吴成吉 黄作义 董淑欣 邹春影
摘要:目的 临床分析不同强度跑台运动对大鼠学习记忆能力及海马CA3区突触超微结构的影响。方法 选取40只大鼠,按照随机分配的方法,将其分为4个组,即对照组10只,高强度运动组10只,中强度运动组10只,低强度运动组10只,根据各自强度运动,待60d后,给予被动回避反应试验,对潜伏期时间进行测量。接着,在每组任意选取5只大鼠,选择右侧海马CA3区,制作超薄切片,用60k倍透射电镜拍照,测量突触界结构。结果 经过分析后得知,低强度运动组经过点击后1d,步入潜伏期时间明显延长,海马CA3区突触后膜致密物质明显增厚,主要分为负向弯曲、正向弯曲和平直三种类型。结论 总而言之,低强度运动,有利于提高记忆能力,对CA3区神经元突触结构的可塑性变化具有一定影响,突触后膜致密物质厚度和记忆能力具有正相关关系。
关键词:不同强度跑台运动;大鼠;学习记忆能力;CA3
1资料与方法
1.1一般资料 选取40只大鼠,按照随机分配的方法,将其分为4个组,即对照组10只,高强度运动组10只,中强度运动组10只,低强度运动组10只。40只大鼠全部由塑料代谢笼喂养,设置消毒木屑,选择普通饲料喂养,温度为22℃左右,适度50%左右,采取自然照光方式,每周选择紫外灯进行消毒、灭菌。
1.2方法 跑台训练:大鼠在笼内自由取食。各运动组大鼠在跑台上训练3d,低强度组以15m/min速度运动,30min/d。中强度组以25m/min速度运动,30min/d。高强度大鼠以25m/min速度运动,20min/d,每天增加1m,直到30m/min为止,每6d休息1d,一共运动60d。
被动回避反应试验:选择模板,制作回避反应箱,在箱底设置1cm细铁条,将反应箱有孔隔板分隔为两块,使大鼠能够自由穿行,一侧连接电源,一侧不连接电源,即安全区。在60d时,给予被动回避反应试验,仔细监测潜伏期时间。
动物取样:待测定完成之后,所有动物进入潜伏期时间,处于深麻醉条件下,选择戊二醛磷酸缓冲液、多聚甲醛,通过左心室主动脉进行固定灌注,同时取大鼠整脑,在固定液浸泡3h左右,然后移入蔗糖磷酸缓冲液冰箱,温度设置4℃,过夜。
接着,在每组任意选取5只大鼠,选择右侧海马CA3区,制作超薄切片,用60k倍透射电镜拍照,测量突触界结构。
2结果
经过分析后得知,低强度运动组经过点击后1d,步入潜伏期时间明显延长,海马CA3区突触后膜致密物质明显增厚,主要分为负向弯曲、正向弯曲和平直三种类型。
3讨论
近些年来,运动和学习记忆能力的关系,是医学界的重点研究课题。运动的适宜性、规律性、长期性,能够提升大鼠空间大鼠记忆能力。根据相关研究表明,海马CA3区作为学习记忆关键区域,突触结构变化是否和学习记忆能力相关,长时程的增强效应、行为训练、药物治疗、生活环境变化,对脑区神经元新突触产生、突触修饰,均有着密切联系。现阶段,健身运动日益科学化,怎样开展益智运动,是人类非常关心的健康问题。不同强度的跑台运动,在多大程度上,影响着学习记忆能力,和学习记忆脑区关联多少,相关性研究较少。因此,笔者在本组实验中,根据不同强度跑台运动,分析不同强度跑台运动对大鼠学习记忆能力及海马CA3区突触超微结构的影响。
在本组实验中,选择透射电镜,处于60k倍观察下,选择OCD拍照,导入每张照片,选择工具测量突触间隙宽度、CA3区突触后膜致密物质厚度和弦弧长,计算曲率之后,在计算软件中即可显示,通过数码方式呈现,与传统施工测量方式相比,可降低测量误差率,节约测量时间,可降低主观因素影响,确保结果更为可信、客观。电镜下化学性突触由三部分组成:①突触前成分:一般是前一个神经元的轴突终末膨大部分,有突触小泡,内含神经递质,与下一个神经元接触部位的细胞膜为突触前膜。②突触后成分:是后一神经元或效应细胞与突触前成分相对应的局部区域。③突触间隙:是突触前膜与突触后膜之间的狭窄间隙。
根据Ader等学者报道,选择被动回避反应箱,处于不同刺激强度和不同电击时间下,测量大鼠的记忆能力,为被动回应向测量记忆功能奠定了基础。根据后来学者报道,测量CA3区的突触界面结构。在本组实验中,测量手法更为先进、科学。根据现有发现,海马作为大脑学习的关键区域,神经元突触后膜致密物质的增厚,是重要表现过程,是学习记忆功能形态结构加固的基础。因此,针对不同海马CA3结构、记忆能力和不同强度,三者具有紧密联系。
根据相关研究表明,运动可促进人体学习记忆能力、认知能力和个性的良好发展,运动有利于动物类海马脑区的分化和存活,提升实验动物被动逃避记忆能力、空间记忆能力。根据相关研究表明,让血管性痴呆大鼠的平衡和轮转训练,可有效提升大鼠记忆能力、空间学习能力,促进海马LTP形成。该结果和本实验结果保持一致,通过低强度有氧运动,能够有效提升大鼠记忆能力。
对于突触界面结构,最易改变参数是PSD,PSD内含有多种蛋白质、酶,因诸多影响,这些蛋白质和酶会发生变化。持续电刺激和光照刺激,或注射脑室内药物,可促使脑区PSD变薄,或者增厚。如果PSD增厚,突触结构就会增强。因此,随着蛋白质分子结构变化,致密物质厚度变薄,或者增厚。通过低强度运动,可提升大鼠学习记忆能力,主要是与海马NMDA的BDNF、NRI等基因表达相关。
根据本组实验结果,低强度运动,有利于提高记忆能力,对CA3区神经元突触结构的可塑性变化具有一定影响,突触后膜致密物质厚度和记忆能力具有正相关关系。高强度运动和中强度运动的大鼠,并未发生这些变化。这说明,在不同强度跑台运动中,低强度的有氧运动,有利于提升学习记忆能力。
参考文献:
[1] 孙国欣,田振军,何江明,等.不同负荷运动对大鼠海马CA Ⅰ区一氧化氮合酶表达的影响[J].天津体育学院学报,2006,21(1):18-20,23.
[2] 李小涛.运动训练对大鼠脑组织胶质细胞的影响及其与学习记忆的关系研究[D].陕西师范大学,2006.编辑/孙杰