罗库溴铵注射液有关物质检查方法筛选

张珊珊

哈药集团技术中心

罗库溴铵注射液有关物质检查方法筛选

张珊珊

哈药集团技术中心

目的通过方法筛选及优化建立罗库溴铵注射液的有关物质的检查方法。方法结果结论所建立有关物质检查方法可有效分离各杂质，方法可行。

罗库溴铵；有关物质；有效分离

罗库溴铵为当下主流的麻醉药品，在医院麻醉科的占有率呈现出逐年增加趋势，现已成为手术麻醉的首选药物，因其起效快，不良反应小，术后复苏比较快，越来越受到医生的青睐，同时也被患者所接受［1］。因为罗库溴铵合成过程复杂，合成路线长，这样杂质比较多，如杂质控制不好可能给患者带来用药风险，为更好地控制产品质量，我们参照相关文献并根据罗库溴铵原料的合成工艺［2-3］，建立罗库溴铵注射液有关物质检查方法，所建立的方法应能有效检出合成过程中的起始物料、中间体及降解产物，相关详细研究结果如下。

1.实验材料

仪器：Agilent 1260高效液相色谱仪（DAD检测器），XS105型电子天平，pB-10型pH计。

试剂及试药：罗库溴铵杂质对照品（A～H），来源为美国药典委员会；罗库溴铵对照品来源为中检院；罗库溴铵注射液为本公司自制样品；四甲基氢氧化铵、乙腈及磷酸均为色谱纯，水为注射用水。

2.方法与结果

相关文献、进口注册标准、《美国药典》及《欧洲药典》罗库溴铵有关物质检查方法相同，但没有明确色谱柱，我们检查方法与上述方法色谱条件相同，流动相为0.05mol/L的四甲基氢氧化铵溶液（用磷酸调pH值至7.4）：乙腈（9∶1），流速为1.0ml/min，色谱柱柱温为45℃，检测波长为210nm，进样量为10ul。

2.1样品处理色谱柱筛选

取供试品溶液，向其中加入杂质A～H及合成过程中起始物料，按照拟定方法进行筛选，结果供试品因为溶液中含有水，在进样时容易出现倒峰，通过筛选，表明现将供试品用氮气吹干后加乙腈稀释这样可以避免出现倒峰，通过筛选，表明使用Agela NH2（3.5um，250mm*4.6mm）柱可以保证杂质及起始物料与主峰有效分离，杂质H与主峰的分离度大于1.5，同时溶剂峰不干扰杂质A检出。

2.2专属性试验

罗库溴铵注射液处方中的辅料为氯化钠及醋酸钠，样品制备时用醋酸调pH值，根据处方用量，我们制备相应的空白辅料溶液，按照确定方法进行考察辅料是否影响杂质测定，实验结果表明辅料不干扰杂质测定。

2.3耐用性试验

变换色谱柱柱温、流速、流动相比例及流动相的pH值，色谱柱柱温变化为±5℃，流速变化为±0.2ml/min，流动相比例为±5℃，结果表明柱温变化时杂质与主峰可有效分离，柱温变化对各杂质检出无影响；流速变化时导致杂质H与主峰不能有效分离，因此，将流速控制在1.0ml/min；流动相比例变化为±2%时杂质与主峰可有效分离，但当流动相比例变化超过2%时，杂质H与主峰不能有效分离；流动相的pH值变化±0.1时，对杂质检出及分离无影响，在上述条件变化时通过DAD检测器监测主峰的峰纯度，在进行有关物质检查时应注意上述条件变化。

2.4专属性试验

对供试品进行酸破坏、碱破坏、氧化破坏、强光破坏及高温破坏，同时向供试品中加入起始物料、中间体及各个已知杂质，通过DAD检测器监测主峰峰纯度，酸破坏为向供试品溶液中加入0.1mol/L盐酸溶液0.5ml，放置2小时，用碱中和；碱破坏样品溶液为供试品中加入0.1mol/L的氢氧化钠溶液0.2ml，放置30min，用酸中和；高温溶液为取供试品于100℃下放置1小时；强光溶液为取供试品于5000lx条件下放置24小时；氧化破坏为向供试品中加入0.5ml30%的过氧化氢溶液，放置3小时（上述样品的供试品均为5ml）。同时制备空白辅料的破坏溶液作为空白对照，计算各破坏条件下的回收率。结果各破坏条件下主峰与杂质峰均可有效分离，杂质H与主峰分离度均符合规定，辅料破坏不干扰杂质测定，酸、碱、氧化、高温及强光条件下的峰纯度均符合规定，其回收率分别为98.6%、97.2%、101.5%、98.4%及105.2%。专属性实验结果表明在高温条件下样品不稳定，产生杂质较多，酸及氧化破坏条件下产生杂质较少，碱破坏条件下杂质明显增加，光照条件下杂质略有增加。

2.5检测限与定量限

取罗库溴铵对照品及杂质A～H，分别制成系列浓度溶液，逐步稀释，以信噪比为3时为检测限，结果罗库溴铵及杂质A～H的检测限分别为9.2、11.5、10.8、13.6、8.7、11.2、5.6、9.7及4.6ng；定量限信噪比为10，结果罗库溴铵及杂质A～H的等量限分别为28.4、29.8.5、30.1、42.6、25.1、36.1、16.2、28.4及10.8ng。

2.6相对相应因子测定

为更准确测定各杂质量，测定杂质A～H与罗库溴铵的相对相应因子，结果表明各个杂质与罗库溴铵的相对相应因子均在0.9～1.1之间，表明不用加校正因子进行计算。

方法学试验结果表明所建立的有关物质检查方法可行，可以有效检出本品合成过程中起始物料及中间体与降解产物（专属性）。

2.7供试品检查

对所制备三批供试品进行有关物质检查，结果三批供试品中主要杂质为杂质A与H，其杂质量均小于0.1%，三批供试品总杂质均小于0.5%。

3.讨论

我们探讨罗库溴铵注射液杂质检查方法，供试品溶液中含有水对测定有干扰，在测定时应用氮气吹干在配液进样，否会影响杂质A的检查。色谱柱的内径对杂质检出特别是杂质H与主峰分离度有较大影响，建议固定内径，最好是3.5um；因杂质H与主峰不易有效分离，因此有关物质检查时应将杂质H与主峰的分离作为系统适用性考察指标在有关物质检查之前先进行评价，待符合要求后方可测定；以上为有关物质检查注意事项。从方法学试验结果可知我们所建立的有关物质检查方法灵敏度高、专属性强，可作为罗库溴铵注射液有关物质检查方法。

［1］吴玉军.腹部手术患者全麻下持续输注维库溴铵或顺式阿曲库铵肌松作用比较.中外医学研究，2015，13（23）：141-142.

［2］赵凯，侯建平，苑洪忠.罗苦修按有挂物质的合成.中国医药工业杂志，2011，42（10）：732-736.

［3］宋更申，姜建国，周丽.HPLC法测定罗库溴铵注射液的含量及有关物质.中国药房，2010，21（32）：3060-3063.

张珊珊（1984-），女，山东省龙口市人，硕士研究生，中级，作者单位：哈药集团技术中心，研究方向：药物质量研究。