细胞蜡块在恶性浆膜腔积液中的应用*

陕西省肿瘤医院病理科(西安710068)

丁彩霞　黄颖楠　张　娟　陆建荣　孙瑞芳△



细胞蜡块在恶性浆膜腔积液中的应用*

陕西省肿瘤医院病理科(西安710068)

丁彩霞黄颖楠张娟陆建荣孙瑞芳△

摘要目的：探讨细胞蜡块及免疫组化方法在浆膜腔积液诊断中的作用。方法：收集334例浆膜腔积液标本，制作液基细胞学及细胞蜡块，HE及免疫组化染色。结果：CR，Vim，CK5/6及D2-40在间皮瘤中有重要价值，CK7，CK20，Villin，TTF-1，NapsinA，CDX-2，MUC-2，CA125，ER，PR，GCDFP-15及mammaglobin在判断肿瘤来源有特异性作用。结论：细胞蜡块在恶性浆膜腔积液诊断中有重要价值，值得推广。

主题词@浆膜腔积液 @细胞蜡块细胞诊断学

浆膜腔积液多见于转移性肿瘤，常规细胞学涂片在鉴别增生的间皮细胞、间皮瘤、恶性肿瘤及判断肿瘤来源有时存在非常大的困难，细胞蜡块提供了个新思路。

资料与方法

1一般资料陕西省肿瘤医院病理科2013～2014年间门诊及住院病人浆膜腔积液334例，男性159例，女性175例，中位年龄65岁。

2方法

2.1液基细胞学制作：标本沉淀30min取下部液体50～100ml倒入尖底离心管，离心5min，弃上清，吸出沉淀物。量少可反复多次离心。血性标本提取中间层细胞，转移到小离心管，加细胞保存液，震荡离心弃上清，上机。

2.2细胞块制备:95%酒精固定，静置30min，离心弃上清，加中性缓冲福尔马林，收集细胞沉淀，常规取材制片。

2.3HE染色

2.4免疫组化染色:EnVision两步法，抗体购自福州迈新公司。

结果

1HE诊断腺癌187例，小细胞癌15例，鳞状细胞癌20例，间皮瘤7例，活检与细胞学符合率99.1%。

2免疫组化结果

2.1腺癌细胞主要表达:CK7及低分子量角蛋白(CKL)，CR,Vim，CK5/6有低表达率，鳞状细胞癌主要表达P63,CK14,小细胞癌主要表达Syn,CD56，特异性标记物CgA阳性率不高。恶性间皮瘤及间皮细胞主要表达CR,Vim,CK5/6,D2-40，但CKpan,CKH,CKL也有低阳性率,见表1。

表1　 恶性肿瘤免疫组化表达百分比

2. 2腺癌细胞来源主要来自于肺、胃肠道、卵巢及乳腺:结果见表2。

表2　不同组织来源各免疫组化表达百分比

讨论

恶性浆膜腔积液中腺癌最多见，其次为小细胞癌、鳞状细胞癌、淋巴瘤等。腺癌细胞形态学上分为小细胞腺样型、球形、乳头状、梁状型、透明细胞型及单个肿瘤细胞散在分布等。细胞核显著增大，约为间皮细胞4～5倍，核深染，可见奇异型核，核仁大，核膜清晰，病理性核分裂常见，核浆比倒置，胞质内常见空泡，细胞排列成团、三维立体结构或桑椹样结构明显是腺癌的显著特征[1]。腺癌细胞的特征在上皮样间皮瘤中也可见到，二者鉴别很困难[2]。此时制作细胞蜡块行免疫组化检测是重要手段[3]。

细胞蜡块制作的切片背景清晰，形态与组织学相似。免疫组化标记时定位准确，与液基制片结果互相对照，诊断证据更加充分。

以转移灶浆膜腔积液就诊的病人，制作细胞蜡块给病人提供了很大的帮助。常见来源于肺、乳腺、卵巢、食管、胃肠道及间皮等[4]。CK7,TTF-1,NapsinA,CR,Vimentin,CK5/6,D2-40是常使用的抗体组。CK7,TTF-1,NapsinA通常会在肺腺癌中表达，而间皮细胞通常表达CR,Vimentin,CK5/6,D2-40。胃肠道来源腺癌中常使用CK7,CK20,Villin,CDX-2,MUC-2等一组抗体，卵巢原发粘液性腺癌中CK7,ER,PR等有指导意义，在浆液性腺癌中CA125,ER,PR,P53联合应用有价值，乳腺癌中则常选择CK7,GCDFP-15,ER,PR,Mammaglobin等[5，6]。

细胞蜡块HE切片和免疫组化结果明显优于常规细胞涂片[4]，后者细胞层数多，面积大，抗体不易匀称加入，判读困难。细胞蜡块可永久保存，基因检测及后续其它检测均能正常进行，病人免于活检的痛苦，是一项值得推广的项目。

参考文献

[1]Huang CC.Cytomorphological features of metastatic squamous cell carcinoma in serous effusions[J]. Cytopathology，2014,25(2):112.

[2]Franceschini MC.Mesothelin in serum and pleural effusion in the diagnosis of malignant pleural mesothelioma with non-positive cytology[J]. Anticancer Res，2014,34(12):7425.

[3]Ugurluoglu C.Importance of the cell block technique in diagnosing patients with non-small cell carcinoma accompanied by pleural effusion[J]. Asian Pac J Cancer Prev，2015,16(7):3057-60.

[4]Köksal D.The cell block method increases the diagnostic yield in exudative pleural effusions accompanying lung cancer[J]. Turk Patoloji Derg,2013,29(3):165-70.

[5]Bhanvadia.Analysis of diagnostic value of cytological smear method versus cell block method in body fluid cytology:study of 150 cases[J]. Ethiop J Health Sci,2014,24(2):125.

[6]Ghosh I.Cell block cytology in pleural effusion[J]. J Indian Med Assoc,2012,110(6):390-396.

(收稿：2015-11-20)

Effusion of cell wax block application in malignant serous cavity

Department of Pathology, Shaanxi Provincial Tumor Hospital(Xi’an 710068)

Ding CaixiaHuang YingnanZhang Juan et al

ABSTRACTObjective:To investigate the role in the diagnosis in serous effusion by cell block.Methods:we collected 334 cases samples and made liquid based cytology and cell block,HE staining and immunohistochemical detection was carried out.Results:CR,Vim,CK5/6 and D2-40 have great value in mesothelioma. Combined CK20,Villin,TTF-1,CDX-2,MUC-2,CA125,ER,CK7,NapsinA,ER,PR,GC-DFP-15 and mammaglobin to judge the origin of carcinoma.Conclusion:The cell block is important for the diagnosis of malignant serous cavity effusion.

KEY WORDS@Dropsy of serous cavity@Cell wax blockCytodiagnosis

通讯作者:△西安交通大学基础医学院病理学系

【中图分类号】R446

【文献标识码】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.04.001

·论著·基础研究·

*中国博士后科学基金资助项目(2014M552461)