:anopticalcoherencetomographystudy[J].CardiovascDiabeto,2014,13:117.

[6]SchaubN,ReichlinT,MeuneC,etal.Markersofplaqueinstabilityintheearlydiagnosisandriskstratificationofacutemyocardialinfarction[J].ClinChem,2012,58(1):246.

[7]WangXH,LiuSQ,WangYL,etal.Correlationofserumhigh-sensitivityC-reactiveproteinandinterleukin-6inpatientswithacutecoronarysyndrome[J].GenetMolRes,2014,13(2):4260.

[8]ChengJM,OemrawsinghRM,Garcia-GarciaHM,etal.RelationofC-reactiveproteintocoronaryplaquecharacteristicsongrayscale,radiofrequencyintravascularultrasound,andcardiovascularoutcomeinpatientswithacutecoronarysyndromeorstableanginapectoris(fromtheATHEROREMO-IVUSstudy)[J].AmJCardiol,2014,114(10):1497.

[9]LundJ,WittfoothS,QinQP,etal.Freevstotalpregnancy-associatedplasmaproteinA(PAPP-A)asapredictorof1-yearoutcomeinpatientspresentingwithnon-ST-elevationacutecoronarysyndrome[J].ClinChem,2010,56(7):1158.

[10]ZakiME,El-BassyouniHT,El-GammalM,etal.Indicatorsofthemetabolicsyndromeinobeseadolescents[J].ArchMedSci,2015,11(1):92.

基金项目：天津市卫生局科技基金(2013KY24)

文章编号：1007-4287(2016)06-0933-04

中图分类号：R543.3

文献标识码：A

(收稿日期：2015-09-14)

Evaluation of diagnostic efficacy of pregnancy associated plasma protein A and CRP in patients with progressive acute coronary syndrome

ZENGZhao-wei，CHANGYan-min.

(DepartmentofClinicalLaboratory,TianjinNankaiHospital,Tianjin300100,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the diagnostic efficacy of pregnancy associated plasma protein A (PAPP-A) and CRP in patients with acute coronary syndrome (ACS).MethodsConcentrations of PAPP-A and CRP in 96 patients with ACS,30 ones with stable angina pectoris and 62 cases of normal controls were retrospectively analyzed.Serum PAPP-A and CRP in ACS and the control group were detected with chemiluminescent method and light scattering turbidimetry respectively,the concentrations difference between the ACS group and the normal control group were compared.The area under the ROC curve,the specificity and sensitivity of the concentrations were all analyzed.ResultsThe differences between PAPP-A and CRP in AMI group and UAP group were not statistically significant (P>0.05),however,there were statistical differences between AMI,SAP groups and UAP,control groups (P<0.05),no statistical difference was found between SAP and normal control groups (P>0.05).With the progression of ACS,the concentrations of PAPP-A and CRP was significant difference (P<0.05),PAPP-A concentration was positively correlated with CRP.In ACS group,the area under the ROC curve was PAPP-A>CRP,they were 0.808 and 0.767 respectively.Cut-off values of PAPP-A and CRP were 15.56mIU/L and 2.80 mg/L.Conclusionwith the ROC curve evaluation,as the detection index in ACS,PAPP-A was better than CRP.

Key words:ROC curve;acute coronary syndrome;pregnancy associated plasma protein A;C reactive protein