热毒宁注射液对巨细胞病毒性心肌炎小鼠SOD活性及MDA含量的影响

范群雄 李峥嵘

湖北 十堰 442000）

摘要：目的 观察热毒宁注射液对病毒性心肌炎（VMC）小鼠血浆SOD活性及MDA含量的影响，探讨热毒宁注射液对病毒性心肌炎小鼠的抗炎保护作用。方法 40只雄性BALB/c小鼠随机分为四组：空白组（A组）、模型组（B组）、更昔洛韦注射液组（C组）、热毒宁注射液组（D组），每组10只。A组腹腔注射0.5 ml生理盐水，连续注射10 d；B、C、D各组首先腹腔注射巨细胞病毒（CMV）悬液0.1 ml，0.5 min后分别注射生理盐水、更昔洛韦注射液、热毒宁注射液各0.4 ml，连续治疗10 d；10 d后采集血液，采用采用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法检测血清SOD活性及MDA含量。结果 与B组相比，C、D组小鼠的SOD活性显著升高，MDA含量明显降低（P<0.05），但C、D组相比无明显差别。结论 热毒宁注射液具有抗炎作用，对治疗病毒性心肌炎小鼠具有一定的疗效。

关键词：病毒性心肌炎；热毒宁注射液；SOD；MDA；小鼠

心肌炎主要是由病毒感染、化学物质损伤或自身免疫引起的心肌局灶性或弥漫性炎性病变。心内膜穿刺的病理检查结果表明，大约60%心肌炎患者的心肌细胞病毒检测为阳性[1]，这种因病毒感染心肌细胞而引起的心肌炎称为病毒性心肌炎。大约有20%病毒性心肌炎患者逐渐演变为扩张型心肌病，其致残致死率高[2]。能引发心肌炎的病毒较多，其中以柯萨奇病毒感染最为常见，CMV也是侵犯心肌的重要病毒之一。近年来，病毒性心肌炎患者发病率逐年上升，但具有明确疗效的治疗药物却为数不多。本课题研究了热毒宁注射液对巨细胞病毒性心肌炎小鼠的抗炎保护作用。

1 资料与方法

1.1实验病毒、动物 CMV由徐州医学院附属医院急诊实验室赠予，40只6～8w龄雄性BALB/c健康小鼠，体重25 g左右，购自湖北医药学院实验动物中心。

1.2实验试剂、药物SOD及MDA测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，更昔洛韦注射液购自湖北科益药业有限公司，热毒宁注射液由连云港康缘药业有限公司生产。

1.3动物分组、取材 将40只6w龄雄性BALB/c健康小鼠随机分为四组：空白组（A组）、模型组（B组）、更昔洛韦注射液组（C组）、热毒宁注射液组（D组），每组10只。A组腹腔注射0.5 ml生理盐水，连续注射10 d；B、C、D各组首先腹腔注射10-4LogTCID50CMV悬液0.1 ml[3]，0.5 min后分别注射生理盐水、更昔洛韦注射液、热毒宁注射液各0.4 ml，连续治疗10d； 10 d后眼球摘除取血法采集血液约1.0 ml，离心后，-20℃冰箱中保存，以检测SOD活性及MDA含量。

1.4血清SOD及MDA含量检测 按照SOD及MDA试剂盒说明书步骤进行操作，检测SOD及MDA含量。

1.5统计学处理 计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS13.0软件处理数据。多组定量资料间的比较进行方差齐性检验，若方差齐采用单因素方差分析，若方差不齐采用Dunnett's T3（3）检验。单因素方差分析中的两两比较采用SNK法检验，检验水准为α=0.05，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

与模型组相比，热毒宁组、更昔洛韦组SOD活性显著升高，MDA含量明显降低（P<0.05），但热毒宁组与更昔洛韦组相比较无统计学意义（P>0.05）。见表1。

3 讨论

心肌炎是一种弥漫性或局限性的心肌炎性病变，其详细发病机制尚不清楚，可能与病毒本身对心肌的直接损伤及其引起的免疫反应有关[4]，目前缺乏特效的病毒根治方法。热毒宁注射液是复方中草药注射剂，有效成分为青蒿、金银花、栀子，具有解热、抗病毒、抗细菌、增加免疫等药理作用。现代药理学研究表明，青蒿含倍半萜内酯、黄酮类、青蒿酮，具有抗病毒、解热、抗炎、抗氧化、镇痛等作用。

VMC的发生与脂质过氧化反应增强有关，VMC时受损的心肌细胞产生的氧自由基破坏了原来的动态平衡，引发了脂质过氧化反应，而氧自由基的清除依赖抗氧化酶系的作用[5]。SOD是抗氧化酶系中的主要抗氧化酶，其活性高则抗氧化作用强。MDA是脂质过氧化反应的中间产物，其含量多少体现了氧化损伤的程度。

本研究结果显示，热毒宁注射液组小鼠SOD活性升高，MDA含量降低，但与更昔洛韦组无明显差别，表明热毒宁注射液具有抗氧化作用，其可使VMC小鼠的SOD活性升高，清除过表达的氧自由基，改善动态失衡，减少脂质过氧化反应，从而减少中间产物MDA含量抑制炎症反应。为临床热毒宁注射液治疗病毒性心肌炎提供了实验依据，但热毒宁注射液治疗病毒性心肌炎的具体作用靶点尚有待于进一步研究。

参考文献：

[1]Luo H ， Wong J ， Wong B .Protein degradation systems in viral myocarditis leading to dilated cardiomyopathy[J].Cardiovascular Research， 2010， 85（2）： 347-356.

[2]Olimulder MA， Van Es J， Galjee MA.The importance of cardiac MRI as a diagnostic tool in viral myocarditis induced cardiomyopathy[J]. Netherlands Heart Journal， 2009， 17（12）： 481-486.

[3]WangYX， Da Cunba V， MartinMcNuhy B. Inhibition of Rho-kinase by fasudil attenuated Angiotensin II induced cardiac hypertrophy in apolipoprotein E deficient mice[J].Eur J Pharmacol， 2005， 512（223）：215-222.

[4]Shauer A， Gotsman I， Keren A， Zwas DR， Hellman Y， Durst R， Admon D. Acute viral myocarditis： current concepts in diagnosis and treatment[J].Isr Med Assoc J， 2013， 15（3）： 180-185.

[5]周晓春，顔勇，王宝忠，等.生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清SOD活性和MDA含量的影响[J].承德医学院学报，2008，1（25）：10-12

编辑/金昊天