体液细胞计数自动化检测影响因素的研究

滕士阶，周　彦△，徐承来，刘小林，贾　嵘，夏正萍，王　琨

(连云港市第二人民医院：1.检验科；2.呼吸内科，江苏连云港 222023)



体液细胞计数自动化检测影响因素的研究

滕士阶1，周彦1△，徐承来1，刘小林1，贾嵘2，夏正萍1，王琨1

(连云港市第二人民医院：1.检验科；2.呼吸内科，江苏连云港 222023)

摘要:目的研究体液标本采集后不同的因素对检测结果的影响。方法比较同一体液标本采集后是否使用抗凝剂、抗凝剂种类的选择、样本采集后的保存温度、放置不同时间后结果的稳定性，对结果进行分析，得出不同因素对检测结果的影响。结果脑脊液标本是否选用抗凝剂对结果无明显不同；胸腹腔积液采用EDTA-K2抗凝，所有的检测项目结果都比较稳定，而未使用抗凝剂和使用肝素锂抗凝的标本保存2 h后有核细胞计数结果降低，特别是单个核细胞计数值明显降低；体液标本分别在室温、4 ℃中保存1 h后，数据开始有变动，单个核细胞计数值有减少的趋势，红细胞计数不论在室温还是4 ℃保存结果都很稳定。结论排除上述影响因素的干扰，体液常规检查自动化可为临床提供快速、可靠的数据。

关键词:诊断仪器和设备；体液常规检查；抗凝剂；保存温度；保存时间

胸腹腔积液、脑脊液等体液标本在进行常规检查时存在速度慢、重复性差、缺乏生物安全保护等缺点，之前有过关于用尿沉渣分析仪和血细胞分析仪进行体液细胞计数的报道[1-2]，现阶段出现了具有专门针对体液细胞计数、分类功能的血细胞分析仪，实现了体液细胞计数、分类的自动化和标准化。本文将进一步了解体液样本采集有无使用抗凝剂、抗凝剂种类的选择、样本采集后的保存温度、放置不同时间结果的稳定性等方面因素对检测结果的影响，从而将各影响因素降到最低，为临床诊疗工作提供可靠数据[3]。

1材料与方法

1.1仪器Sysmex XT-4000i全自动血细胞分析仪(以下简称XT-4000i，日本希森美康株式会社)；真空采血管(成都普什医药塑料包装有限公司)；三洋冰箱(日本原装)。

1.2试剂XT-4000i所用试剂均由日本希森美康株式会社提供。稀释液(EPK)批号为G0530，嗜碱细胞溶血剂(FB)批号为R0025，白细胞分类溶血剂(FFD)批号为R0034，血红蛋白溶血剂(SLS)批号为A0036,染色液(FFS)批号为A0008，均为原装配套试剂。

1.3方法

1.3.1标本采集由临床医师采集体液标本，分别注入未抗凝、EDTA-K2抗凝、肝素锂抗凝的真空管至标定刻度，立即送检。

1.3.2标本检测体液标本采集时分为未抗凝、EDTA-K2抗凝、肝素锂抗凝3管。标本采集后立即上机进行检测，记录细胞计数、分类结果，通过将3管结果的比较来发现标本有无使用抗凝剂、抗凝剂种类的选择对检测结果的影响；再将每管标本分成2份，1份于室温保存，1份4 ℃保存，分别在1、2、3、4 h上机检测，记录结果，观察同一标本在不同的保存温度、放置不同的时间后结果的稳定性。

1.4统计学处理因细胞数在正常范围内标本对本研究无意义，故选择采用直线相关和回归分析。

2结果

2.1抗凝剂的选择对检测结果的影响选取的26份脑脊液标本分为未使用抗凝剂、使用EDTA-K2抗凝、使用肝素锂抗凝3管，采集后立即上机检测，将测定的有核细胞计数、分类[单核细胞(MN)绝对值、MN百分比]及红细胞计数结果进行比较，未发现结果有明显不同，见表1；选取的50份胸腹腔积液标本经EDTA-K2抗凝保存后，所有的检测项目结果都比较稳定，而未使用抗凝剂和使用肝素锂抗凝的标本保存2 h后有核细胞计数[多核白细胞(PMN)绝对值、PMN百分比]结果降低，特别是多个核细胞计数结果明显降低，见表2。

2.2不同保存温度、不同时间对检测结果的影响无论在室温或4 ℃中保存1 h后，体液单个核细胞数及百分比有减少趋势；相对的，多个核细胞数及百分比有增高趋势。体液红细胞计数不论在室温还是4 ℃保存结果都很稳定,见表3。

表2　抗凝剂的选择对胸腹腔积液检测结果的影响(n=50)

表3　不同保存温度、不同时间对检测结果的影响

3讨论

脑脊液是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体，主要功能是保护脑和脊髓免受外力震荡损伤、调节颅内压、运送营养物质并运出代谢产物等；浆膜腔积液是胸腔积液、腹腔积液、心包腔积液和关节腔积液的总称，一般情况下，浆膜腔内仅含有少量的液体起润滑作用，病理情况下，浆膜腔内有大量的液体潴留而形成浆膜腔积液。根据产生的原因及性质不同，将浆膜腔积液分为漏出液和渗出液。

体液的细胞计数及有核细胞分类对于相关疾病的诊断和治疗有着十分重要的意义。脑脊液红细胞计数增多常见于穿刺损伤或出血性病变；有核细胞计数增多一般见于各种类型的脑膜炎；脑脊液中发现肿瘤细胞对于中枢神经系统肿瘤有确诊价值，其阳性率为15%～40%，转移性肿瘤的阳性率高于原发性肿瘤；浆膜腔积液红细胞计数对于鉴别漏出液和渗出液意义不大，但恶性肿瘤引起的积液中血性积液占50%～85%，如能排除外伤因素，浆膜腔积液红细胞计数增多最常见的原因是恶性肿瘤；有核细胞计数对于鉴别漏出液和渗出液有一定参考价值，漏出液中有核细胞数量常在100×106/L以下，渗出液中有核细胞数量常在500×106/L以上。积液中嗜酸性粒细胞增多是指嗜酸性粒细胞计数超过白细胞总数10%以上。引起胸腔积液嗜酸性粒细胞增多的最常见原因是血胸和气胸，以及寄生虫感染、过敏综合征等，引起腹腔积液嗜酸性粒细胞增多最常见的原因有慢性腹膜透析、充血性心力衰竭、血管炎、淋巴瘤等。间皮细胞在人工有核细胞分类时通常归入“单个核细胞”中，主要出现在漏出液中，增多常提示浆膜受刺激或浆膜损伤。

对于胸腹腔积液、脑脊液等体液标本来说，一直以来都是沿用人工方法进行细胞计数、分类，检测结果易受主观因素的影响，结果的准确性、重复性是不容易保证的，而且存在速度慢、重复性差、操作人员缺乏生物安全保护等缺点。多功能血液体液分析一体机实现了体液细胞计数、分类的自动化和标准化，但是仪器必须在使用前，对由仪器、试剂、校准品、质控品共同组成的检测系统进行充分和正确的应用评价[4-5]。对于XT-4000i所报告的“高荧光强度细胞”(HF-BF,即可疑幼稚细胞)不可轻易报告，应人工在显微镜下进行确认[6]。本文通过人为地设置一些影响因素来对XT-4000i在体液自动化检测方面进行评价，得出“体液标本采集后必须用EDTA-K2抗凝(脑脊液标本可不使用抗凝剂)并立即进行检验”的结论。将可能影响分析前质量保证的因素(如体液样本采集有无使用抗凝剂、抗凝剂种类的选择、样本采集后的保存温度、不同时间结果的稳定性等)降到最低[7]，XT-4000i可以准确、快速地进行体液细胞计数及分类，为临床诊疗工作提供快速、真实、可靠的数据。

参考文献

[1]章文.UF-100尿沉渣分析仪在小儿脑脊液及浆膜腔积液检查中的应用[J].国外医学临床生物化学与检验学分册,2004，25(3)：281.

[2]胡晓卫，白雯.自动化分析仪在胸腹水细胞计数及分类中的应用[J].陕西医学杂志,2009,20(7)：928-929.

[3]陈德东，陈燕，陈忠明.影响血液、体液常见临床标本分析前质量的因素及控制措施[J].福建医药杂志,2006,28(4)：99-101.

[4]魏昊，丛玉隆.医学实验室质量管理与认可指南[M].北京：中国计量出版社，2004：59-63.

[5]徐承来，张丽.CD-3500型全自动血细胞分析仪性能评价[J].蚌埠医学院学报,2011,36(11)：1257-1259.

[6]中华医学会检验分会全国血液学复检专家小组，中国检验医学杂志编辑委员会.全国血液学复检专家小组工作会议纪要暨血细胞自动计数复检标准释疑[J].中华检验医学杂志，2008，31(4)：380-382.

[7]荣爱红，余文波.影响临床检验结果的常见因素及控制方法[J].中国实验诊断学,2005,9(3)：469.

(收稿日期：2016-01-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.064

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)09-1290-03

△通讯作者,E-mail：xclzlxch@163.com。

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