不同浓度二甲双胍对非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用

朱岱阳 田文武 胡煌

【摘要】目的研究不同浓度二甲双胍对非酒精性脂肪肝小鼠谷丙转氨酶，谷草转氨酶的影响。方法成年健康小鼠50只，按体重随机分为5组，每组10只，分别为低浓度二甲双胍脂肪乳剂组，中浓度二甲双胍脂肪乳剂组，高浓度二甲双胍脂肪乳剂组，脂肪乳剂组（LE），正常对照组（NC）。喂养4W周后取材固定，血清进行谷丙转氨酶谷草转氨酶生化检测。结果高浓度二甲双胍组小鼠ALT、AST明显低于对照组和脂肪乳剂组，二甲双胍组的肝脏脂肪变程度轻于高脂组，差异有统计学意义（P<0.01）。提示高剂量的二甲双胍对非酒精性脂肪肝小鼠肝损伤有明显的保护作用。

【关键词】二甲双胍；非酒精性脂肪肝；小鼠；肝损伤；保护作用

非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）是臨床常见的肝病，是引起肝纤维化和肝硬化的前期病变之一。[1]以往在西方国家十分常见，目前国际上NAFLD领域的研究十分活跃，最新进展包括对NAFLD概念的更新。[2]由于NAFLD发病的隐匿性，其具体的发病机制目前仍不清楚，"二次打击"学说在其中的重要地位已得到一致认可。[3]，二次打击主要为细胞色素P450酶系活性增强、铁沉积、促炎细胞因子水平升高等机制，产生氧化应激和脂质过氧化作用对肝脏进行二次打击，导致已脂肪变性的肝细胞进一步气球样变和坏死。Chudhury等[4]目前已成为临床治疗2型糖尿病伴有代谢综合症的一线药物。二甲双胍联合饮食控制可以明显降低NAFLD患者的ALT、AST和GGT，WMD值，二甲双胍可以加快NAFLD患者ALT、AST和GGT生化指标的恢复，并可以明显改善胰岛素抵抗。[5]二甲双胍可通过减少肝脏葡萄糖输出，提高胰岛素的敏感性，改善胰岛素抵抗等作用降低血糖。[6]本研究使用二甲双胍对大小鼠非酒精性脂肪肝进行干预，从而观察其保护作用。

一、材料与方法

1.材料：成年健康小鼠50只，雌雄各半，体重质量（25±2）g，高脂饲料，蒸馏水，二甲双胍，谷丙转氨酶试剂盒，谷草转氨酶试剂盒。

2.仪器：722型分光光度计，恒温水浴锅，离心机。

3.分组及造模：先将成年健康的清洁级雄性小鼠50只随机分为5组，进行分组灌胃给药：①低浓度二甲双胍脂肪乳剂组：予基本饲料、脂肪乳剂5ml/kg-1·d-1灌胃，等体积二甲双胍100mg/kg-1·d-1，4？。（10只）②中浓度二甲双胍脂肪乳剂组：予基本饲料、脂肪乳剂5ml/kg-1·d-1灌胃，等体积二甲双胍156mg/kg-1·d-1（由成人剂量1.5g/d换算），4？。（10只）③高浓度二甲双胍脂肪乳剂组：予基本饲料、脂肪乳剂5ml/kg-1·d-1灌胃，等体积二甲双胍200mg/kg-1·d-1，4？。（10只）④脂肪乳剂组（LE）：予基本饲料、脂肪乳剂5ml/kg-1·d-1灌胃，4？。（10只）⑤正常对照组（NC）：予基本饲料、蒸馏水5ml/kg-1·d-1灌胃，4？。（10只）。

4.观察指标及测定：喂养4W周后取材固定，观察其模型建立并检测小鼠肝脏的血液生化指标测定：眼球取血后即分离血清，测定谷丙转氨酶，谷草转氨酶。

5.分析数据，得出结论。

二、结果

高浓度二甲双胍组小鼠ALT、AST明显低于对照组和脂肪乳剂组，二甲双胍组的肝脏脂肪病变程度轻于高脂组，差异有统计学意义（P<0.01）。提示高剂量的二甲双胍对非酒精性脂肪肝小鼠肝损伤有明显的保护作用。（见表一）

小鼠血清AST，AUT水平

三、讨论

非酒精性脂肪肝是脂质在肝脏沉积过多的病理状态，是代谢综合征在肝脏的局部表现，目前认为与胰岛素抵抗（IR）有关，体内许多组织均含有谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST），其中ALT主要存在于肝细胞内，AST主要存在于心肌，其次为肝脏。当肝细胞有损害时由于肝细胞坏死，细胞膜通透性增加，这两种酶即可大量渗入血液，而使血中酶活性增高。所以血清中这两种转氨酶活性的增高在一定程度上反映了肝细胞损害和坏死的程度。本研究研究的是不同浓度二甲双胍对非酒精性脂肪肝小鼠肝损伤的影响，通过从生化指标检测的角度可以判断二甲双胍在小鼠非酒精性脂肪肝形成的过程显示了有效的保护作用。

【参考文献】

[2] 沈峰， 范建高； 美国非酒脂肪性肝病诊疗（J）， 中国实用内科杂志.2012.15（4）.65-66.

[3]吴昳，田江，徐翠玲；非酒精性脂肪性肝病的危险因素分析（J），当代医学，2012.18（17）：110-113.

[4]Choudhury J，Sanyal AJ.Insulin resistance and the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease[J].Clin Liver Dis，2004，8（3）：575-94

[5]向毅，罗文杰；探讨二甲双胍治疗非酒精性脂肪性肝病的疗效（J），当代医学，2012.18（17）：18-19.

通讯作者：郑建军