固相萃取-超高效液相色谱-质谱联用法测定生活饮用水中磺胺甲噻二唑含量

唐 琨，李洪鑫，苏立健

(泰达水业有限公司 天津300457)

固相萃取-超高效液相色谱-质谱联用法测定生活饮用水中磺胺甲噻二唑含量

唐 琨，李洪鑫，苏立健

(泰达水业有限公司 天津300457)

建立了固相萃取-超高效液相色谱-质谱联用法测定生活饮用水中磺胺甲噻二唑含量的方法。水样经固相萃取富集纯化，以 0.1%,甲酸水溶液和乙腈为流动相，以液质联用法对生活饮用水中磺胺甲噻二唑的含量进行分析。该法的检出限为0.002,µg/L，测定结果的相对标准偏差为1.1%,～2.9%,，加标回收率为70.0%,～101.4%,。

磺胺甲噻二唑 固相萃取 液质联用

长期以来，抗生素广泛应用于人类及动物疾病的防治，是世界上用量最大、使用范围最广的药物之一，全球抗生素的年均使用总量为 100,000～200,000,t。[1]我国亦是抗生素的使用大国，据药学会抽样显示：2005—2009年间，抗感染药物的用药金额占医院用药总金额的 23%～25%,，其中，抗生素又占抗感染药物的90%,。

同时，抗生素作为促生长剂和饲料添加剂添加于动物饲料中，在畜牧业、养殖业领域中应用广泛。[2-3]在淡水养殖业，抗生素作为饲料添加剂被直接投加到水中，在一定范围内起到了抑菌杀菌的作用，但长期的投加导致大量抗生素残留于水体及其沉积物中，引发诸多危害，如对水生物的毒害，对水产养殖产品消费者的健康构成一定威胁等。[4]

目前已有超过16类抗生素药物在水体及其沉积物等环境中有高含量的检出。[5-6]被广泛应用的抗生素，按其化学结构可分为β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类、氨基糖苷类、大环内酯类、磺胺类等。其中，磺胺类药物是对氨基苯磺酞胺结构药物的总称，是一类用于预防和治疗细菌感染性疾病的抗菌药，其抗菌谱广、价廉易得，因此一直在养殖业中得到广泛应用。磺胺类药物毒性较强，且在食品中残留的半衰期长，对人类健康和环境危害显著。[7]部分磺胺类药物已经被列为禁用渔药，对于可以使用的磺胺类药物，在水产品中也有严格的残留限量标准。[8]有关磺胺类药物分析的国内外报导较为多见，主要有酶联免疫法、气相色谱法、高效液相色谱法和液质联用法等。近年来，固相萃取技术被广泛应用于测定水体中抗生素的水样预处理过程。[9]本研究应用固相萃取-超高效液相色谱-质谱联用技术测定生活饮用水中的磺胺甲噻二唑，以明确生活饮用水中磺胺甲噻二唑的含量，为水处理工艺过程中对磺胺甲噻二唑的处理方法提供可靠参考。

1 实 验

1.1 仪器和试剂

超高效液相色谱-质谱联用仪，ACQUITY UPLC-Xevo-TQD，MassLynx V4.1软件，美国Waters公司；半自动固相萃取仪，美国 Agilent公司，TPS2000；固相萃取柱，Waters Oasis HLB小柱(3,cc，60,mg)；氮吹仪，美国Caliper公司，TuroVap LV；磺胺甲噻二唑标准溶液，德国 Dr．E公司，纯度99.9%,；超纯水，产自 Milli-Q系统；甲酸，色谱级，Fisher公司；乙腈，色谱级，Merck公司。

1.2 仪器工作参数

1.2.1 色谱条件

色谱柱，ACQUITY UPLC®BEH C18 1.7,µm 2.1×100,mm；柱温，40,℃；流速，0.3,mL/min；流动相，A泵为0.1%,的甲酸，B泵为乙腈。梯度洗脱程序见表1。

表1 梯度洗脱程序Tab.1 Gradient elution program

1.2.2 质谱条件

采用正离子电喷雾离子源(ESI＋)，毛细管电压0.5,kV，锥孔电压35,V，离子源温150,℃，脱溶剂温度500,℃，脱溶剂气800,L/Hr，锥孔气50,L/Hr。采用多反应监测(MRM)模式。其他相关质谱条件见表2。

表2 质谱条件Tab.2 Mass spectrum conditions

1.3 实验方法

1.3.1 水样采集和保存

样品充满采样瓶，水样取回后应尽快测定，若不能及时检测，加入 Na2,EDTA 1.0,g/L，置于 4,℃冰箱保存。

1.3.2 水样预处理

取水样 200,mL，加入 0.2,g硫代硫酸钠脱氯，经0.45,µm 玻璃纤维膜过滤，充分混匀。固相萃取小柱依次用5,mL甲醇、5,mL高纯水进行活化，与大体积水样采集器连接进行富集，控制流速为 4～5,mL/min，使水样完全通过固相萃取柱。样品抽滤完成后，撤下大体积采样管，并用10,mL纯净水冲洗柱体。将固相萃取小柱抽空 30,min，充分干燥柱体。洗脱浓缩，用 5,mL甲醇分两次进行洗脱，第 1次3,mL，第2次2,mL，收集洗脱液。洗脱液收集完毕后氮气吹至近干，用 0.2%,的甲酸乙腈溶液定容至1,mL。

1.3.3 上机检测

以直接方式进样，进样量为5,μL。

色谱峰的考查中，标准色谱图如图1所示：

图1 标准色谱图Fig.1 Standard chromatogram map

定性分析的保留时间为 4.63,min。定量分析中，利用机器测得色谱峰面积，根据峰面积定量。

1.4 线性范围和检出限

在空白水样中添加标准品做检出限试验。以3倍信噪比计算，磺胺甲噻二唑的检出限为 0.002,µg/L，线性范围 0.25～10.0,μg/L，线性方程为 y＝2,363.53,x＋732.739，R2均值达 99%,以上，满足国内外的法规限量要求。

1.5 方法的回收率和精密度

表3 水中磺胺甲噻二唑的加标回收率及相对标准偏(n＝7)Tab.3 Recovery rates and relative standard deviation (n＝7)of Sulfamethizole in water

采用外标法对生活饮用水进行加标，加标浓度分别为 1.0,μg/L和 9.0,μg/L，各自平行测定 7次，相对标准偏差、加标回收率见表3。

2 结 语

本实验用超高效液相色谱-质谱联用技术测定生活饮用水中磺胺甲噻二唑的含量，分析速度快、操作简单、精密度、准确度良好、检出限低，能够满足抗生素测定的基本要求，适合用于生活饮用水中磺胺甲噻二唑含量的测定。■

［1］ 王敏，唐景春. 土壤中的抗生素污染及其生态毒性研究进展[J]. 农业环境科学学报，2010，29(增)：261-266.

［2］ Addison J B. Antibiotics in sediments and run-off waters from feedlots[J]. Residue Reviews，1984(92)：1-28.

［3］ Kümmerer K. Antibiotics in the aquatic environment-a review-partⅠ[J]. Chemosphere，2009，75(4)：417-434.

［4］ 王路光，朱晓磊，王静飞，等. 环境水体中的残留抗生素及其潜在风险[J]. 工业水处理，2009(5)：29-33.

［5］ Kümmerer K. Significance of antibiotics in the environment[J]. Journal of Antimicrobial Chemotherapy，2003(52)：5-7.

［6］ Ternes T A，Joss A，Siegrist H. Scrutinizing pharmaceuticals and personal care products in wastewater treatment[J]. Environmental Science and Technology，2004(38)：392-399.

［7］ 特奈普西德(Tumipseed S B)，朗(Long A R). 动物源性食品中药物残留分析方法[M]. 福建进口食品行业协会，译. 天津：天津科技翻译出版公司，1994：404.

［8］ 蕙芸华，冯兵，张晓玲，等. 高效液相色谱法同时测定 17种磺胺类药物的研究[J]. 生物技术通报，2009，3(增)：284-286.

［9］ 刘文民，徐媛，赵景红，等. 固相微萃取新技术在水分析中的应用[J]. 生命科学仪器，2004，2(5)：12-16.

Determination of Sulfamethizole in Drinking Water Samples by Solid Phase Extraction-Ultra Performance Liquid Chromatography Mass Spectrometry

TANG Kun，LI Hongxin，SU Lijian
(TEDA WATER Company，Water Quality Monitoring Centre，Tianjin 300457，China)

A rapid analytical method for simultaneous determination of sulfamethizole in drinking water sample was developed．Water samples were concentrated and purified by solid phase extraction(SPE)．Then，using 0.1%, formic acid and acetonitrile as the mobile phase，sulfamethizole contents were analyzed by ultra performance liquid chromatography electro spray tandem mass spectrometry(UPLC–MS/MS)．The limit of determination for analytes were 0.002,µg/L and the relative standard deviation were 1.1%～2.9%,．The recoveries were in the range of 70.0%～101.4%,.

sulfamethizole；SPE；UPLC–MS/MS

TV213

A

1006-8945(2016)07-0022-02

2016-06-06