凌励 李海云
类抗-Ce自身抗体引起配血不合鉴定及输血分析
凌励 李海云
目的 对1例临床自身免疫性溶血性贫血患者标本血清抗体进行鉴定,做出准确的输血指导,保障临床输血有效。方法 采用血型血清学进行ABO血型正反定型试验,直接抗人球蛋白试验,间接抗人球蛋白试验,抗体鉴定试验,吸收放散试验,最后进行交叉配血。结果 在患者血清中发现自身类抗-Ce抗体,并成功进行配合性输血。结论 对于临床疑难标本,应该认真分析,查找原因,最后实现配合性输血,提高临床用血安全。
抗-Ce;自身抗体;交叉配血
患者,女,74岁,汉族,自身免疫性溶血性贫血,输血6次;妊娠史3次,流产1次,存活子女1个;药物史,无;总胆红素:105 mmol/L,血小板计数220×1012/L,血红蛋白:41 g/L.抗体筛查阳性,存在不规则抗体,进一步检测确认患者血清及放散液中检出类抗-Ce类同种特异性自身抗体。现报道如下。
KA-2200型离心机(日本久保田)、FYQ型免疫微柱孵育器(长春博研)、数字显示式恒温水浴箱(上海一恒)、TD-3 A型血型血清学用离心机(长春博研)、Baso 2005-1离心机(台湾贝索)。红细胞试剂(北京金豪);IgM型抗-D血清、IgG型抗-D血清、标准抗-A、抗-B血清、抗人球蛋白、抗-IgG、抗-C 3d、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗人球蛋白试剂、筛选细胞、国产谱细胞(上海血液生物医药有限责任公司);进口谱细胞由Sanquin供;RH血型分型卡、抗人球蛋白卡(长春博迅);生理盐水(河南华利制药公司);AB血浆(本实验室自制)。所有试剂均在有效期内使用。血型定型法、抗体筛选与鉴定、吸收放散试验等按文献[1-2]方法操作。
2.1 红细胞血型 ABO血型为B,Rh血型为CCDee。
2.2 直抗试验 多抗3+s,单抗IgG 3+s,单抗C 3阴性。
2.3 不规则抗体鉴定 患者血清与谱细胞进行检测,结果显示为盐水全阴性,继续做lissIAT,各试验结果见表1,同时患者血清进行进口凝胶卡试验,见表2。
2.4 患者红细胞放散试验 患者红细胞洗涤3次后,与等量生理盐水和2倍乙醚放散。放散液与国产谱细胞进行经典IAT法检测。见表1。
2.5 交叉配血试验 患者与B型ccDEE献血者进行交叉配血盐水介质中无凝集无溶血,聚凝胺和抗球蛋白介质中均由弱凝集无溶血现象。
2.6 患者血清与B型ccDEE献血者红细胞进行吸收放散试验 B型ccDEE献血者红细胞1 mL加入3倍患者血清,放入37℃ 30 min进行吸收,然后立即3 400转离心1 min,分离出血清(标记为“吸收后血清”),余下红细胞用生理盐水进行3洗,之后加入等量生理盐水和2倍乙醚放散。将此放散液及吸收后血清分别与进口谱细胞中1、3、4、6号进行经典IAT检测,在患者血清中检出抗-Ec、抗-Ec类同种自身抗体,在放散液中检出抗-Ec同种特异性自身抗体。证明患者血清中含有特异性及类特异性抗-Ec自身抗体。见表2。
表1 患者血清、患者红细胞放散液与国产谱细胞反应结果
表2 患者血清、患者被吸收后血清、献血者红细胞放散液与进口谱细胞反应
2.7 交叉配血 选择ccDEE型献血者血液标本进行交叉配血,结果为主侧1+的弱凝集,无溶血。可以为患者紧急情况下,挽救生命之用血。
患者红细胞血型为B型RhD阳性,不规则抗体鉴定结果显示患者血清中含有不规则抗体,血液交叉配血试验盐水介质法主侧、次侧均无凝集溶血,凝聚胺介质法主侧、次侧均凝集。经进一步检测发现Rh表现型为CCDee,血清和放散液中均检出血型抗体,并具有抗-Ce特异性。由于抗体特异性和自身血型结果相矛盾,患者又无近期输血史,因此考虑该抗体可能为类同种特异性自身抗体。使用“dccEE”型抗原的红细胞对血清中的抗体做吸收放散,发现该抗体可以被缺乏“Ce”抗原的红细胞所吸收并放散,所以证实该抗体为类抗Ce特异性自身抗体。根据文献资料[3]显示,Rh血型系统是至目前为止红细胞血型系统最为复杂的血型系统,它包括从RH 1-RH 53总共46个抗原,C、c、D、E、e是其中最为重要的抗原,抗C常与抗e共存于同一血清内[4]。抗-Ce在一般人群中少见,为IgG抗体,在抗球蛋白介质、酶介质与聚凝胺介质中起反应。倘若体内抗-Ce阳性患者输注携带Ce抗原全血或成分血可导致严重的溶血性输血反应。因此,应引起高度重视。在临床输血过程中,倘若患者体内含有抗Ce,应该给予输注Ce抗原阴性全血或/和成分血。结合患者血清中检出抗-Ce自身抗体,且抗球蛋白试验阳性,追问患者此前有一次输血史、无贫血史及免疫性疾病史,推测引起该患者贫血的原因可能是由于抗Ce自身抗体破坏红细胞导致溶血造成的,即自身免疫性溶血性贫血(温抗体型)。临床上根据是否有明确的发病原因将自身免疫性溶血性贫血分为原发性自身免疫性溶血和继发性自身免疫性溶血,后者多继发于淋巴系统恶性疾病、结缔组织性疾病、细菌病毒。Ce复合抗原的识别,为抗C在与dCE编码的产物反应时与DCe和dCe编码的产物反应不同提供了解释。最原始的抗Ce是从一位经免疫的妇女血清中发现的,其表型为DccEE,其中的抗e可被Dce或dccee的细胞吸收。在RHD阳性个体中,大部分经免疫产生的抗C是抗Ce,而抗C和抗Ce血清中一般都含有抗Ce。抗Ce能引起新生儿溶血病,并需换血治疗。同时它可引起你溶血性输血反应。其他还有一些在临床上具有意义的抗Ce,但常被鉴定为抗C。有一位DCCee妇女产生的抗Ce是IgA型的,该抗体造成了自身溶血性贫血[5-7]。
总之,本研究认为受血者(患者)抗体筛查必须作为常规检验,以便于不规则抗体的检出。对于抗体筛查阳性的患者,应详细了解病史,同时进行抗体鉴定,用多种介质加以验证,分析不规则抗体产生的原因。及时与经治医师沟通,确保临床输血安全性与有效性。
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[2] 中华人民共和国医政司.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:246-270.
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[6] 金伯泉,熊思东,于永利,等.医学免疫学[M].北京:北京人民卫生出版社,2008:182-183.
[7] 王兰兰,吴健民,胡洪亮,等,常见的自身免疫性疾病[A]//临床免疫学与检验[M].北京:人民卫生出版社,2010:326-327.
Objective To identify the serum antibody in a case of autoimmune hemolytic anemia, and to make a correct guidance for the transfusion of blood transfusion. Methods The blood group serology of ABO blood group typing test, direct antiglobulin test, indirect anti human globulin test, antibody test, absorption elution test. Finally, cross matching of blood. Results Anti-Ce antibodies were found in the serum of patients, and with the success of the matching of blood transfusion. Conclusion For clinical dif f cult samples, it should be carefully analyzed to f nd out the reasons, and f nally to achieve the cooperation of blood transfusion, improve the clinical use of blood safety.
Anti Ce; Antibody cross; Matching blood
10.3969/j.issn.1009-4393.2016.35.022
河南 473000 河南省南阳市中心血站 (凌励 李海云)