乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA临床检验分析的应用价值探讨

温小云 方先松 邱芳

乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA临床检验分析的应用价值探讨

温小云 方先松 邱芳

目的 研究乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA临床检验的结果分析，探讨其临床应用价值。方法 选取350例乙肝病毒标记物模式不同的血清作为研究标本，测定乙肝病毒DNA与前S1抗原在乙肝表面抗原阳性各种模式中的表达情况，并分析其表达相关性。结果 除HBsAg+、HBcAb+外，在乙肝表面抗原阳性的各种模式中，乙肝病毒DNA在前S1抗原阳性中的阳性表达率均明显高于其在前S1抗原阴性中的阳性表达率，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 HBV-DNA与前S1抗原在乙肝表面抗原阳性各种模式中的表达具有明显的相关性，前S1抗原的阳性表达情况可以准确地提示HBV-DNA在乙肝患者中的复制情况，值得临床检验推广应用。

乙肝病毒标记物；血清标本；乙肝病毒DNA；临床检验分析

乙型肝炎在我国的发病率逐年升高，严重影响人群健康，乙型肝炎的传统诊断主要采用乙型肝炎病毒的标志物：乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝核心抗体的检测[1]。由于抗原变异、检测方法、灵敏度等因素的影响，传统的诊断方法无法判断携带者并确诊[2]。因此结合HBV-DNA的复制情况进行综合诊断，对于减少误诊漏诊具有十分重要的意义[3]。测定HBV-DNA水平的荧光定量PCR技术要求高、昂贵，近年来乙肝表面前S1抗原反映HBV-DNA复制情况的研究逐渐深入[4]，本研究选取350例乙型肝炎病毒标记物模式不同的血清作为研究标本，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 标本选取了2014年6月～2015年6月赣南医学院第一附属医院门诊及体检收集的350例乙型肝炎病毒标记物模式不同的血清标本，其中男162例，女188例，平均年龄（37.78±2.37）岁。所有患者均无严重的心血管疾病、肾病、糖尿病等疾病。

1.2 仪器与方法 酶标仪为奥地利产安图（anthos）2010、洗板机为奥地利产安图(anthos)fluido、PCR扩增仪为

ABI7300，HBV-M检测试剂盒购自英科新创（厦门）科技有限公司，PreS1抗原检测试剂盒购自上海复星长征医学科学有限公司，HBV-DNA检测试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司。采集患者的血液标本后立即进行血清的分离，无法及时检测的标本置于－20℃的条件下保存。采用酶联免疫吸附试验法对乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝核心抗体、前S1抗原进行检测；采用荧光定量PCR法对乙肝病毒

DNA进行检测，检测水平低于1×102拷贝数/mL时为乙型肝炎病毒阴性，否则为阳性。比较乙型肝炎病毒DNA与前S1抗原在乙肝表面抗原各种模式中的表达情况并分析其相关性。

1.3 统计学方法 采用SPSS16.0统计学软件对实验过程中采集得到的数据进行统计学处理，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验；P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

HBV-DNA与前S1抗原在乙肝表面抗原阳性各种模式中的表达及相关性分析，除HBsAg+、HBcAb+外，在乙肝表面抗原阳性的各种模式中，乙肝病毒DNA在前S1抗原阳性中的阳性表达率均明显高于其在前S1抗原阴性中的阳性表达率，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 HBV-DNA与前S1抗原抗原在乙肝表面抗原阳性各种模式中的表达及相关性

3 讨论

乙型肝炎是备受关注的全球卫生问题，我国是乙型肝炎大国，近年来的发病率逐年升高，严重影响患者的生命健康。乙型肝炎病毒是一种DNA病毒，可以通过血液、性接触、呼吸道等多种途径传播，对人群健康产生极大的威胁，因此乙型肝炎的临床诊断与治疗十分重要[5]。

乙型肝炎病毒的表面标记物（即乙肝5项）的检测诊断方法被广泛地应用，但乙肝5项只能在一定程度上判断患者有无病毒的感染及体内是否有抗体的产生，且由于抗原变异、特异性、检测试剂的灵敏度、检测方法的灵敏度等因素，使得传统的乙肝5项诊断方法无法判断患者是否为携带者，易造成漏诊或误诊，影响医疗安全[6]。荧光定量PCR法能够定量检测患者体内乙型肝炎病毒DNA的水平，可以准确地衡量乙型肝炎病毒的感染与增殖情况，但PCR法对操作者的技术要求非常高，测量仪器价格高昂等因素限制了PCR法的临床诊断应用[7]。随着研究者对于乙型肝炎病毒表面标记物研究的不断深入，近年来前S1抗原诊断方面的作用备受关注。有研究表明，前S1抗原在一定程度上能够反映乙型肝炎病毒感染与复制增殖的情况，乙型肝炎病毒的侵入及在宿主细胞内的复制与前S1蛋白之间有着密切的联系，前S1蛋白在乙型肝炎病毒的感染、增殖以及宿主产生免疫反应等方面有着非常显著的作用[8]。本实验中，在乙型肝炎表面抗原阳性的各种模式中，乙型肝炎病毒DNA在前S1抗原阳性中的阳性表达率均明显高于乙型肝炎病毒DNA在前S1抗原阴性中的阳性表达率，差异具有统计学意义（P<0.05）。这表明乙肝病毒DNA与前S1抗原在乙型肝炎表面抗原阳性各种模式中的表达具有明显的相关性，前S1抗原的阳性表达情况可以准确地提示乙肝病毒DNA在乙型肝炎患者中的复制情况，能够很好的弥补传统诊断方法漏诊与误诊方面的不足，且测定成本较低、操作简单，比荧光定量PCR法直接测定DNA含量有更实际的推广性。

综上所述，传统的诊断方法乙型肝炎5项易造成漏诊误诊，而前S1抗原的阳性表达情况可以准确地提示HBV-DNA在乙肝患者中的复制情况，有效避免漏诊误诊、成本低、方法简单，值得临床检验分析上推广应用。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.3.040

江西 341000 赣南医学院第一附属医院输血科 （温小云 邱芳）赣南医学院第一附属医院检验科 （方先松）