吴松亮 赵富宽
(江苏省原子医学研究所,无锡 214063)
高效液相色谱仪的使用及故障排查
吴松亮 赵富宽
(江苏省原子医学研究所,无锡 214063)
摘 要:本文分析总结了液相色谱仪在日常使用过程中的注意事项、设备的保养以及故障的排查与维修。
关键词:高效液相色谱 HPLC Waters 故障
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chroma tography,HPLC)是20世纪中期发展起来的一种色谱方法。该方法与其他色谱法比较,具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度高和应用范围广的特点[1]。目前,该色谱法广泛应用于医药、食品、环境等各个领域。在仪器使用过程中会经常遇到一些问题,影响正常工作。本文介绍有关(Waters1525)高效液相色谱仪的一些日常使用注意事项以及设备日常的保养和维护。
高效液相色谱法就是流动相经过过滤,然后由高压泵加压流经进样器、保护柱(在线过滤器)、色谱柱、检测器、收集器,最后到废液瓶的恒流系统。该系统是否正常工作,直接影响到实验数据。所以,维护好该恒流系统至关重要。
1.1 流动相
(1)流动相存放容器要定时清洗、更换;(2)非HPLC级的流动相一定要经0.45μm滤膜过滤,HPLC级的流动相最好也过滤一下;(3)流动相使用前,一定要经行脱气处理,防止压力不稳;(4)流动相的pH值最好在2~8之间(目前,有些色谱柱已经能在pH值1~12之间正常工作);(5)缓冲盐流动相一定要现用现配;(6)经常检查流动相过滤器。
1.2 高压泵
(1)定期检查泵的密封垫是否有渗漏;(2)定期检查活塞杆的磨损;(3)实验结束后需进行冲洗。
1.3 保护柱(在线过滤器)
(1)定期拆开,清洗里面的滤芯;(2)定期检查是否有渗漏。
1.4 进样器
进样器的核心就是一个六通阀,流动相流经六通阀将样品带入恒流系统。(1)定期清洗定量环;(2)定期清洗进样管路(注:蒸馏水可以快速溶解残留在进样器里的盐);(3)一定要使用专用进样针(非专用进样针可能会密封性能不好,导致进样体积有误);(4)使用结束后,清理溢流瓶。
1.5 色谱柱[2]
(1)避免柱头污染;(2)注意样品超载;(3)避免压力冲击,减少压力波动;(4)使用前需活化色谱柱,进样前先用流动相冲洗30min;(5)尽量少用强容器冲洗色谱柱;(6)最好使用柱温箱;(7)注意流动相的pH值;(8)使用结束后需冲洗柱子30min,最后尽量用有机溶剂(乙腈)保留在柱内。
1.6 检测器
(1)一定要注意环境的温湿度,湿度最好小于55%RH;(2)定期检查氘灯的使用时间、样品能量和参比能量;(3)定期清洗流通池;(4)准备进样时,再打开氘灯。
2.1 打开电脑无法连接仪器,打开软件提示故障代码12025
(1)检查Buslace通信板卡是否正常工作(新机器是采用网络通信,没有通信板卡);
(2)如果通信板卡正常工作,那么检查通信电缆接头是否松脱;
(3)如果设备前两项均正常,则可以考虑重新安装软件,需要注意的是,重装软件前需将软件的注册Key收回到软盘里。
2.2 2487紫外检测器故障
2487紫外检测器故障的现象、原因及其处理方法,如表1所示。
表1 2487紫外检测器故障的现象、原因及其处理方法
2.3 1525泵故障
1525泵故障的现象、原因及其处理方法,如表2所示。
表2 1525泵故障的现象、原因及其处理方法
高效液相色谱仪是现代科学研究中广泛使用的分析仪器,掌握一些必要的维护常识,对于每一位分析工作者尤为重要。只有正确使用与维护,才能更好地驾驭,从而保障工作的顺畅,延长仪器使用寿命,创造经济价值,最大程度地发挥HPLC技术在生物医学等领域中的作用。
参考文献
[1]孙毓庆.现代色谱法及其在医药中的应用[M].北京:人民卫生出版,1998:140-141.
[2]郑伟,孙东方.高效液相色谱柱的选择、使用与维护[J].口腔护理用品工业,2011,(2):37-39.
The Use of High Performance Liquid Chromatog raph and the Trouble Shooting
WU Songliang,ZHAO Fukuan
(Institute of atom ic medicine, Jiangsu Province, Wuxi 214063)
Abstract:This paper analyzes and summarizes the liquid chromatograph in the daily us e of the proces s of matters needing attention, equipment maintenance and troubleshooting and maintenance.
Key words:high performance liquid chromatography, HPLC,Waters, fault