熊丽红,庄养林,杨莉娜(江西省血液中心检验科,江西南昌330046)
试管血与血袋导管血检测HBsAg结果的比较分析
熊丽红,庄养林,杨莉娜
(江西省血液中心检验科,江西南昌330046)
摘要:目的探讨HBsAg酶联免疫试剂检测试管血和导管血S/CO的差异性。方法厦门新创HBsAg ELISA试剂检测2015年1月1日至2015年4月30日无偿献血者标本17967例,对初次反应性标本用原试管和血袋导管血分别进行双孔复试。结果检测17967例标本,共检测阳性标本143例,阳性率为0.8%。试管血与导管血S/CO≥28有56例,10≤S/CO<28间的有40例,1.5≤S/CO<10的有36例,0.8≤S/CO<1.5的有11例。采用T检验,10≤S/CO<28间的40例和1.5≤S/CO<10的36例,0.8≤S/CO<1.5的11例,导管血S/CO均明显低于试管血。结论除强阳性标本外,导管血S/CO明显低于试管血,为保证血液结果的准确性,对初次反应性处于灰区的标本不适于单独使用导管血进行复查。
关键词:试管血;导管血;HBsAg;S/CO
血站技术操作规程对初次试验有反应性检测标本的后续处理方案1为以同一试验对原血样(或从血袋导管重新取样)做双孔复试。本中心目前对初次反应性标本的后续处理方案为同时对原血样和从血袋导管重新取样分别双孔复试,经观察血袋导管血S/CO明显比原血样低,现就两种血样的检测结果报告如下。
1.1材料2015年1月1日至2015年4月30日本中心无偿献血者血液标本17967例,采用EDTA-Na2抗凝。采血人员在采集血液前进行旁路放血,酶免试管采集5ml血液样本;初次反应性标本由检验科工作人员至待检库从血袋导管取样;对原试管和血袋导管血分别进行双孔复试。
1.2仪器与试剂采用STAR全自动加样系统和FAME全自动酶联检测系统(瑞士Hamilton公司);HBsAg酶免试剂采用厦门英科新创科技有限公司试剂盒。
1.3方法17967例标本首先采用厦门新创公司酶免试剂进行HBsAg检测,对初次试验有反应性的标本剪取血袋导管血,用同种试剂对原血样和血袋导管血分别进行双孔复试。有反应性判断标准:S/CO≥0.8。
1.4统计学处理用EXCEL对数据进行统计学分析,采用T检验(原血样与导管血均取双孔平均S/ CO值),P<0.05为差异有统计学意义。
2.1检测17967例标本,共检测阳性标本143例,阳性率为0.8%。试管血与导管血S/CO≥28有56例,10≤S/CO<28间的有40例,1.5≤S/CO<10的有36例,0.8≤S/CO<1.5的有11例。
2.2 10≤S/CO<28间的有40例,1.5≤S/CO<10的有36例,0.8≤S/CO<1.5的有11例标本具体结果见表1,三组间差异均有统计学意义(P<0.05)。
表1 具体结果(±s)
表1 具体结果(±s)
组别10≤S/CO值<28 1.5≤S/CO值<10 0.8≤S/CO值<1.5 n 40 36 11试管血 导管血 P 20.0±5.20 4.29±2.13 1.09±0.19 18.8±4.83 3.72±2.05 0.95±0.16 2.71×10-60.0007 0.0016
2.3室内质控每次检测均做阴性室内质控和弱阳性质控各一孔,均为北京康彻斯坦生物制品有限公司生产。阴性室内质控检测结果均为阴性。弱阳性质控品浓度为0.2IU/ml,±s(S/CO)为2.41±0.21。
HBsAg的检测是临床诊断乙肝病毒感染的重要手段,也是献血员筛选的项目之一,结果的准确性对于临床诊断及输血安全有举足轻重的影响。近年来随着HBsAg各种检测方法的使用,同一份标本在不同实验室或采用不同的试剂盒有时会得出不一致的结果,出现假阴性或假阳性[1,2],导致同一患者检查结果的混乱,给临床带来困扰,也给医患纠纷和输血安全带来一定的隐患,如何保证检测结果的准确性至关重要。本研究针对献血员检测HBsAg有反应性标本复查模式进行探讨,显示除强阳性标本外,血袋导管血检测HBsAg的S/CO值明显低于试管血S/CO值。
血袋CPD保养液能导致HBsAg检测S/CO值降低[3-10],本中心试管血通过血袋旁路放血,均为血袋血液采集前就进行试管血的采集,试管血不会有血袋保养液稀释的现象。血袋采集过程中血袋要均匀摇动,使采集的血液与血袋保养液充分混匀。血液采集完成后,近端血袋导管中可能稍有保养液冲入,保养液可能会对导管血有稀释作用,影响检测HBsAg的S/CO值,但血袋导管一端封闭,远端导管血不可能与血袋中血液充分混匀,留取复查导管血无或仅微量保养液,影响作用不会过大。
初步认为,导致HBsAg导管血检测HBsAg的S/CO值明显低于试管血S/CO值另一原因可能为脂蛋白黏附特性决定。HBsAg抗原活性属于高浮力密度范围内的脂蛋白类。用CsCl密度梯度离心,表面抗原(小颗粒和管状颗粒)平均密度为1.20g/ cm2.Dane颗粒的密度略高,为1.25g/cm2。纯化的22nm颗粒的平均沉降系数为33~54S,分子量约为2.4~2.5×106。纯化的HBsAg含有类脂质、糖类、脂质、蛋白质及糖蛋白。血液采集完后,血袋静置于冰箱,有利于HBsAg黏附与血袋导管壁上,导致导管血S/CO值明显低于试管血S/CO值。
鉴于血袋导管血检测HBsAg的S/CO值明显低于试管血S/CO值,复查弱阳性标本可能试管血与导管血结果不一致,认为对HBsAg初次反应性处于灰区的标本复查模式不适于单独使用导管血复查,可能导致弱阳性标本的漏检。血袋导管血检测HBsAg的S/CO值偏低原因有待进一步研究。
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·输血与检验·
(收稿日期2015-09-08;修回日期2016-02-15)
DOI:10.3969/j.issn.1674-1129.2016.02.046
中图分类号:R457.1+2,R512.6+2
文献标识码:A
文章编号:1674-1129(2016)02-0251-02