5种植物乙醇提取物及其复配物对荔枝霜疫霉菌的抑菌活性

曾令达 彭惠莲 宋冠华 王绍芬

摘要：【目的】研究5种植物乙醇提取物及其复配物对荔枝霜疫霉菌的抑菌活性，为开发荔枝水果保鲜剂和植物源复配杀菌剂提供科学依据。【方法】采用超声波辅助提取法提取丁香、黄柏、细辛、苦参和花椒等5种植物的乙醇提取物，利用生长速率法和孢子囊萌发法探讨5种植物乙醇提取物及其复配物对荔枝霜疫霉菌的抑制作用。【结果】丁香、黄柏和细辛在提取物浓度5.000 mg/mL下对荔枝霜疫霉菌的抑菌率均为100.00%，苦参和花椒的抑菌率分别为83.00%和74.00%。丁香、细辛、黄柏、苦参和花椒的乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌的抑菌中浓度（EC50）分别为0.30、0.51、0.58、1.21和1.48 mg/mL。在1∶1（V/V）的配比下，苦参与花椒乙醇提取物的复配物抑制荔枝霜疫霉菌菌丝生长的增效比率（SR）最高，为4.59，表现为增效作用；丁香+黄柏、丁香+细辛和黃柏+细辛复配物的SR则在0.5～1.5，表现为相加作用。【结论】丁香、黄柏、细辛、苦参和花椒等5种植物的乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌有较强的抑菌活性，其复配物对抑制荔枝霜疫霉菌菌丝生长具有增效或相加作用。在抑菌复配剂配伍时，可从降低成本和保护野生植物资源角度考虑选择适当的植物种类。

关键词： 乙醇提取物；复配物；荔枝霜疫霉；抑菌活性

中图分类号： S482.38 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2016）08-1332-06

Abstract：【Objective】The present experiment was conducted to study antibacterial activity of ethanol extracts from 5 species of plants and their compounds against Peronophythora litchi Chen， in order to provide scientific basis for developing litchi preservatives and botanical compound fungicide. 【Method】Five kinds of extracts were extracted from Syringa aramaticum， Phellodendron amurense Rupr.， Asarum sieboldii， Sophora flavescens and Pricklyash peel by ultrasonic-assisted extraction method， respectively. The inhibitory effect of 5 kinds of extracts and their compounds on P. litchi were tested by using mycelial growth rate method and sporangial germination assay. 【Result】The results showed that， the inhibition rates of 5.000 mg/mL extracts from S. aramaticum， P. amurense and A. sieboldii against P. litchi were all 100.00%， those of extracts from S. flavescens and P. peel were 83.00% and 74.00%， respectively. The median effective concentrations（EC50） of five extracts from S. aramaticum， P. amurense， A. sieboldii， S. flavescens and P. peel were 0.30， 0.51， 0.58， 1.21 and 1.48 mg/mL， respectively. Furthermore， when any two extracts were mixed at the ratio of 1∶1（V/V）， the synergistic effect of compound extracts from S. flavescens and P. peel was the best， and the synergistic ratio（SR） was the highest（4.59）. The SR of S. aramaticum and P. amurense compound extracts， S. aramaticum and A. sieboldii compound extracts， P. amurense and A. sieboldii compound extracts ranged from 0.5 to 1.5， showing additive effect. 【Conclusion】The extracts from S. aramaticum， P. amurense， A. sieboldii， S. flavescens and P. peel have high antifungal activities to P. litchi， and their compounds have synergistic or additive inhibitory effects on mycelial growth of P. litchi. Considering compatibility of antifungal compound， the appropriate plant species should be selected from aspects of reducing cost and protecting wild plant resources.

Key words： ethanol extract； compound； Peronophythora litchi Chen； inhibitory activity

0 引言

【研究意义】荔枝霜疫霉病是荔枝最主要的病害之一，广泛分布于我国荔枝主栽区，严重影响荔枝的产量（姜子德等，2011）及果实的贮藏和对外销售，造成巨大经济损失（戚佩坤，1994）。目前，荔枝霜疫霉病仍以化学药剂防治为主（黄梁新，2013；曾蓉姿，2015），但瑞毒霉锰锌、杀毒矾等常用化学药剂的使用容易造成荔枝霜疫霉菌抗药性提高，且频繁用药造成生产成本上升、环境污染、农药残留等后果和风险（鞠荣等，2003）。因此，研究防治荔枝霜疫霉病的高效、无公害、无残留植物源生物药剂对荔枝产业的健康发展具有重要意义。【前人研究进展】至今，已研究发现一些植物的提取物對荔枝霜疫霉菌具有较强的抑菌活性。吴光旭等（2006）发现开口箭甲醇提取物对荔枝霜疫霉菌有明显的离体和活体抗菌活性，对荔枝果实具有较好的贮藏保鲜效果。曾勇等（2007）发现盾叶薯蓣、水菖蒲等植物的甲醇和乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌的抑制率均在80%以上。丘麒等（2007）研究表明，巴核桃、大杨柳和甘草甲醇提取物对荔枝霜疫霉菌有较高的抑菌活性。张慧等（2008）研究发现，金缕梅和毛枝鱼藤等甲醇提取物对荔枝霜疫霉菌具有较好的抑菌活性。罗建军等（2012）研究发现，甘草甲醇提取物对荔枝霜疫霉菌的抑制率达97.83%。曾令达等（2012a， 2012b）研究发现，阴香、大蒜、丁香、黄连和细辛等乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌具有抑制作用。将具有抑菌作用的植物提取物进行复配，可增强抑菌活性。关于防治荔枝霜疫霉的植物提取物复配研究也进行了一些尝试，但相关报道很少，且主要为提取物与化学杀菌剂之间的复配。赖毅东（2003）筛选出增效作用较好的中草药配伍液PW-6，该配伍液对荔枝霜疫霉菌有很强的抑制作用；胡美英等（2009）发现茶皂素与咪鲜胺混合对自然伤口感染霜疫霉的荔枝果30 d防效可达95.23%。【本研究切入点】目前，关于植物提取物对荔枝霜疫霉抑制效果的研究主要在单一植物提取物方面，对不同植物提取物协同抑菌的研究较少。【拟解决的关键问题】在筛选较强抑菌活性植物的基础上，采用离体培养方法进行单一植物乙醇提取物和复配物对荔枝霜疫霉菌抑菌活性试验，明确单一植物乙醇提取物和复配物的抑菌活性差异，旨在为开发高效、经济的荔枝水果保鲜剂和植物源复配杀菌剂提供科学依据。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

供试植物材料共4科5种（表1），均从惠州市惠城区大参林药店购进。供试荔枝霜疫霉菌（Peronophythora litchi Chen）由惠州学院生命科学系生理实验室提供。

1. 2 植物提取物制备

将植物晾干后粉碎过40目筛，称取50.0 g置于500 mL三角瓶中，加入95%乙醇100 mL浸泡5 h，超声波提取1 h后过滤，再用95%乙醇定容至100 mL，置于-4 ℃冰箱保存备用。

1. 3 抑菌活性试验

1. 3. 1 菌丝生长速率法 分别将5种植物提取物与 PSA培养基（马铃薯蔗糖培养基，冷却至50 ℃左右）充分混合，配制成5.000 mg/mL带药培养基，进行菌丝生长量测定；另外，将丁香、细辛和黄柏提取物配制成2.000、1.000、0.500、0.250和0.125 mg/mL等5个质量浓度梯度的带药培养基，把苦参和花椒提取物配制成5.000、2.500、1.000、0.500和0.250 mg/mL等5个质量浓度梯度的带药培养基，进行同一植物提取物在不同浓度梯度下菌丝生长量测定。取10 mL各带药培养基倒入直径为9 cm的培养皿制成带药培养基，用直径为4 mm的打孔器在培养好的荔枝霜疫霉菌落边缘打取菌饼，将菌饼移植到带药培养基中心（一皿一个菌饼），使菌丝面向下接触培养基，28 ℃培养5 d后，用十字交叉法测量并记录菌落直径，按下述公式计算抑菌率。以乙醇代替提取物制作培养基为对照，每处理3次重复。

菌丝净生长量=菌落直径-菌饼直径

抑菌率（%）=（对照菌丝净生长量-处理菌丝净生长量）/对照菌丝净生长量×100

毒力计算方法：将抑菌率换算成几率值，质量浓度以对数值表示，以各提取物不同质量浓度的对数值（x）和菌落生长抑制率的几率值（y）求取毒力回归方程y=a+bx，并计算抑菌中浓度（EC50）。

1. 3. 2 孢子囊萌发法 将荔枝霜疫霉菌接种于PSA培养基上28 ℃下培养10 d后，用20 mL无菌蒸馏水冲洗菌丝及孢子囊，4层纱布过滤制得孢子囊悬液，镜检并调整孢子囊浓度，使其在低倍镜下（10×10）每个视野的孢子数达80～100个。取5 mL孢子囊悬液于试管中，加入5.000 mg/mL植物提取物后放入28 ℃恒温振荡培养箱中培养5 h后镜检，随机检查3个视野，统计孢子萌发数，按下述公式计算孢子囊萌发抑制率。每处理重复3次，以95%乙醇加入孢子囊悬液作对照。

孢子囊萌发抑制率（%）=（对照孢子囊萌发率-处理孢子囊萌发率）/对照孢子囊萌发率×100

1. 4 复配物抑菌效果试验

参照Wadley的方法（王廷廷，2013）进行植物乙醇提取物的复配试验。复配方法：用制备的提取物母液在1∶1（V/V）配比下混合，混合后以两种提取物的EC50为基础，用二倍稀释法配制复配物梯度，根据浓度梯度的实测值通过毒力回归方程计算EC50实测值，并通过下述公式计算理论EC50。

复配物理论EC50=（a+b）/[（a/A的EC50）+（b/B的EC50）]

式中，A、B分别代表不同植物提取物，a、b分别为两组分在混剂中含量的比值。

以增效比值（SR）判定不同混合组配的抑菌活性作用，SR<0.5为拮抗作用，SR=0.5～1.5为相加作用，SR>l.5为增效作用。

增效比值（SR）=EC50理论值/EC50实际值

2 结果与分析

2. 1 不同植物乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌菌丝生长的抑制作用

如表2所示，在5.000 mg/mL浓度下，丁香、黄柏和细辛对荔枝霜疫霉菌的抑菌率均为100.00%，苦参和花椒的抑菌率分别为83.00%和74.00%。如表3所示，在2.000 mg/mL浓度下，丁香、黄柏和细辛对荔枝霜疫霉菌的抑菌率分别为97.36%、80.99%和92.28%，显示丁香、黄柏和细辛较苦参和花椒对荔枝霜疫霉有更强的抑制作用。根据5种植物提取物的5个浓度梯度对荔枝霜疫霉菌的抑菌率分别计算各提取物的毒力回归方程；根据回归方程，得到各乙醇提取物的EC50（表3）。从表3的EC50可看出，对荔枝霜疫霉菌抑菌活性最强的为丁香，其后依次是细辛、黄柏、苦参和花椒。

2. 2 不同植物乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌孢子囊萌发的抑制作用

由表4可知，分别用浓度为5.000 mg/mL的植物乙醇提取液处理荔枝霜疫霉菌孢子囊，以花椒乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌孢子囊萌发的抑制率最高，为80.45%，黄柏、细辛、丁香和苦参的抑制率均在50.00%以上，分别为73.73%、57.65%、78.36%和58.90%，细辛乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌孢子囊的抑制率最低。

2. 3 不同植物乙醇提取物的复配物对荔枝霜疫霉菌菌丝生长的抑制作用

依椐上述不同植物提取物的抑菌效果，选取丁香、黄柏和细辛进行两两复配，苦参与花椒进行复配。如表5所示，在1∶1（V/V）的配比下，植物乙醇提取物复配后形成苦参+花椒、丁香+黄柏、丁香+细辛和黄柏+细辛4种复配物，对应的EC50分别为0.29、0.45、0.30和0.52 mg/mL。由表6可知，苦参+花椒复配物对荔枝霜疫霉菌菌丝生长有较强的抑制作用，SR为4.59，表现为增效作用；丁香+黄柏、丁香+细辛和黄柏+细辛复配物的SR分别为0.89、1.23和1.04，表现为相加作用。

3 讨论

自然界中拥有非常丰富的荔枝霜疫霉生物防治资源（徐迟默等，2015），但不同植物的乙醇提取物的抑菌效果不同（谢俊杰等，2016）。本研究发现在乙醇提取物浓度5.000 mg/mL条件下，丁香、黄柏、细辛、苦参和花椒对荔枝霜疫霉菌的抑菌率均大于70.00%。在植物抑菌研究中，佘世望等（1997）测定了60种植物乙醇提取物的抗菌防腐作用，发现丁香、花椒等5种中药对19种食品腐败菌有明显的抗菌作用，其中丁香和花椒具有较强的抑菌作用。本研究同样发现丁香和花椒具有较强的抑菌活性，丁香和花椒对荔枝霜疫霉菌的EC50分别为0.30和1.48 mg/mL；在5.000 mg/mL条件下，丁香、花椒对荔枝霜疫霉的抑菌率分别为100.00%和74.00%，对荔枝霜疫霉孢子囊的萌发抑制率分别为78.36%和80.45%。黄柏具有广泛的抗菌作用，都日娜和乌日娜（2008）研究发现黄柏在抗炎、抗菌方面有广泛作用，有良好的开发前景；王兰等（2010）發现黄柏、苦参等中药对黑曲霉、拟青霉等真菌有明显的抑霉作用；陈洁等（2013）在进行传统中药体外抗真菌研究中发现，黄柏、知母等具有较好的抗真菌活性。本研究发现黄柏对荔枝霜疫霉也具有较强的抑制作用，黄柏对荔枝霜疫霉的EC50为0.58 mg/mL，在5.000 mg/mL条件下，黄柏对荔枝霜疫霉的抑菌率为100.00%，对荔枝霜疫霉孢子囊的萌发抑制率为73.73%。曾勇等（2007）用10 mg/mL苦参甲醇提取物处理荔枝霜疫霉菌，其对菌丝的生长抑制率为89.10%，具有较强的抑菌活性；本研究中苦参乙醇提取物在5.000 mg/mL条件下对荔枝霜疫霉的抑菌率为83.00%，两者试验结果较一致。细辛为常用传统中药，活性成分复杂，不仅具有广泛的药理作用，还具有抗农业害虫和抗植物霉菌病害等作用（韩俊艳等，2011）。本研究中细辛对荔枝霜疫霉具有较强的抑菌活性，其对荔枝霜疫霉的EC50为0.51 mg/mL，在5.000 mg/mL条件下，细辛对荔枝霜疫霉的抑菌率为100.00%，对荔枝霜疫霉孢子囊的萌发抑制率为57.65%。另外，本研究发现在5.000 mg/mL条件下，花椒乙醇提取物对荔枝霜疫霉孢子囊萌发的抑制作用较强，细辛和苦参乙醇提取物的抑制率较低，但所有供试植物乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌的抑制率均超过50.00%，显示这5种植物乙醇提取物具有较高的抑菌活性。而乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌菌丝生长和孢子囊萌发的抑制率无一致性，可能与抑菌物质的作用位点和作用机理不同有关。

不同的抑菌物质，由于其化学组成和结构不同而具有不同的性质，当不同物质同时存在时，常因相互之间的作用和影响而使其性质发生不同程度改变。由于植物提取物的复配活性和作用机理非常复杂，复配效果必然是各种活性成分相互间作用的综合结果，因此，提取物的复配是否得当，直接影响杀菌剂的药效。含有丁香、苦参等乙醇提取物的杀菌复配剂具有较好的杀菌效果。韩相鹏等（2003）研究表明，苦参素与2%新科高浓缩杀虫剂混合可有效控制黄芪根病危害；方哲等（2009）研究发现，丁香与苦参提取液复配对人参锈腐病菌的孢子萌发有很强的抑制作用，对病原菌菌丝生长有抑制作用；焦镭等（2011）进行了15种中草药及复配液的抑菌性和稳定性研究，结果表明，复配液PW4（丁香、厚朴、苦参）、PW7（紫丹参、厚朴、苦参）和PW10（厚朴、苦参、迷迭香）是其中效果较好的配伍；在荔枝霜疫霉的防治研究中，赖毅东（2003）筛选出含有丁香的配液PW-6增效最佳，对荔枝霜疫霜的最小抑菌浓度（MIC）为3.125 mg/mL。本研究将5种植物乙醇提取物进行复配，发现在1∶1（V/V）的配比下，苦参+花椒复配物对荔枝霜疫霉菌菌丝生长有较强的抑制作用，表现为增效作用；丁香+黄柏、丁香+细辛和黄柏+细辛复配物表现为相加作用。因此，在抑菌复配剂配伍时，应从降低复配抑菌剂成本和保护野生植物资源的角度考虑选择适当的植物种类，但本研究中有关乙醇提取物和复配物对荔枝霜疫霉菌的作用部位和代谢影响等机理尚有待进一步研究。

4 结论

丁香、黄柏、细辛、苦参和花椒等5种植物的乙醇提取物对荔枝霜疫霉菌有较强的抑菌活性，苦参与花椒的乙醇提取物复配物对荔枝霜疫霉菌菌丝生长具有抑制增效作用，丁香+黄柏、丁香+细辛和黄柏+细辛等乙醇提取物复配物具有相加作用。在抑菌复配剂配伍时，可从降低成本和保护野生植物资源角度考虑选择适当的植物种类。

参考文献：

陈洁，符纯美，晏继红，闫新豪. 2013. 传统中药的体外抗真菌作用研究[J]. 西北药学杂志，28（5）：495-497.

Chen J， Fu C M， Yan J H， Yan X H. 2013. Research of the antifungal activity of traditional Chinese medicines in vitro[J]. Northwest Pharmaceutical Journal， 28（5）： 495-497.

都日娜，乌日娜. 2008. 黄柏的研究进展[J]. 中国民族医药杂志，14（3）：75-76.

Du R N， Wu R N. 2008. Research progress of Cortex phellodendri[J]. Journal of Medicine and Pharmacy of Chinese Minorities， 14（3）： 75-76.

方哲，傅俊范，周如军，孟娜. 2009. 丁香与苦参复配剂对人参锈腐病菌的抑菌活性[J]. 吉林农业大学学报，31（1）：13-15.

Fan Z， Fu J F， Zhou R J， Meng N. 2009. Study on the antifungal activities of Syringa pekinensis and Sophora flavescens mixture to Cylindrocarpon destructans[J]. Journal of Jilin Agricultural University， 31（1）： 13-15.

韩俊艳，孙川力，纪明山. 2011. 中药细辛的研究进展[J]. 中国农学通报，27（9）：46-50.

Han J Y， Sun C L， Ji M S. 2011. Recent advance of Chinese Herb-asarum[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin， 27（9）： 46-50.

韩相鹏，骆得功，黄贤芬，邓成贵，漆文选，陈蕾，杜玺. 2003. 生物及低残留农药防治黄芪根病试验初报[J]. 中药材，26（3）：161-163.

Han X P， Luo D G， Huang X F， Deng C G， Qi W X， Chen L， Du X. 2003. Preliminary report on using biological and low-residue pesticides to control the root disease of Astragalus monghozicus[J]. Chinese Medicinal Materials， 26（3）： 161-163.

胡美英，鐘国华，郝卫宁，曾勇. 2009. 茶皂素及其合剂在水果防腐保鲜方面的应用：中国，CN101444236A[P]. 2009-06-03.

Hu M Y， Zhong G H， Hao W N， Zeng Y. 2009. Application of tea saponin and its mixtures in antisepsis and preservation of fruit： China， CN101444236A[P]. 2009-06-03.

黄梁新. 2013. 荔枝周年病虫害发生及防治技术[J]. 中国热带农业，（2）：48-49.

Huang L X. 2013. Occurrence of annual plant diseases and insect pests for litchi and its control technology[J]. China Tropical Agriculture，（2）：48-49.

姜子德，习平根，冼继东，彭埃天，陈伟科. 2011. 对未来五年我国荔枝植保研究的思考[J]. 中国热带农业，42（5）：61-63.

Jiang Z D， Xi P G， Xian J D， Peng A T， Chen W K. 2011. Reflections on litchi plant protection research of Chinese future in five years[J]. China Tropical Agriculture， 42（5）：61-63.

焦镭，柴梦颖，石明生. 2011. 十五种中草药及复配液的抑菌性和稳定性研究[J]. 农产品加工（学刊），（4）：26-29.

Jiao L， Chai M Y， Shi M S. 2011. Antibacterial action and stability of fifteen kind of Chinese herbal medicine and the compounds[J]. Academic Periodical of Farm Products Processing，（4）： 26-29.

鞠荣，徐汉虹，邓业成，杨晓云. 2003. 农药在荔枝上的安全使用及其残留[J]. 广西农业科学，（2）：38-41.

Ju R， Xu H H， Deng Y C， Yang X Y. 2003. Safe application and residue of agrochemicals on litchi[J]. Guangxi Agricultural Sciences，（2）：38-41.

赖毅东. 2003. 具有抑菌活性成分中草药的筛选及防腐保鲜应用机理研究[D]. 广州：华南理工大学.

Lai Y D. 2003. Screening of Chinese herbal medicines with antimicrobial activity components and research of the preservative mechanism[D]. Guangzhou：South China University of Technology.

罗建军，翁群芳，胡美英. 2012. 抑菌植物的筛选及甘草对 5 种植物病原真菌抑菌活性的研究[J]. 华南农业大学学报，33（3）：356-360.

Luo J J，Weng Q F，Hu M Y. 2012. Studies on screening of antifungal plants and antifungal activities of Glycyrrhiza uralensis against five phytopathogens[J]. Journal of South China Agricultural University， 33（3）：356-360.

戚佩坤. 1994. 果蔬贮运病害[M]. 北京：中国农业出版社：35-36.

Qi P K. 1994. Postharvest Diseases of Fruit and Vegetable[M]. Beijing： China Agriculture Press：35-36.

丘麒，羅建军，曾勇，叶倩文，钟国华. 2007. 21种植物提取物对荔枝霜疫霉菌和芒果炭疽病菌的抑菌活性[J]. 安徽农业科学，35（12）：3588-3589.

Qiu Q， Luo J J， Zeng Y， Ye Q W， Zhong G H. 2007. Antifungal activity of extract from 21 species of plants against Peronophythora litchi Chen and Colletotrichum gloeosporioides Penz[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences， 35（12）：3588-3589.

佘世望，范青生，肖小年，吴凌伟，张宁，刘新阳. 1997. 60种食药两用中药抗菌防腐作用研究[J]. 天然产物研究与开发，9（4）：62-67.

She S W， Fan Q S， Xiao X N， Wu L W， Zhang N， Liu X Y. 1997. Studies on antimicrobial effects of 60 traditional chineses health foods[J]. Natural Product Research and Development， 9（4）：62-67.

王兰，张丽娟，张芳红，樊锦慧. 2010. 黄柏苦参陈皮高良姜等中药材的体外防霉活性研究[J]. 中国卫生检验杂志，20（8）：1942-1943.

Wang L， Zhang L J， Zhang F H， Fan J H. 2010. Study on antifungal activity of chinese herbal medcines（in vitro）[J]. Chinese Journal of Health Laboratory Technology， 20（8）：1942-1943.

王廷廷. 2013. 农药组合物发明专利协同增效作用判断方法[J]. 农药市场信息，（29）： 4-7.

Wang T T. 2013. Judgment methods for synergy of pesticide composition invention patent[J]. Pesticide Market Information，（29）： 4-7.

吴光旭，刘爱媛，陈维信. 2006. 开口箭提取物对荔枝霜疫霉菌的抑制作用及其对荔枝果实的贮藏效果[J]. 中国农业科学，39（8）：1703-1708.

Wu G X， Liu A Y， Chen W X. 2006. Effects of extracts of tupistra chinensis on mycelia growth of Peronophythora litchi and storage life of litchi fruit[J]. Scientia Agricultura Sinica， 39（8）： 1703-1708.

谢俊杰，韩峻，左国营，王宁，程子梦. 2016. 10种中草药提取物体外抗铜绿假单胞菌作用研究[J]. 广西植物，36（2）：240-245.

Xie J J，Han J，Zuo G Y，Wang N，Cheng Z M. 2016. Antibacterial activity screening of 10 Chinese herbal medicines against Pseudomonas aeruginosa in vitro[J]. Guihaia，36（2）：240-245.

徐迟默，谢龙莲，曾筱芬，温衍生. 2015. 荔枝霜霉病生物防治研究进展[J]. 南方农业学报，46（1）：72-78.

Xu C M， Xie L L， Zeng X F， Wen Y S. 2015. Research progress on biological control of Peronophythora litchi[J]. Journal of Southern Agriculture， 46（1）： 72-78.

曾令达，叶妙宁，张思伟，黄建昌. 2012a. 两种植物粗提物对荔枝霜疫霉菌的抑制作用[J]. 仲恺农业工程学院学报，25（1）：37-40.

Zeng L D， Ye M N， Zhang S W， Huang J C. 2012a. Inhibition effects of crude extracts from Allium sativum and Cinnamomum burmannii against Peronophythora litchi[J]. Journal of Zhongkai University of Agriculture and Engineering， 25（1）：37-40.

曾令達，张荣，蔡韫，柴素芬. 2012b. 17 种植物提取物对荔枝霜疫霉菌的抑制作用[J]. 广东农业科学，（12）：89-92.

Zeng L D， Zhang R， Cai Y， Chai S F. 2012b. Inhibition of extracts from 17 kinds of plants on mycelia growth of Peronophythora litchi[J]. Guangdong Agricultural Sciences， （12）：89-92.

曾蓉姿. 2015. 荔枝病虫害的防治分析[J]. 南方农业，9（30）：56.

Zeng R Z. 2015. Analysis on control of litchi pests and diseases[J]. South China Agriculture， 9（30）：56.

曾勇，罗建军，丘麒，翁群芳，胡美英，钟国华. 2007. 23种植物提取物对荔枝霜疫霉病菌的抑菌活性[J]. 华中农业大学学报，26（6）：780-784.

Zeng Y， Luo J J， Qiu Q， Weng Q F， Hu M Y， Zhong G H. 2007. Antifungal activity of extracts from 23 species of plants against Peronophythora litchi Chen[J]. Journal of Huazhong Agricultural University， 26（6）： 780-784.

张慧，徐大高，潘汝谦，徐汉虹. 2008. 一些植物提取物的抗菌活性筛选[J]. 植物病理学报，38（4）：441-444.

Zhang H， Xu D G， Pan R Q， Xu H H. 2008. Screening for antimicrobial activities in some plant extracts[J]. Acta Phytopathologica Sinica， 38（4）： 441-444.

（责任编辑 麻小燕）