葛阳春
(阿克苏地区库车县兽医站,新疆阿克苏 842000)
库车县鸡禽流感抗体水平调查报告
葛阳春
(阿克苏地区库车县兽医站,新疆阿克苏 842000)
[摘 要]为落实库车县鸡禽流感疫病防控工作,评价鸡禽流感免疫效果,对库车县13个乡镇、3个农牧场的鸡进行了随机取样,并分离血清,采用血凝抑制的方法对489份血清样品进行检测。结果显示塔里木乡和草湖农场的抗体水平高,而二八台抗体水平较低,此外阿拉哈格镇、哈尼喀塔木乡、阿克吾斯塘抗体合格率均低于70%,此结果为加强鸡禽流感的预防和进一步补免提供了依据。
[关键词]鸡禽流感血清血凝抑制
禽流感病毒可通过消化道和呼吸道进入人体传染给人,人类直接接触受禽流感病毒感染的家禽及其粪便或直接接触禽流感病毒也可以被感染。通过飞沫及接触呼吸道分泌物也是传播途径。如果直接接触带有相当数量病毒的物品,如家禽的粪便、羽毛、呼吸道分泌物、血液等,也可经过眼结膜和破损皮肤引起感染[1]。
患鸡精神沉郁,饲料消耗量减少,消瘦;鸡的就巢性增强,产蛋量下降;轻度直至严重的呼吸道症状包括咳嗽、打喷嚏和大量流泪;头部和脸部水肿,神经紊乱和腹泻。上述症状可能单独或组合形式出现,有时疾病暴发很迅速,在没有明显症状出现患鸡死亡。
禽流感的病理变化因感染毒株毒力的强弱、病程长短和禽种的不同而变化不一[2]。主要表现为头肿,肉髯、冠出血,小腿和趾部皮下出血,腺胃乳头出血及输卵管炎等。
本实验通过对库车县13个乡镇、3个农牧场的鸡进行采血并分离血清进行抗体检测,进而判断在不同的乡镇鸡禽流感抗体水平的高低,为进一步推进禽流感防控工作提供了一定的科学依据。
3.1仪器设备
微量振荡器、移液枪(多道)、移液枪(单道)、枪头、血凝版。
3.2试剂
禽流感病毒H5亚型HI试验抗原(兽用)、1×PBS、阿氏液。
4.11%红细胞悬液的制备
采集至少3只SPF健康公鸡的血液与等体积阿氏液混合,用1×PBS液洗涤3次,每次均以1800r/min离心10min,洗涤后用1×PBS液配成体积分数为1%红细胞悬液,4℃保存备用。
4.2HI实验步骤
(1)血凝板中第1~11孔加入25μLPBS,第十二孔加入50μLPBS;
(2)第1孔加入25μL待检血清,在血凝板上将血清做横向25μL的倍比稀释至第10孔;
(3)第1~1 1孔均加入2 5 μ L的稀释抗原,室温下(20~25℃)静置30min或2~8℃45~60min;
(4)每孔中加入25μL1%红细胞悬液,使用微量振荡器混匀后,室温下(20~25℃)静置30min或2~8℃45~60min,当对照孔红细胞呈显著泪滴状时判定结果。
各乡镇血清经过HI试验检测后,血清抗体合格率和免疫密度比较结果如下表所示。
由图1可以看出塔里木乡和草湖农场的抗体水平高,抗体合格率和免疫密度均达到了100%,而二八台抗体合格率为42.86%,免疫密度57.14%,抗体水平较低,此外阿拉哈格镇、哈尼喀塔木乡、阿克吾斯塘抗体合格率均低于70%,此结果为加强鸡禽流感的预防和进一步补免提供了依据。
图1 各乡镇血清抗体合格率和免疫密度比较
6.1禽流感疫苗的选择
在选择禽流感疫苗时,最好要了解当地或本场受禽流感威胁的是哪一种亚型,然后选择相同亚型的疫苗进行免疫接种[3]。在环境较复杂或不了解的情况下,可选择H5+H9或其他必要亚型的二价或多价灭活疫苗,但是在实际应用中,为了减少免疫接种的次数,适当地使用一些多联疫苗还是可取的。但也不能太多联,应保证重点。原则上,禽流感疫苗最好单独接种,因为它本身可能已是多价的疫苗,如再与其他疫苗组联,可能会影响免疫效果。但对雏禽免疫接种,因接种量较小,可以考虑使用新城疫与禽流感H5+H9疫苗的联苗;对较大日龄以后的其他时间的免疫接种,禽流感疫苗还是单独接种为妥。
6.2禽流感接种时间和接种量
禽流感疫苗接种时间的安排与家禽饲养期长短有一定的关系。饲养期不超过7周的,由于接种疫苗后需要14~20d才能产生较好的保护作用,而雏禽由于免疫系统发育尚未成熟,接种疫苗诱导形成的保护作用较弱。因此,这些饲养期很短的家禽,接种疫苗的作用是有限的,如通过环境卫生的控制可以不接种的则不一定要接种。但如确实需要,可在10日龄左右接种一次。对于饲养期较长的家禽,为使禽群内的抗体水平较高和较均匀,在第一次免疫接种后,每隔2~3个月再接种一次较为合适。接种量方面,20日龄以内雏鸡接种量为成鸡的50%左右,一般为0.25~0.3ml,往后每次接种0.5ml(指非浓缩抗原),成鹅接种量一般为鸡的2~3倍,成鸭接种量一般为鸡的2倍。
参考文献
[1] 林曦.家畜病理学[M].中国农业出版社,1979.
[2] 陈伯伦.禽流感的研究—鸡A型禽流感病毒的分离与血清学初步诊断[J].中国兽医杂志,1994,20(10):3-5.
[3] 何维明,高玉鹏,蒋艳芬等.禽流感流行病学调查及病原分离鉴定初报[J].西北农业学报,2001,10(3):16-19.