沈阳市父母代鸡场禽白血病带毒情况调查分析

敖 越，车立忱，吴佳宁，刘 派，宋如斌

（辽宁省沈阳市动物疫病预防控制中心，辽宁 沈阳 110034）

沈阳市父母代鸡场禽白血病带毒情况调查分析

敖 越，车立忱，吴佳宁，刘 派，宋如斌

（辽宁省沈阳市动物疫病预防控制中心，辽宁 沈阳 110034）

为掌握沈阳市肉种鸡场禽白血病带毒感染状况，2014～2016年沈阳市动物疫病预防控制中心共对65家规模禽场进行了调查。采集不同日龄鸡群的泄殖腔棉拭子5 395份、翅静脉血液5 395份。分别进行P27抗原和ALV-J抗体的酶联免疫法（ELISA）检测。从近三年的监测结果看，J抗体平均阳性率为1 006/5 395（18.65%），感染情况较为严重。ALV-p27的平均阳性率为1 102/5 395（20.43%），带毒情况不容忽视。通过监测结果，建议种禽场管理者应重视禽白血病监测与净化。

禽白血病；肉种鸡；检测；净化

禽白血病（Avian leukosis）是由禽白血病/肉瘤病毒群中的病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的总称。是制约养禽业发展的主要禽类传染病，包括垂直传播和水平传播，其中以垂直传播为主[1]。ALV感染鸡后可以诱导机体形成多种形式的肿瘤病，并造成免疫抑制，导致鸡只免疫失败，从而引发其他动物疫病，给我国养鸡业带来了重大的经济损失[2]。目前主要通过定期对鸡群进行ALV血清学监测，采取淘汰净化的方法控制该病。为确实掌握沈阳市肉种鸡场禽白血病带毒或感染状况，2014～2016年沈阳市动物疫病预防控制中心共对65家规模禽场进行了调查，现将调查情况报告如下。

1 监测场点的选择及样品的采集

从2014年1月至2016年6月，在沈阳市所辖区县选取规模鸡场65家，每年对其存栏鸡只进行监测，采集不同日龄鸡群的泄殖腔棉拭子5 395份、翅静脉血液5 395份。对采集同一只鸡的泄殖腔棉拭子和血清，编号相对应。血清采集后于-20℃冰箱保存待检。

2 试验仪器及设备

低温高速离心机（SIGMA）；全波长彩色触摸屏酶标仪（TECAN）；恒温培养箱（LAB）；96孔全自动洗板机（TECAN）；超纯水纯化系统（MILLIPORE）；移液器（EPPENDORF）

3 监测方法

血清及泄殖腔棉拭子采用酶联免疫法（ELISA）检测。

3.1 P27抗原检测 将采集的泄殖腔棉拭子置灭菌0.01 mol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.4）中，置-20℃冻融1次，恢复室温后，剧烈震荡1 min，挤出棉签中的液体，弃棉签。液体在4～8℃，以12 000 r/min离心1 min，取上清直接进行检测。禽白血病抗原ELISA检测试剂盒购自哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心，操作方法按照试剂盒说明书进行。测定并记录各孔于450 nm的吸光值（OD450）。

3.2 ALV-J抗体检测 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中的ALV-J抗体，禽白血病病毒J亚群抗体检测试剂盒购自IDEXX公司，操作方法严格按照试剂盒说明书进行。测定并记录各孔于650 nm的吸光值（OD650）。

表1 肉种鸡群AL ELISA监测结果Table1 The broiler breeder AL ELISA monitoring results

4 监测结果与分析

4.1 肉种鸡群ALV监测结果 本次监测用近三年的时间，抽检了沈阳市所辖区县规模肉种鸡场65家，涉及到318个鸡群，抽检面宽，代表性强。监测结果（表1）表明，沈阳市肉种鸡存在ALV-J的感染，2014年ALV-J抗体阳性率281/1 741（16.14%），2015年ALV-J抗体阳性率357/1 815（19.70%），2016年ALV-J抗体阳性率368/1 839（20.01%），三年抗体平均阳性率为1 006/5 395（18.65%），每年ALV-J的感染情况有递增趋势，但幅度不大；ALV-p27的平均阳性率为1 102/5 395（20.43%），带毒情况较为严重。

4.2 ALV抗原抗体之间相关性的调查 监测结果（表2）表明，ALV感染种禽后表现的三种抗原抗体类型中：抗原阳性、抗体阴性（V+A-）的情况所占的比例较高，为951/5 395（17.63%）；抗原阴性、抗体阳性（V-A+）的情况次之，为855/5 395（15.85%）；抗原抗体均为阳性（V+A+）的所占比例最少，为151/5 395（2.80%）。另外从不同生长阶段的监测结果显示，产蛋期 ALV-J的感染（19.55%、23.76%）和带毒（21.32%、20.61%）情况较生长期（2.82%、10.15%）严重。

表2 肉种鸡ALV感染的类型及其比例Table2 The broiler breeder ALV infection type and proportion

5 分析和讨论

从近三年的监测结果看，沈阳市肉种鸡存在ALV-J的感染，J抗体平均阳性率为1 006/5 395（18.65%），感染情况较为严重。ALV-p27的平均阳性率为1 102/5 395（20.43%），带毒情况不容忽视，是主要的传染源。由于ELISA抗原检测无法区分外源性和内源性病毒，从而使得ELISA检测可能存在假阳性，应需进一步做病毒的分离鉴定。V+A-的鸡并非是由于免疫耐受而不产生抗体，或是由于内源性病毒性因素干扰而不产生外原性病毒的抗体，或是由于其他因素使其产生抗体速度较缓；V-A+的鸡已经感染了外源性的ALV。V+A-的鸡对病毒产生免疫耐受或产生的抗体滴度极低，成为主要的传染源；V+ A+的鸡体内虽然有抗体，但也同样带毒。在生产上，大多种禽场的管理者对禽白血病的重视程度不够，很少在场内开展净化工作。由于禽白血病在临床上反应出来的是肿瘤性疾病，基本没有治疗价值，淘汰率较高。通过监测结果，建议种禽场管理者重视禽白血病监测与净化的问题。

主要从三个方面着手：首先，防控禽白血病必须从源头抓起，确保从没有外源性ALV感染的育种公司购入种源，同时进行本种群净化，控制垂直传播，建立无白血病的种鸡群是防治本病的最有效的措施[3]。其次，控制水平传播，禽白血病的水平传播主要发生在孵化期间和出雏后的15 d内，控制的关键是孵化和生产两个环节。最后，控制医源性传播，严格防止使用外源性ALV污染的疫苗。

[1]Y.M.Saif.禽病学（第十二版）[M].苏敬良，高福，译.北京：中国农业出版社，2012，599-639.

[2]王洪进，张青禅，赵冬敏，等.我国近10年鸡白血病流行病学报道与研究分析[J].中国兽医学报，2011，31（2）：292-296.

[3]崔治中.种鸡场禽白血病防控和净化技术方案[J].中国家禽，2015，37（23）：1-7.

Investigation and analysis of the broiler breeder in Shenyang city of avian leukosis virus infection status

Ao Yue,Che Lichen,Wu Jianing,Liu Pai,Song Rubin
(Shenyang animal disease prevention and control center，Liaoning Shenyang 110034)

In order to master the broiler breeder in Shenyang city of avian leukosis virus infection status,a total of 65 scale poultry farms were investigated by Shenyang animal disease prevention and control center from 2014 to 2016.We collected different day old chickens cloacal swab 5 395 copies,5 395 copies of the wing vein blood.The enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)was used to detect the P27 antigen and ALV-J antibody respectively.From nearly three years of monitoring results,the average positive rate of J antibody was 1 006/5 395(18.65%), andtheinfection wasmoreserious.TheaveragepositiverateofALV-p27was1102/5 395 (20.43%),which can not be ignored.Through our monitoring results,suggestions for poultry farm managers should pay attention to monitoring and purification of avian leukosis.

Avian leukemia;Broiler breeder;Detection;Purification

S858.31

：A

：1672-9692(2016)09-0038-03

2016-07-28

敖越（1972-），女，本科，高级兽医师，主要从事动物疫病检测与防控工作。