修正液对小鼠肝细胞的影响研究

胡师华,侯萌,郑英平,江艳湖南省长沙市长沙医学院



修正液对小鼠肝细胞的影响研究

胡师华,侯萌,郑英平,江艳
湖南省长沙市长沙医学院

摘要：目的：观察修正液对小鼠肝细胞的影响。方法：建立修正液对小鼠肝脏损害的模型，分为对照组和修正液组，检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶，并于实验结束取肝标本观察肝组织病理学变化。结果：实验显示出修正液组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶活力升高，可引起小鼠肝细胞形态学上的改变。结论：修正液对小鼠有一定肝脏毒性。

关键词：修正液；肝细胞；谷丙转氨酶；呼吸吸入

修正液作为一种廉价的实用文具，被广泛应用于学生学习和文职工作中。根据调查显示，在部分大中城市的中小学生中，使用修正类产品人数比例平均达到50％以上，有些学校甚至达85％以上。由于市面上修正液多含有有毒有机溶剂，主要集中体现在有机溶剂中有害物质——苯和氯代烃含量严重超标，氯代烃具有很强致癌性,特别对人体的肝脏损害很大，苯挥发性强[1]，损害消化系统，对于直接或者间接接触者都会产生影响[1-2]。本研究制作了小鼠吸入修正液挥发性气体的模型，探讨了效应－剂量的关系，观察肝细胞的形态学变化及损伤的特征，探讨修正液对肝细胞的影响，可以为更好的防治因长期使用修正液导致损害机体的影响提供防治依据。

1、材料和方法

1.1、实验材料实验用品：为网络渠道销售的修正液。

1.2、动物和分组

1.2.1、动物：昆明种小鼠40只，雌雄各半，体重25～30g，由长沙医学院实验动物中心提供。

1.2.2、分组小鼠置于自然通风有稳定的人工照明,温度维持在（20±2）℃室内。自由进食和饮水,按性别随机分为30min/d雄组、30min/d雌组、15min/d雄组、15min/d雌组、空白对照组共五组，每组8只。

1.3、动物模型制作模拟修正液环境取一40m×20cm×30cm的无盖塑料盒，2/3盒顶覆盖扎洞塑料膜，在距盒顶5cm处设置一铁丝隔栏，隔栏上放置一玻璃皿，总共倒入10ml修正液，循环使用，每五天更换一次新修正液。在盒子侧壁各开四个直径1cm的小孔，使空气对流，造成一个具有修正液气味的环境。空白对照组：给予正常的条件饲养。30min/d雄组、30min/d雌组：放入5ml的等量修正液，让其自然挥发。每天放入环境中30min。15min/d雄组、15min/d雌组：放入5ml的等量修正液，让其自然挥发。每天放入环境中15min。每天一次，连续40天。

1.4、测定血清丙氨酸氨基转移酶活力造模完成后，停止修正液吸入30天。12小时内不喂食，空腹小鼠尾静脉采血，3000rpm离心10min，用改良的赖氏法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)。

1.5组织形态学观察对所取的肝脏组织进行常规石蜡包埋、切片、HE染色，用光学显微镜在10×10和10×40下进行观察。

2、结果

2.1、各组吸入修正液小鼠血清丙氨酸氨基转移酶活力(表1)由表1可见，修正液吸入组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶活力高于空白对照组，30min/d两组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶活力高于15min/d两组。

表1　各组吸入修正液小鼠血清丙氨酸氨基转移酶活力(±s,n= 3)

表1　各组吸入修正液小鼠血清丙氨酸氨基转移酶活力(±s,n= 3)

组别　n　ALT（U/L）对照组　3　34.67±2.52 15min/d雄组　3　68.66±4.51 15min/d雌组　3　69.00±12.29 30min/d雄组　3　137.33±4.73 30min/d雌组　3　114.67±9.50

2.2、肝组织形态学变化光镜结果显示：空白对照组肝脏未见明显病变。15min/d两组部分肝小叶周边的肝细胞胞浆疏松化，30min/d两组结构被破坏较15min/d两组严重，肝细胞轮廓均可见。15min/d雄、30min/d雄组正常肝小叶结构被破坏，但无明显差异(图2)。15min/d雌组肝细胞索结构尚存，30min/d雌组肝索结构消失，肝窦间隙狭窄，肝细胞排列紊乱，有变性、坏死的肝细胞(图3)。

图2.光镜观察小鼠肝组织病理形态学（HE×100）

图3.光镜观察小鼠肝组织病理形态学（HE×400）

3、讨论

本实验表明，修正液对小鼠的肝细胞具有损害作用,小鼠与修正液接触时间越长，肝细胞损伤越严重，说明与接触时间成正相关性。。中国消协对市场上常见的修正液的成分检验结果显示：19

种市场上常见的修正液都不同程度地含有苯、甲苯、二甲苯和几种气态卤代烃[3]。对市场上的样品分析，伤害将来源于修正液中超量的甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯和邻二甲苯，而且由于目前对于修正液中二甲苯化合物未加以控制，对于长期使用的青少年的伤害尤为严重。刘峻等检测结果表明修正液中甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯和邻二甲苯风险指数大于1，会对青少年的健康风险产生影响[4]。带香文具是小学生的最爱，它是加芳香烃一类具有挥发性的有机化合物，不仅影响人体的消化系统还会危害神经系统，严重时可损伤神经系统和消化系统，出现变态反应等[5]。由于作为修正液消费主力的青少年处于发育阶段，长期使用修正液不当使得接触和吸入量过多问题应引起重视。

修正液产品的质量、合格率和产业发展存在问题，修正液产品的成分检测和发展优化需要靠广大企业和相关部门共同努力[2]。使用者仍需注意规范修正液等香味文具的使用。

参考文献：

[1]徐东群，韩克勤，张爱军，等.挥发性有机化合物的检测方法研究[J].中国环境卫生，2003，6(1-3):60-67.

[2]孙建强，周海安.修正液产品的发展与现状分析[J].文体用品与科技，2008，(10)

[3]张伟亚，王成云，李英.涂改液中卤代烃和苯系物的顶空气质联用测定法[J].环境与健康杂志，2003。20(1)：44～47.

[4]刘峻,韩陈,江艳,童永琪.修正液中苯系物风险评估及暴露评价[J].环境化学,2016,35(1):218-221

[5]龚永启，胡芳，王福群.小学生卫生情况初步调查与分析[J].实用全科医学，2007，(5)：10.

基金项目:长沙医学院2015年大学生研究性学习和创新性实验计划项目长医教[2015]15号-76。

作者简介：胡师华（1995-），女，广西柳州人，2013级临床医学本科在校生。

通讯作者：江艳（1989-），女，湖南益阳人，长沙医学院教师。