湖北省某羊场羊不明原因死亡的紧急流行病学调查

裴 洁，彭清洁，刘华雷，张海明，宋念华，郭爱珍

（1.湖北省动物疫病预防控制中心，湖北武汉 430070；2.华中农业大学动物医学院，湖北武汉 430070；3.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266030；4.广州市动物疫病预防控制中心，广东广州 510440）



湖北省某羊场羊不明原因死亡的紧急流行病学调查

裴 洁1，彭清洁2，刘华雷3，张海明4，宋念华1，郭爱珍2

（1.湖北省动物疫病预防控制中心，湖北武汉 430070；2.华中农业大学动物医学院，湖北武汉 430070；3.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266030；4.广州市动物疫病预防控制中心，广东广州 510440）

摘 要：2015年8月，湖北省某新建种羊场出现不明原因死亡的病例。为查明疫病发生的原因，分析可能的风险因素，及时提出防控建议，采用现场流行病学调查和实验室检测相结合的方式，对该起疫情进行了调查。综合现场调查、实验室检测结果和干预性措施的治疗效果，推测本次疫情发生的主要原因是疫苗注射、饲养方式转变和饲喂霉变饲料等一系列应激因素，诱使羊群发生呼吸道感染而死亡。

关键词：山羊；不明原因死亡；应激；紧急流行病学调查

2015年8月24日，湖北省十堰市某新建种羊场报告该场羊群出现采食量下降、高烧、咳嗽等症状，并陆续出现死亡病例。为进一步了解疫病发生经过，查明可能的风险因素，及时提出防控措施建议，调查组于8月28—29日到开展了现场紧急流行病学调查。

1　材料与方法

1.1病例定义

自引种之日起，在该种羊场饲养的成年马头山羊同时出现以下2种及2种以上症状：精神不振、采食量下降或停止、高热、咳嗽。

1.2现场调查

通过现场调查和座谈交流，深入了解当地羊的养殖分布，近年来疫病流行概况，发病羊场的地理位置、周边环境、管理模式、生产和免疫记录，以及疫病发生经过、发病后采取的干预性措施等。

1.3实验室检测

对2只病死羊进行解剖，采集气管、心、肺等样品，冷藏条件下保存送检。将采集的心、肺样品处理后涂于加血清的TSA固体培养基上进行有氧细菌培养，对16S rDNA进行PCR扩增和测序，鉴定细菌种属；将气管分泌物、肺组织匀浆液、肺灌洗液经细菌滤器过滤后接种于羊支原体专用培养基，对可疑菌落用羊支原体特异性PCR方法鉴定。对分离到的病原菌采用纸片扩散法进行药敏实验。

1.4数据分析

对疫病的发生特征进行时间、空间和群间分布描述，分析疫病流行规律，探讨可能存在的风险因素。应用Epi infoTM7对收集的数据进行统计学分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1疫病经过

2.1.1羊场概况。该种羊场位于十堰市安阳镇余咀村某座山头上，占地面积2 300平方米，2015年5月初步建成，规划饲养马头山羊2 000只。该种羊场周边均为小山头，无养殖场户。 7月17日，从邻县种羊场引入108只马头山羊，包括公羊5只、母羊103只，部分母羊怀有小羊。引种途中死亡1只母羊，到场后一周内陆续有4只怀孕母羊出现流产。饲喂初期，发现栏舍的设计不便于山羊吃草，故将2栋、3栋的山羊分别转舍至4栋、5栋，待2栋、3栋栏舍加修完毕后又分别将山羊转回（图1、图2）。引种后20%的羊只出现疑似羊传染性脓疱症状，未进行隔离饲养，经紫药水治疗后均已恢复健康。

2.1.2时间分布。7月17日引种后，该场零星发生羊只死亡，但未引起重视。此后，该种羊场在7月30日和8月14日，对全群免疫羊痘疫苗和预防羔羊痢疾、羊猝狙、羊肠毒血症及羊快疫的三联四防疫苗，注射后部分羊只出现短暂精神不振，但很快恢复正常。8月16日开始，羊只陆续出现高热、咳嗽等临床症状，严重者死亡。临死前病羊体态瘦弱、部分出现体温下降。至8月29日，全场存栏的89只成年山羊中死亡18只，隔离24只（图3）。

图1　发病羊场的场区布局

图2　发病羊场的栋舍内布局

图3　发病羊场羊只死亡病例的时间分布曲线

2.1.3空间和群间分布。现场调查发现，首起死亡病例发生在7月26日，来自2栋。截至8月29日，107只成年公羊中，42只发病，袭击率为39.3% ；18只死亡，死亡率为16.8%。从发病情况看，2栋、3栋均有羊只发病，包括公羊、母羊。不同栏舍和不同性别的发病情况均无统计学差异（表1）。从死亡情况看，2栋羊只的死亡情况与3栋差异显著（OR=6.41，95%CI：1.73～23.72）， 公羊的死亡情况与母羊差异显著（OR=25.14，95%CI：2.62～241.61），可见死亡病例在羊群中存在明显的空间和群间分布特征（表2）。

2.2实验室诊断

对2只病死山羊进行现场解剖，其中1只可见心包有积液、絮状物，心肌变软；胸腔有少量黄色积液；右肺萎缩，左肺与胸壁粘连严重，有实变；另1只可见心脏有出血点，肺脏尖叶有实变，肾脏表面有少许出血点，真胃黏膜破溃、脱落，盲肠粘膜出血（图4～图7）。

表1　发病羊场不同栏舍和不同性别羊只的发病情况

表2　发病羊场不同栏舍和不同性别羊只的死亡情况

图4　右肺与胸壁粘连

图5　肺部实变

图6　真胃黏膜破溃

图7　盲肠粘膜出血

根据病死羊的临床表现和剖检变化，初步怀疑为支原体感染。但对肺、气管等组织样品进行支原体培养，结果为阴性。从肺、气管中分离到大肠杆菌、单胞菌和不动杆菌，经药敏试验发现，分离细菌对诺氟沙星、丁胺卡那、氧氟沙星、大观霉素、洛美沙星敏感。

2.3干预性措施

8月16日，对发病羊使用青霉素、柴胡、氨基比林进行治疗，无显著效果。8月18日开始使用氟苯尼考治疗，8月24日换用恩诺沙星。将发病羊进行隔离，饲喂于1栋。采取不同栏舍饲养人员严格分开、在栏舍门口加消毒盆、每天进行一次栏舍消毒等措施。

2.4潜在风险因素分析

该种羊场引种山羊来源于邻县的马头山羊种羊场，其采用的是“公司+农户”的养殖模式。本次调查的108只山羊系该公司从当地4户散养户中收购的128只马头山羊中筛选出来的，余下20只山羊继续饲喂于该公司种羊场内。通过追溯，发现剩余的20只山羊曾经出现过短暂采食量下降、咳嗽等症状，经常规用药后痊愈，说明该批羊群在引种前就已经存在呼吸系统病原菌的隐性感染。

结合临床症状和剖检变化，初步怀疑为支原体感染，但组织样品经实验室分离检测，结果却为阴性，可能与8月16日开始连续对病羊使用青霉素、氟苯尼考、恩诺沙星等药物治疗有关。8月24日换用恩诺沙星后，病情逐渐出现好转。从治疗情况看，恩诺沙星的效果较好。

引种前，各散养户对羊群普遍采取半放牧的形式喂养。该种羊场引种后，羊群全部饲喂在栏舍内。饲养方式的改变使得山羊对圈养环境不适应，导致羊群生长速度减缓，对疫病的抵抗力下降。此外，现场查看还发现饲喂的小部分玉米存在霉变现象。临床解剖发现病死山羊肾脏出现局部淤血、盲肠粘膜出血，证实霉变饲料危害着羊只的健康。

临床数据显示，2栋和3栋羊只的死亡情况差异显著，可能与引种前各散养户饲喂的羊只隐性感染状况不同有关。公羊和母羊的死亡情况差异显著，可能是由于公羊栏舍均靠近粪便处理沟道。栋舍外的粪便长期堆积发酵后产生的恶臭气体刺激公羊呼吸道，使得公羊的发病情况更为严重。

3　分析与讨论

3.1通过流行病学调查、临床症状观察、病理剖检和干预性措施的治疗效果，推测该种羊场发生的本次疫情主要是由于羊群经过长途运输，到场后经历转栏、疫苗注射、饲养方式转变等一系列刺激产生应激反应[1]，诱使机体内的呼吸系统条件性病原菌产生致病力，导致羊只发生呼吸道感染，个别病羊因采食霉变的饲料使得病情进一步加重从而出现死亡。

3.2实验室从死羊的呼吸道中分离到大肠杆菌、单胞菌和不动杆菌，多为分布广泛的条件性病原菌，当机体抵抗力降低时可导致动物发生呼吸系统和消化系统的疫病。通过药敏实验，证明分离的细菌对沙星类药物敏感，临床用药也证明了恩诺沙星对本次疫情有显著的治疗效果。有文献[2]报道，许多地区由于从外地引进山羊常发生山羊支原体病，病羊和隐性带菌羊是主要传染源。泰乐菌素等大环内酯类抗生素、恩诺沙星等喹诺酮类药物对支原体的早期治疗有一定的效果[3]。虽然实验室未分离到支原体，但是从发病情况和治疗效果看，不排除存在支原体感染的可能性。

3.3根据现场流行病学调查情况，对该种羊场提出了有针对性的预防控制建议：继续对病羊进行治疗，对全群羊只进行预防性用药；增加羊只的户外活动时间和光照时间，可能情况下进行半放牧饲养；停喂霉变饲料，增加全价配合饲料；改善栏舍内外环境，及时清除粪便，加强栏舍和环境的清洁消毒。9月8日，该场已无死亡病例，病羊均逐渐恢复。

3.4由于资料有限，本次调查对风险因素的分析都停留在假设阶段，无法通过数据进行验证。规模化养羊场户，尤其是种羊场应建立完善的养殖管理档案，对动物的引种、饲养、免疫、用药、诊疗等各方面都要做详细记录，便于追溯。引进的羊只需要经过严格检疫和隔离饲养，防止购进病羊或隐性感染羊。隔离期间，应加强饲养管理，减少应激反应，增强羊只对疫病的抵抗力[5]。

3.5近年来，湖北省出台很多扶持政策，发展以牛羊产业为主的草食畜牧业。有些投资者看到有利可图，开始从事养羊业，但不懂饲养管理、疫病防控、生物安全等知识。本次调查的种羊场，建有标准化羊舍，配有高科技设备，聘有经验丰富的养殖人员。但因场内缺乏专业兽医，当发生高烧、咳嗽这种常见疫病时，不能及时采取有效措施进行控制，致使疫病发展严重，最终给养殖场造成了经济损失。这提示政府在推动畜牧业发展的同时，还需强化兽医队伍的教育培训，提高养羊场户的防病意识和能力。

参考文献：

[1]陈来华.国内动物应激发生现状及应对措施[J]. 中国动物保健，2015，17（12）：13-14.

[2]田克恭，李明.动物疫病诊断技术：理论与应用[M]. 北京：中国农业出版社，2014：534.

[3]徐春光，郝永清，王明莹，等. 羊支原体肺炎防治研究进展[J]. 动物医学进展，2014，35（1）：81-85.

[4]薛红. 浅析山羊引种疫病防控注意问题及对策[J]. 上海畜牧兽医通讯，2015（6）：90-92.

（责任编辑：朱迪国）

中图分类号：S851.3

文献标识码：B

文章编号：1005-944X（2016）04-0019-04

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.04.006

通讯作者：宋念华

An Outbreak Investigation of Goats Died of Unknown Causes in A Farm of Hubei Province

Pei Jie1，Peng Qingjie2，Liu Hualei3，Zhang Haiming4，Song Nianhua1，Guo Aizhen2
（1.Hubei Animal Disease Prevention and Control Center，Wuhan，Hubei，430070；2.College of Veterinary Medicine，Huazhong Agricultural University，Wuhan，Hubei，430070；3.China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong，266030；4.Guangzhou Animal Disease Prevention and Control Center，Guangzhou，Guangdong，510440）

Abstract：In August 2015，unknown death cases appeared continuously in a new goat farm of Hubei province. A fi eld investigation and laboratory test were carried out to fi nd out the main reasons of the disease and the possible risk factors. According to the fi eld investigation，laboratory test results and effective intervention measures，it was speculated that the stress factors of immunization，the change of feeding and moldy food induced severe respiratory infection， caused goats died with the serious condition.

Key words：goat；unknown death；stress；outbreak investigation