化学发光免疫分析法检测血清中前列腺特异抗原复合物

周友俊 李娇霞 程绘珺 杨乔芬 何美琼 郭丽萍 邓智勇

摘 要 采用杂交瘤技术构建抗前列腺特异抗原-α1-抗胰凝乳蛋白酶（Prostate specific antigen -α1-antichymotrypsin complex，PSA-ACT）单克隆抗体（单抗）细胞株，共获得8株稳定分泌PSA-ACT单抗的细胞株，纯化后进行免疫特性鉴定并做单抗配对。选择其中一对单抗，采用辣根过氧化物酶（HRP）催化鲁米诺（lumino）-H2O2 化学发光体系，建立了测定人血清中PSA-ACT浓度的化学发光酶免疫分析方法（CLEIA）。对包被缓冲液、包被抗体浓度、酶标抗体稀释度、温育时间、发光反应时间和免疫反应步骤等实验参数进行了优化。在最佳实验条件下， PSA-ACT浓度在5～40 ng/mL范围内线性关系良好（R2=0.9943），检出限为0.53 ng/mL，批内相对标准偏差（RSD）为4.6%～6.6%，批间RSD为5.7%～8.0%，回收率为95.4%～104.2%，与游离前列腺特异性抗原F-PSA的交叉反应率为0.6%。本方法简单、稳定、灵敏、快速，为开发检测PSA-ACT的CLEIA试剂盒奠定了基础。

关键词 前列腺特异抗原； 前列腺癌； 化学发光酶免疫分析； 辣根过氧化物酶