可见植入荧光标记和微金属线码标记标志拉萨裂腹鱼的研究

朱挺兵， 颜文斌， 杨德国

(中国水产科学研究院长江水产研究所/农业部淡水生物多样性保护重点实验室，湖北武汉 430223)



可见植入荧光标记和微金属线码标记标志拉萨裂腹鱼的研究

朱挺兵， 颜文斌， 杨德国*

(中国水产科学研究院长江水产研究所/农业部淡水生物多样性保护重点实验室，湖北武汉 430223)

摘要[目的]研究不同标记方法对拉萨裂腹鱼的标记效果，为其增殖放流与效果评估提供技术支撑。[方法]分别采用可见植入荧光标记(VIE)、微金属线码标记(CWT)和空白对照处理对拉萨裂腹鱼幼鱼(5～7 cm)进行为期40 d的标志试验,研究不同标记方法对拉萨裂腹鱼的标记效果。[结果]VIE组试验鱼的存活率明显高于CWT组和对照组。VIE组和CWT组试验鱼的标志保持率分别为100%和98%。VIE和CWT标记对试验鱼生长均没有显著影响。[结论] VIE标记是拉萨裂腹鱼幼鱼较适宜的短期标志方式。

关键词拉萨裂腹鱼；可见植入荧光标记；微金属线码标记；鱼类标志

AbstractSchizothoraxwaltoniRegan; Visible implant fluorescent tag; Micro metal coded wire tag; Fish marking

拉萨裂腹鱼(SchizothoraxwaltoniRegan) 隶属鲤形目鲤科裂腹鱼亚科裂腹鱼属，又名拉萨弓鱼、贝氏裂腹鱼，主要分布于西藏雅鲁藏布江中游干支流，是当地特有鱼类和主要经济鱼类之一。拉萨裂腹鱼主要以底栖无脊椎动物为食，兼食着生藻类，渔获物个体一般在500 g/尾以上[1]。近年来，随着雅鲁藏布江流域经济和社会的快速发展，拉萨裂腹鱼正面临着栖息地破坏、过度捕捞、外来物种入侵等问题，导致其自然资源量明显下降，严重威胁着拉萨裂腹鱼的生存与物种延续。为保护这一物种，一些科研单位已经开展了拉萨裂腹鱼的人工增殖与放流研究，但目前还没有开展比较系统的放流效果评估工作。可见荧光植入标记(Visible implant elastomer tag，VIE)和微金属线码标记(Coded wire tag，CWT)是2种最常见的鱼类标记方法，被广泛应用于鱼类增殖放流活动的效果评估。笔者研究了VIE标记和CWT标记对拉萨裂腹鱼的标志效果，旨在为拉萨裂腹鱼增殖放流的效果评估提供技术储备。

1材料与方法

1.1试验鱼试验鱼为2014年2月人工孵化的拉萨裂腹鱼，2014年9月从四川律贝生物科技有限公司购得。试验鱼暂养于中国水产科学研究院长江水产研究所武汉研究中心封闭循环水控温养殖系统，暂养所用的圆形水缸直径80 cm，水体积300 L，水温保持在(15±0.5)℃，DO保持在8 mg/L以上。试验鱼暂养期间使用商业配合饲料(升索牌，型号S4)进行投喂。

1.2试验方法共设置3个处理组，分别为可见植入荧光标记(VIE)组、微金属线码标记(CWT)组和对照组。试验所用标记设备均由美国西太平洋公司(NMT)生产。

从试验鱼中挑选规格较为统一(5～7 cm)的个体进行试验，每个处理组100尾试验鱼。试验时，先用0.3 mg/L的MS-222将试验鱼麻醉，然后测量全长和体重，再迅速进行标志操作。使用CWT标记时，利用标记枪将CWT标记(长1.10 mm、直径0.25 mm)注入试验鱼背部肌肉，标志后用检测棒(V-Detector; NMT)进行检测，以确保标志成功。使用VIE标记时，使用0.3 mL注射器将橙色荧光络合物注入试验鱼的头部皮层，并肉眼检查颜色标志是否完好。标志操作均由同一个人完成。为排除由于操作人员经验不足而造成的影响，标记的前30尾试验鱼不用于正式试验。标志完成后，将试验鱼放入封闭循环水控温养殖系统的水缸中，每个处理组2个缸，每缸放入50尾试验鱼，2个平行。对照组试验鱼不进行标志，但其他处理均按照与标记组相同的要求进行试验。试验期间水温控制在(15.0±0.5)℃，DO保持在8 mg/L以上，光照周期12L:12D。试验鱼每天饱食投喂2次，所用饲料为商业配合饲料。分别于试验开始后的第7天和第40天，对试验鱼生长、存活和标志保持率进行检测。

2结果与分析

2.1存活率与标志保持率由表1可知，试验结束时，VIE标记组试验鱼的存活率为45%，明显高于CWT标记组(9%)和对照组(19%)，说明VIE标记对试验鱼存活的影响要小于CWT标记。对照组试验鱼存活率较低的原因是由于试验1个月后对照组试验鱼突发小瓜虫病，至试验结束时病情已经得到控制。VIE标记组和CWT标记组试验鱼的标记保持率都在98%以上，说明2种标记方法对拉萨裂腹鱼的短期标志保持率都较高。

表1不同标志方式下拉萨裂腹鱼幼鱼的存活率与标志保持率比较

Table 1Comparison of survival rate and marker retention rate ofS.younghusbandijuveniles under different marking ways

试验时间Testtimed存活率Survivalrate∥%VIE组VIEgroupCWT组CWTgroup对照组Controlgroup标志保持率Markerretentionrate∥%VIE组VIEgroupCWT组CWTgroup01001001001001007849095100100404591910098

2.2生长情况由表2可知，试验开始时，各组试验鱼的全长和体重都比较接近。试验结束时，VIE标记组试验鱼的体重增长了13.8%，CWT标记组试验鱼的体重增长了5.5%，对照组试验鱼的体重增长了7.5%，说明VIE标记对拉萨裂腹鱼生长的影响较小。

3讨论与结论

在开展鱼类标记试验时，都希望尽可能减小标记操作对鱼类生长和存活的影响。该研究结果表明VIE标记和CWT标记对拉萨裂腹鱼幼鱼的生长没有显著影响，但是VIE标记组存活率明显高于CWT标记组。造成这种差异的原因可能在于标志部位的不同。VIE标记只在鱼体的表皮层操作，没有伤及更深层的体组织，因而试验鱼可以快速愈合伤口。CWT标记要插入鱼体肌肉深处，试验鱼规格又较小，可能对试验鱼造成了较大的伤害，从而最终降低了总体的存活率。

表2　不同标志方式下拉萨裂腹鱼幼鱼的生长情况

该研究结果表明VIE标志和CWT标记对拉萨裂腹鱼均具有极高的标志保持率。然而，一些研究表明VIE标记和CWT标记在不同时间尺度下对鱼类的标志效果存在较大差异。例如，采用VIE标记和CWT标记标志小鳗鲡(Anguillaanguilla)的32 d标志保持率分别为100%和99%，但512 d的标志保持率分别为66%和99%，说明VIE只适合短期标志，而CWT更适合长期标志[2]。造成这种现象的原因可能在于VIE标记会随着鱼体的生长而扩散和淡化，到了一定程度肉眼将无法识别颜色，而CWT标记是固态的金属丝，不会自行扩散，只要找准部位就能用检测棒检测到信号。由于条件所限，笔者只开展了为期40 d的试验，未能进行更长时间的试验，但在更长的时间尺度下CWT标记拉萨裂腹鱼幼鱼的长期标志保持率可能会保持较高水平，而VIE标记拉萨裂腹鱼幼鱼的保持率可能会高于温带和热带地区的鱼类，由于西藏鱼类生长速度缓慢，VIE标记在皮层的扩散速度可能会更慢。

由于患小瓜虫病的影响，该研究中各组试验鱼的最终存活率均不高。因此，该试验无法说明标记对试验鱼的存活能力是否有影响。但是，笔者同步开展的VIE和CWT对拉萨裸裂尻鱼的标志效果试验也许能说明一定的问题。拉萨裸裂尻鱼和拉萨裂腹鱼均属于裂腹鱼类，且分布区域也大体一致。ZHU T等[3]研究表明VIE和CWT对拉萨裸裂尻鱼的存活均没有显著影响。该试验中VIE组拉萨裂腹鱼的存活率高于对照组。据此推断，VIE标记对拉萨裂腹鱼幼鱼的存活率没有显著影响，而CWT组试验鱼的存活率略低于对照组。目前，并不能确定CWT标记或患病是影响成活率的主因，仍需要进一步研究。

综合考虑成本、操作的便利性，损伤性和标志保持率等因素，VIE标记是拉萨裂腹鱼幼鱼短期标志的较佳方式。

参考文献

[1] 西藏自治区水产局.西藏鱼类及其资源[M].北京：中国农业出版社，1995.

[2] SIMON J,DORNER H.Growth,mortality and tag retention of smallAnguillaanguillamarked with visible implant elastomer tags and coded wire tags under laboratory conditions [J].Journal of applied ichthyology,2011,27(1)：94-99.

[3] ZHU T,GUO W,WU X,et al.Effects of visible implant elastomer and coded wire tags on growth and survival ofSchizopygopsisyounghusbandiRegan,1905[J].Journal of applied ichthyology,2016,32(1)：110-112.

基金项目农业部公益性行业科研专项(201403012)。

作者简介朱挺兵(1987- )，男，江西南康人，助理研究员，博士，从事鱼类生态学研究。*通讯作者，研究员，硕士生导师，从事鱼类保护生物学研究。

收稿日期2016-03-22

中图分类号S 931.1

文献标识码A

文章编号0517-6611(2016)13-004-02

Study of Visible Implant Fluorescent Tag and Micro Metal Coded Wire Tag inSchizothoraxwaltoniJunvenile

ZHU Ting-bing,YAN Wen-bin,YANG De-guo*

(Yangtze River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences/Key Laboratory of Freshwater Biodiversity Conservation,Ministry of Agriculture,Wuhan,Hubei 430223)

Abstract[Objective] To examine the effect of different marking methods on Schizothorax waltoni Regan,and to provide technical support for its artificial releasing and effect evaluation.[Method] Junvenile S.waltoni Regan (total length 5-7 cm) were treated with visible implant elastomer tag (VIE)implantation,coded wire tag (CWT)implantation and no implantation (control) for 40 days,effects of different marking methods on S.waltoni were studied.[Result] The survival rate of experimental fish in VIE group was significantly higher than that of CWT and control group.Tag retention in VIE and CWT group were 100% and 98%,respectively.No significant effects were found of both VIE and CWT marking on the growth of experimental fish.[Conclusion] VIE is suitable short-term marking method for S.waltoni junvenile.