液－质联用测定猪肉中兽药残留

张爽(芜湖职业技术学院　生物工程学院，安徽　芜湖　241003)



液－质联用测定猪肉中兽药残留

张爽
(芜湖职业技术学院生物工程学院，安徽芜湖241003)

摘要:目的:调研安徽省皖南各区域的猪肉兽药残留情况。方法:采用液－质联用法，对安徽省皖南地区18个县市区54个农贸市场，随机采集的162份鲜猪肉样本，进行了兽药残留的检测。结果:猪肉样本中所测的4种磺胺类、4种β－受体激动剂类、3种四环素类、3种硝基咪唑类、3种激素类药物以及氟苯尼考胺类药物残留含量，均低于国家食品标准规定的最低限定值。结论:安徽省皖南地区生猪兽药残留控制上取得了良好效果。

关键词:液－质联用;猪肉;兽药残留

随着社会快速发展，人民生活水平提高，肉、禽、蛋、乳等动物性食品在国民膳食结构中所占比重普遍增加，尤其在肉类食用上。而猪肉则是人们较常食用的肉类食品［1］，在“瘦肉精”事件爆出之后，食品安全问题，尤其是肉类的安全问题则引起了全社会的广泛关注。对于猪肉中兽药成分的残留则受到了越来越多消费者的关注。

为了提高动物成长速度，或者在销售、屠宰前为减轻动物本身的疾病症状，动物饲养单位经常使用多种兽药［2］，这些药物制剂在动物体内因不发生消解而残留，最后通过食物链进入人体，产生兽药残留。如果长期食用含有兽药残留的肉类，会对人类健康产生很大的危害，轻者产生中毒、过敏现象，重则发生致畸、致癌、致突变等事件［3］。

近年来，随着猪肉食用量及兽药种类的剧增，兽药残留问题已成为普遍关注的社会热点问题。因此，及时检测肉类产品中的兽药残留量是重中之重。目前，液－质联用技术进行肉类兽药残留检测量的测定已经较为成熟［4］。现在养殖场广泛使用的药物包括磺胺类、大环内酯类、氨基糖苷类、β－受体激动剂、氯霉素类、四环素类、多肽类、硝基咪唑类、阿维菌素类、聚醚类、激素类等。其中，磺胺类、四环素类和氟苯尼考胺等比较普遍，同时国家也明确规定β－受体激动剂、人工合成激素类、硝基咪唑类等药物严禁用于食用动物中，并且在动物源性食品中不得检出［5－6］。

本实验以鲜猪肉为样本，采用液－质联用技术进行兽药残留量测定，对安徽省皖南地区18个县市区54个农贸市场随机采集的162份鲜猪肉中4种磺胺类、4种β－受体激动剂、3种四环素类、3种硝基咪唑类、3种激素类药物以及氟苯尼考胺类药物的残留水平进行分析。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1实验仪器液相色谱－质谱联用仪(Varian 310v，美国瓦里安)，自动氮吹仪(TurboVap LV，美国mark)，高速冷冻离心机(3K－15，Sigma)，分析天平(FA2104A，上海精天)，振荡器(SA400，日本大和)，微量移液器(1～10、10～100、10～200、1～1000 μL，美国康宁)，固相萃取柱(OasisHLB (6cc/500 mgL，3cc/ 60 mgL)，美国Waters)。

1.2.2试剂甲醇(GR)，乙腈(GR)，甲酸(AR)，无水硫酸钠(AR) (阿拉丁)，微孔滤膜孔径0.2 μm(德国MEMBRANA公司)。

1.2.3材料安徽省皖南地区18个市县随机选择54个农贸市场，每个市场取三份，共采集162份鲜猪肉样本，采集后立即送往－20℃冰箱保存待测。

1.2方法

1.2.1前处理方法分析天平上称量猪肉组织10.0 g，组织粉碎后，放置于50 mL离心管中，加入20 mL的乙酸－乙腈的混合液(乙酸含量1%)，充分混合，继续加入10 g无水硫酸钠，充分震荡后离心10 min (5000转/分)，取上清液，N2吹干，用甲醇溶解残余物，混匀，继续离心后，用固相萃取柱萃取，净化，水洗后抽干，最后用10 mL甲醇溶液洗脱，N2吹干，用乙腈的水溶液定容后，用0.2 μm的滤膜过滤，后待测。

1.2.2检测方法

1.2.2.1磺胺类兽药根据农业部1025号公告－23－2008［7］方法提供的动源性食品中磺胺类药物残留检测的液相色谱－质谱联用法条件，建立4种磺胺类药物(磺胺甲氧嗪SMP，磺胺嘧啶SD，磺胺甲恶唑SMZ，磺胺噻唑ST)的检测标准曲线，然后检测样品猪肉中的4种磺胺类药物，并利用外标法根据标准曲线计算得出各种磺胺类药物的含量。

1.2.2.2β－受体激动剂根据农业部1025号公告－18－2008［8］方法提供的动物源性食品中β－受体激动剂残留检测的液相色谱－质谱联用法条件，建立4种β－受体激动剂(莱克多巴胺RTM，沙丁胺醇STL，特布他林TBL，克伦特罗CBL)的检测标准曲线，然后检测样品猪肉中的4种β－受体激动剂，并利用外标法根据标准曲线计算得出各种β－受体激动剂的含量。

四旋翼飞行器PID控制器设 计 ……………………………………………………………… 焦青松，刘 佳（49）

1.2.2.3硝基咪唑类药物结合农业部1025号公告－22－2008［9］与农业部1025号公告－2－2008［10］提供的动物源性食品中硝基咪唑类药物残留检测的液相色谱－质谱联用法条件，建立3种硝基咪唑类药物(甲硝唑MNZ，地美硝唑DMZ，洛硝哒唑RNZ)的检测标准曲线，然后检测样品猪肉中的3种硝基咪唑类药物，并利用外标法根据标准曲线计算得出各种硝基咪唑类药物的含量。

1.2.2.4四环素类药物根据农业部1025号公告－12－2008［11］提供的肉类中四环素类药物残留检测的液相色谱－质谱联用法条件，建立3种四环素类药物(四环素TC，土霉素OTC，金霉素CTC)的检测标准曲线，然后检测样品猪肉中的3种四环素类药物，并利用外标法根据标准曲线计算得出各种四环素类药物的含量。

1.2.2.5激素类药物根据农业部1031号公告－1－2008［12］提供的肉类中激素素类药物残留检测的液相色谱－质谱联用法条件，建立3种激素类药物(表睾酮ETT，丙酸睾酮TPT，孕酮PT)的检测标准曲线，然后检测样品猪肉中的3种激素类药物，并利用外标法根据标准曲线计算得出各种激素类药物的含量。

1.2.2.6氟苯尼考胺药物采用GB/T 20756－2007方法提供的动源性食品中氟苯尼考胺(FFC)药物残留检测的液相色谱－质谱联用法条件，建立氟苯尼考胺药物的检测标准曲线，然后检测样品猪肉中的氟苯尼考胺药物，并利用外标法根据标准曲线计算得出氟苯尼考胺药物的含量。

2　结果与分析

2.1磺胺类药物残留量分析

根据国家食品标准GB/T 20759－2006，凡肉类样本中磺胺类药物检测量小于最低检出限量50 μg/ kg，均视为未检出。由表1可知安徽省皖南地区所有检测样品中的磺胺类残留量均小于50 μg/kg。所以安徽省皖南地区的农贸市场的猪肉磺胺类残留符合国家标准。与此同时，广德县鲜猪肉磺胺嘧啶的含量达到了26.7 μg/kg，宁国市鲜猪肉的磺胺甲氧嗪的含量达到了25.3 μg/kg以及青阳县鲜猪肉磺胺甲恶唑含量达到了37.5 μg/kg，应该继续监控磺胺类药物残留量较高的猪肉厂。

2.2β－受体激动剂残留量分析

根据中国工信部、农业部、联合商务部以及卫生部与国家工商管理总局、国家质量监督检验检疫总局联合发布规定［13］，禁止用β－受体激动剂药物于动物食品中，由表1可知安徽省皖南地区郎溪县、绩溪县的莱克多巴胺的残留量为3.2 μg/kg和1.7 μg/kg，这属于认为加入了瘦肉精，对人体健康有害，应该加大力度监控。黟县、芜湖县的沙丁胺醇的残留含量达到0.5 μg/kg和0.3 μg/kg，含量虽然不多，但是不符合国家标准，应予以监督。其他的各个区的猪肉的β－受体激动剂药物均含量满足国家标准。

2.3氟苯尼考胺残留量分析

根据标准GB/T 20756－2006，凡肉类样本中氟苯尼考胺的检测量小于最低检出限量0.1 μg/kg均视为未检出。由表1看出除了宁国市的一份猪肉的含量超过了0.1 μg/kg，为0.12 μg/kg左右。其余所有检测样品中的氟苯尼考胺含量均小于0.1 μg/kg，满足国家标准。

表1　检测样本中磺胺类药物、β－受体激动剂及氟苯尼考胺的残留量Table 1 Residual content of sulfonamides，beta receptor agonist，florfenicol amine

2.4硝基咪唑类药物残留量分析

根据国家动物食品残留量标准，在肉类样本中检测到的咪唑类药物含量应小于10 μg/kg，视为未检出。由表2可知安徽省皖南地区所有检测样品中的咪唑类药物残留量均小于10 μg/kg，除了南陵县的咪唑类药物的残留量大于了5 μg/kg之外，其他各个区的残留量均小于5 μg/kg，均满足国家标准。

2.5四环素类药物残留量分析

根据国家食品标准GB/T 21317－2007，凡肉类样本中四环素药物检测量小于最低检出限量50 μg/kg均视为未检出。由表2知安徽省皖南地区所有检测样品中的四环素残留量均小于50 μg/kg，符合国家标准。但绩溪县、繁昌县、祁门县的四环素残留量分别为19.8 μg/kg、21.7 μg/kg、25.6 μg/kg，绩溪县的土霉素残留量为20.9 μg/kg，虽未超过国家标准，但为避免药物富集性危害，应继续监督四环素类药物残留量尽量达到最低。

2.6激素类药物残留量分析

根据国家动物食品残留量标准，在肉类样本中检测到的激素类药物含量应小于1μg/kg，视为未检出。由表2可知安徽省皖南地区各农贸市场所有检测样品中的激素类药物残留量均小于1μg/kg。所以安徽省皖南地区的农贸市场的猪肉激素类残留符合国家标准。

表2　检测样本中硝基咪唑类、四环素类、激素类药物的残留量Table 2 Residual content of nitroimidazole，tetracyclines，hormone drugs

3　结论与讨论

猪肉在中国出口肉类品中占有较大比重，但兽药残留对肉类出口贸易造成严重阻碍，影响中国经济的发展［14］。同时，多种兽药在动物体内的残留对人体健康，会造成较大损害，而猪肉是中国居民消费的主要肉食品，猪肉的消费量占总肉类消费量的70%，因此，猪肉兽药残留引起了广大人们和科研工作者的关注。而在江苏、成都、昆明［15－17］等地，都有着随机采取市场上的猪肉进入科研基地，研究各地的兽药残留情况，发现各地均有不同程度的一种或多种兽药残留。

本研究就从安徽省皖南地区18个县市区的54个农贸市场随机采集162份鲜猪肉样本进行了前处理，并且依据国家对各项兽药所规定的标准方法运用液相色谱－质谱联用技术对4种磺胺类药物，4种β－受体激动剂，3种四环素类，3种硝基咪唑类，3种激素类药物以及氟苯尼考胺类进行了检测，发现其残留含量均低于国家食品标准规定的最低限定值，说明安徽省皖南地区生猪兽药残留控制上取得了良好效果。同时结果与傅心亮［18］等对贵州省鲜猪肉样品的检测结果基本一致，说明目前国内猪肉兽药残留监测与管理取得一定成果。但是里面有若干种兽药的残留量达到了标准值的一半，如:广德县鲜猪肉磺胺嘧啶的含量达到26.7μg/kg，宁国市鲜猪肉的磺胺甲氧嗪的含量达到25.3μg/kg，青阳县鲜猪肉磺胺甲恶唑含量达到37.5μg/kg，另外繁昌县、绩溪县、祁门县的四环素的残留量分别达到了19.8μg/kg，21.7μg/kg以及25.6μg/kg，以及绩溪县的土霉素残留含量也达到了20.9μg/kg，针对此现象，应该对猪肉兽药的合理使用的控制继续监督不放松。

参考文献:

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［6］中华人民共和国农业部.农业部公告第176号禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录［EB/OL］.Http: / / www.moa.gov.cn/zwllm/tzgg/gg/201104/t20110422_1976307.htm，2011－04－22/2016－01－19.

［7］中华人民共和国国家标准.农业部1025号公告－23－2008动物源食品中磺胺类药物残留检测液相色谱－串联质谱法［S］.2008.

［8］中华人民共和国国家标准.农业部1025号公告－18－2008动物源性食品中β－受体激动剂残留检测液相色谱－串联质谱法［S］.2008.

［9］中华人民共和国国家标准.农业部1025号公告－22－2008动物源性食品中4种硝基咪唑残留检测液相色谱－串联质谱法［S］.2008.

［10］中华人民共和国国家标准.农业部1025号公告－2－2008动物性食品中甲硝唑、地美硝唑及其代谢物残留检测液相色谱－串联质谱法［S］.2008.

［11］中华人民共和国国家标准.农业部1025号公告－12－2008鸡肉、猪肉中四环素类药物残留检测液相色谱－串联质谱法［S］.2008.

［12］中华人民共和国国家标准.农业部1031号公告－1－2008动物源性食品中11种激素残留检测液相色谱－串联质谱法［S］.2008.

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(责任编辑:马世堂)

A Determination of Veterinary Drug Residues in Pork by LC－MS Method

ZHANG Shuang
(School of Biological Enginearing，Wuhu Institute of Technology，Wuhu 241003，China)

Abstract:Objective: To investigate the situation of veterinary drug residues in pork in southern area of Anhui province.Method: A determination of veterinary drug residues in pork by LC－MS method was carried out in 54 farmers market of 18 counties in southern area of Anhui Province.162 samples of fresh pork were tested for veterinary drug residues.Result: The veterinary drug residues of 4 sulfonamides，4 kinds of beta receptor agonist，3 kinds of tetracyclines，3 kinds of nitroimidazole，3 kinds of hormone drugs and florfenicol amine，are below the minimum limits of national standard.Conclusion: The control of veterinary drug residues in southern area of Anhui Province has got good effect.

Key words:LC－MS method; Pork; Veterinary Drug Residues

中图分类号:TS251.9

文献标识码:A

文章编号:1673－8772(2016) 02－0001－05

收稿日期:2016－01－20

基金项目:安徽省优秀青年人才基金重点项目(2013SQRL149ZD) ;安徽省教学改革与质量提升计划重大教学改革研究项目(2014zdjy155) ;安徽省自然科学重点项目(KJ2016A762)。

作者简介:张爽(1975－)，女，安徽省芜湖市人，硕士，副教授，食品检验高级技师，主要从事食品加工与安全研究。