槲皮素对禽流感病毒感染试验鸡的防治作用

徐文强 卢頔

摘 要 为分析槲皮素防治禽流感病毒感染试验鸡的作用，以78只60日龄试验鸡为研究对象，随机分为6组，每组13只，1组、2组、3组试验鸡给予槲皮素，4组给予盐酸金刚烷胺，5组与6组均不给药，用药24 h后，1～5组试验鸡攻毒，6组不攻毒，观察14 d内各组试验鸡禽流感发生情况及死亡情况，鸡死亡后解剖尸体，观察病理变化。结果显示，1～5组试验鸡存活率低于6组试验鸡，且1～4组试验鸡存活率高于5组，差异具有统计学意义

（P<0.05）；1～4組试验鸡存活率相近，不具有统计学意义（P>0.05）。槲皮素具有一定的防治鸡禽流感病毒感染的效果，可在养殖场中广泛的应用。

关键词 槲皮素；禽流感病毒；感染；防治

中图分类号：S858.31 文献標志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2016.29.039

禽流感属于病毒性传染病，可传染多种家禽、野禽，引发原因为感染A型流感病毒。研究指出，禽流感病毒与人类流感病毒变异之间关系密切，同时，禽流感病毒表面抗原变异不断进行，导致无法完全的交叉保护不同亚型的禽流感病毒，造成疫苗预防效果较差[1]。盐酸金刚烷胺为预防流感的有效药物，但在禽体内残留比较严重，而且可能会出现流感病毒耐药毒株，因此在家禽中并不允许使用该药物预防。槲皮素为黄酮类化合物，药理活性包含多种，毒副作用不大，临床应用价值非常高，有学者指出，槲皮素能够防治鸡禽流感病毒感染，本研究中探讨了其防治作用。

1 材料与方法

1.1 材料

试验鸡100只，购买自农业科学院畜牧研究所种鸡场，均为健康鸡，3日龄，隔离喂养，至60日龄时试验。

毒株：H5N1亚型禽流感病毒，来源于兽医学院禽病教研室。

试验药物：盐酸金刚烷胺、槲皮素Ⅰ溶液（单体纯溶液）、槲皮素Ⅱ溶液（单体纯溶液）、槲皮素复方溶液（槲皮素Ⅰ溶液的单体、槲皮素Ⅱ溶液的单体、其他助剂）。

1.2 方法

1.2.1 检测试验鸡禽流感抗体

采集试验鸡心脏血，静置，析出血清，试验时采用HI方法及AGP方法，如H5禽流感抗体为阴性，则可使用。

1.2.2 预攻毒试验

随机抽取试验鸡5只，实施禽流感病毒攻毒，剂量为0.2×10-4 mL，肌注，注射后，如试验鸡发病，表明攻毒浓度恰当。

1.2.3 给药方法

在可使用的试验鸡中随机抽取78只，分为6组，每组13只。1组试验鸡给予槲皮素Ⅰ溶液，剂量为100 mg/kg鸡体重，人工灌喂；2组试验鸡给予槲皮素Ⅱ溶液，剂量为100 mg/kg鸡体重，人工灌喂；3组试验鸡给予槲皮素复方溶液，剂量为400 mg/kg鸡体重，人工灌喂；4组试验鸡给予盐酸金刚烷胺，在饮水中投放，剂量为50 mg/kg水，自由饮用；4组试验鸡均连续用药5 d，5组与6组试验鸡均不给药。

1.2.4 攻毒方法

用药24 h后，1组、2组、3组、4组、5组试验鸡均给予攻毒，给予H5N1亚型禽流感病毒，每只剂量0.2×10-4 mL，肌肉注射；6组试验鸡不攻毒。

1.3 观察指标

攻毒后14 d内，对6组试验鸡的发病情况、死亡情况密切观察，做好记录。出现鸡死亡后，对病死鸡做出解剖，并进行病理检查、病毒分离鉴定，观察病理变化及分离结果。

1.4 统计学分析

采用SPSS18.0统计分析，数（n）和率（%）表示计数资料，利用x2检验，P<0.05表明差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 试验结果

经观察可知，1组、2组、3组、4组试验鸡死亡均出现在攻毒后5 d时，攻毒12 d后未出现鸡死亡；5组试验鸡死亡出现在攻毒后3 d，攻毒后9 d后未再出现鸡死亡；6组试验鸡未出现死亡。经比较，1～5组试验鸡存活率低于6组试验鸡，且1～4组试验鸡存活率高于5组，差异具有统计学意义（P<0.05）；1～4组试验鸡存活率相近，不存在统计学意义（P>0.05），见表1。

注：与6组相比，*P<0.05；与5组相比，#P<0.05。

2.2 病死鸡解剖检查结果

解剖后发现，黏液大量存在于试验鸡气管内；出血部位包括脑膜、黏膜、脾胃乳头、胰腺；灰白色坏死点可在胰腺上发现。经病毒分离鉴定，病死鸡的死亡原因均为禽流感感染。

3 讨论

禽流感为鸡禽常见病，可发生于春夏秋冬任何季节中，季节交替时发病率更高。禽流感多发于鸡幼仔，尤其是20～35日龄，消化道、呼吸道、脏器组织为禽流感病毒主要的存在位置，通过呼吸等途径，可传染给健康鸡，造成大范围的爆发，影响鸡的饲养[2]。

预防为主要的降低鸡禽流感发生率的方法，除科学养殖、强化管理外，还应采取适当的药物预防，保证鸡的健康生长。盐酸金刚烷胺预防鸡禽流感病毒感染的效果已得到证实，但由于药物会大量的残留在鸡体内，因此，养殖鸡并不允许采用该药物预防[3]。近年来研究指出，槲皮素具有预防禽流感病毒感染的效果。槲皮素广泛的分布在植物界中，含有槲皮素的植物种类大约在100种以上，多分布于花、叶及果实中。已有研究证实，槲皮素具有抗氧化、抗炎、抗有害微生物等生物作用，而且不会带来较大的毒副作用，也不易发生耐药性及有害残留[4]。研究表明，鸡生长过程中，给予其黄酮类化合物添加剂后，不仅生长性能可以得到提升，而且脂质代谢情况、消化吸收情况均可得到改善，促进鸡的免疫能力提升，减少疾病的发生[5]。本研究试验结果表示，对于H5N1亚型禽流感病毒感染，其发病时间、发病后的症状可在槲皮素作用下出现延缓及减轻，这说明，槲皮素具有一定的保护、治疗禽流感感染鸡的作用。

鸡一旦感染禽流感病毒，极易造成大面积的传染，严重影响鸡的生长，甚至导致鸡的大量死亡。预防鸡禽流感过程中，可以采用槲皮素，经人工灌喂或饮水中应用后，可发挥预防效果，降低鸡禽流感发生率，同时，鸡发生禽流感后，槲皮素能够减轻症状的严重程度，减少病鸡死亡，具有一定的防治鸡禽流感的效果。

参考文献

[1]冯香安，李垚，刘莹，等.槲皮素作为饲料添加剂的急性毒性和致突变性评价[J].动物营养学报，2012，24（12）：2469-2475.

[2]李霞，张石蕊，刘耕，等.槲皮素的生理作用及其在鸡生产中应用研究进展[J].饲料与畜牧，2015，9（4）：27-31.

[3]张宁，赵博伟，胡晓悦，等.槲皮素在畜禽生产中的应用[J].上海畜牧兽医通讯，2015，26（4）：68-70.

[4]高荣，闫滨.中药抗病毒作用机制研究概况[J].山东中医药大学学报，2015，34（05）：480-483.

[5]邢世华，李晓波.清热解毒类中药抗病毒活性及作用机制研究进展[J].中国药理学通报，2014，16（04）：464-468.

（责任编辑：赵中正）