儿童反复肺炎与机体免疫功能和炎性相关因子的关系研究

张立梅

075700　河北省蔚县人民医院儿科



·论著·

儿童反复肺炎与机体免疫功能和炎性相关因子的关系研究

张立梅

075700河北省蔚县人民医院儿科

【摘要】目的研究儿童反复肺炎与机体免疫功能和炎性相关因子的关系。方法选取儿童反复肺炎46例作为反复肺炎组，选取同期查体健康患儿50例作为对照组，抽取受检患儿清晨空腹肘静脉血，比较2组血清免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)水平，并对IgG亚类(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)水平进行测定，比较2组外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD(25)+Treg、CD(19)+、CD4+/CD8+)、炎性因子[血白介素-8(IL-8)、IL-17]和人β防御素(hBD-1、hBD-2)水平，同时测定NK细胞的比例。结果反复肺炎组患儿IgG和IgA水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，反复肺炎组IgM水平低于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。反复肺炎组IgG1水平高于对照组，而IgG2和IgG4水平低于对照组，差异有统计学意义(P>0.05)。2组IgG3水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。反复肺炎组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD(25)+Treg、CD4+/CD8+水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，反复肺炎组CD19+水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。反复肺炎组IL-8、IL-17水平高于对照组，hBD-1、NK细胞水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，2组hBD-2水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论反复肺炎患儿存在免疫球蛋白IgG和IgA、T淋巴细胞、B细胞、NK细胞、hBD-1细胞低水平表达，IL-8和IL-17高水平表达，说明反复肺炎患儿存在体液、细胞免疫功能紊乱，同时呼吸系统防御能力降低，这可能是儿童反复肺炎病程迁延的原因之一。

【关键词】儿童；肺炎，反复；免疫功能；炎性因子；人β防御素

研究发现，肺炎已成为儿童致死的主要病因，由于细菌对抗生素耐药性的升高，其发病率无下降趋势[1-3]。儿童肺炎中反复肺炎由于病因复杂、患儿病情反复，给患儿生长发育和家庭造成一定影响。儿童反复肺炎的病因一般是先天性或获得性呼吸系统解剖异常、先天性心脏病、呼吸道吸入、免疫缺陷、哮喘、支原体肺炎治疗不愈、原发性纤毛不动综合征、囊性纤维化、微量元素缺乏等，其中免疫功能紊乱一直是研究的热点[4]。免疫系统是机体的防护屏障，研究表明，反复肺炎患儿其免疫系统受到不同程度的影响，患者应用增强免疫的中药制剂后患儿免疫球蛋白、CD3+、CD4+T细胞水平明显增高，治疗效果显著[5]。本研究检测反复肺炎儿童外周血免疫球蛋白、T细胞亚群和相关炎性因子和人β防御素(hBD)水平，探讨上述指标与儿童反复肺炎的关系。

1资料与方法

1.1一般资料选取我院2014年12月至2015年12月住院治疗的反复肺炎患儿46例(反复肺炎组)，入选患者均符合“反复呼吸道感染的临床概念和处理原则”[6]，其中男28例，女18例；年龄1～5岁，平均年龄(20.7±2.5)岁；其中1～3岁23例，4～5岁23例；病程0.5～1年，平均病程(0.4±0.3)年；发病时间0.4～4 d，平均发病时间(2.2±0.8)d。选取同期健康查体儿童50例作为对照组，其中男30例，女20例；年龄1～5岁，平均年龄(15.0±2.5)月。2组患儿性别比、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经过医院临床研究伦理委员会审查批准。

1.2入选与排除标准

1.2.1入选标准：①年龄≤5岁；②肺炎发作次数≥2次/年，或肺炎发作次数>3次；③ 2次肺炎发作间隔>7 d；④符合“反复呼吸道感染的临床概念和处理原则”的相关诊断标准；⑤患儿监护人知情同意，并签署知情同意书。

1.2.2排除标准：①原发性纤毛不动综合征，先天性气管、肺、心脏畸形，囊性纤维化和反复吸入患儿；②年龄>14岁；③不符合“反复呼吸道感染的临床概念和处理原则”相关诊断标准；④患儿存在重度营养不良、哮喘、佝偻病等；⑤研究前患儿未服用免疫抑制剂、免疫调节剂及其他可以影响患儿观察指标的药品；⑥除外免疫系统缺陷、贫血等。

1.3观察指标2组患儿均抽取清晨空腹肘静脉血5 ml，置于真空抗凝管中，取其中3 ml，2 500 r/min，离心5 min，取上清用于免疫球蛋白测定、炎性因子和人β防御素，另外2 ml用于T细胞亚群检测。

1.3.1血清免疫球蛋白：采用人免疫球蛋白检测试剂盒(上海基免实业有限公司提供)，采用双抗体夹心法进行检测IgG、IgA和IgM水平。同时应用IgG单抗亚类鉴定试剂盒测定IgG1、IgG2、IgG3、IgG4的水平。

1.3.2外周血T细胞亚群：采用流式细胞仪测定患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg、CD19+、CD4+/CD8+。

1.3.3炎性因子和hBD：检测患者外周血白介素-8(IL-8)、IL-17、hBD-1、hBD-2和NK细胞的水平。

2结果

2.12组血清免疫球蛋白水平比较反复肺炎组患儿IgG和IgA水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);反复肺炎组IgM水平低于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.22组IgG亚类水平比较反复肺炎组IgG1水平高于对照组，而IgG2和IgG4水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。2组IgG3水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表1　2组血清免疫球蛋白水平比较　±s

表22组IgG亚类水平比较

组别IgG1IgG2IgG3IgG4对照组(n=50)5.4±0.82.5±0.60.70±0.300.22±0.05反复肺炎组(n=46)6.0±1.72.0±0.50.60±0.210.15±0.08 t值2.24124.41461.90435.1848 P值<0.05<0.05>0.05<0.05

2.32组淋巴细胞亚群比较反复肺炎组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Treg、NK水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，反复肺炎组CD19+水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3　2组T细胞亚群比较　±s

2.42组炎性因子和hBD水平比较反复肺炎组IL-8、IL-17水平高于对照组，hBD-1细胞水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);2组hBD-2水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4　2组炎性因子和hBD水平比较　±s

3讨论

3.1儿童反复肺炎的发病原因及危险因素儿童呼吸系统具有呼吸频率快、中枢调节能力差、呼吸功能储备能力低的特点。其呼吸道特异性和非特异性免疫功能较弱、咳嗽反射较差，同时纤毛运动差，SIgA、IgG及亚类含量低，巨噬细胞、乳铁蛋白、溶菌酶、干扰素和各种补体含量不足，这就造成儿童易发生肺炎[7，8]。“反复呼吸道感染的临床概念和处理原则”中明确指出儿童反复肺炎多与患儿缺乏锻炼、微量元素缺乏、治疗不当、缺乏护理有关，少数患儿与基础疾病有关[6]。研究发现，小儿反复肺炎多于肺炎支原体有关，感染阳性率为44.34%～57.2%[9，10]，说明肺炎支原体可能是除外基础疾病，导致患儿反复肺炎的主要致病菌。此外，维生素D、铁、锌等元素缺乏也可能是导致儿童反复肺炎的因素之一[11，12]，研究发现，微量元素缺乏可影响机体免疫功能，使儿童易发呼吸道感染[12]。喘息病史、反复上呼吸道感染、湿疹、一过性粒细胞减少症、食物和药物过敏史、被动吸烟、户外活动少等是增加儿童发生反复肺炎的影响因素。

3.2儿童反复肺炎与机体免疫功能的关系机体免疫系统主要由免疫器官、免疫分子和免疫细胞构成，其在免疫应答、调节、耐受中起重要作用。(1)免疫球蛋白中IgG具有调理、激活补体和中和作用；IgA具有黏膜局部抗感染，自然被动免疫的作用；IgM具有激活补体、发挥早期抗感染的作用。肖海妮[13]对30例反复肺炎患儿进行研究发现反复肺炎患儿血清中IgG、IgA水平与正常儿童比较，明显降低(P<0.05)，说明反复肺炎患儿存在细胞免疫功能紊乱，这与本研究结果一致。IgG根据结构不同分为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4亚型，有研究表明，细菌或病毒抗原产生的抗体中IgG1占主导地位，可伴随IgG3的产生[14]。同时本研究还发现，反复肺炎组IgG1水平高于对照组，而IgG2和IgG4水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。(2)淋巴细胞一般分为T细胞、B细胞、NK细胞3个亚群，其中T细胞担负细胞免疫，B细胞担负体液免疫，同时也是抗体合成细胞，NK细胞可直接杀伤靶细胞。三者在病毒感染、自身免疫性疾病等中均有表达水平的改变。本研究中反复肺炎组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Treg、NK水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，反复肺炎组CD19+水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。说明患者T淋巴细胞、NK细胞表达异常，患儿免疫能力较低，而反复肺炎组CD19+水平高于对照组，可能是T淋巴细胞、NK细胞受到病毒和(或)细菌破坏，表达能力下降所致。梁巍等[15]通过对肺炎、反复上呼吸道感染患儿进行细胞免疫研究发现，患儿T淋巴细胞水平明显低于正常儿童，B细胞水平升高，这与本研究结果一致。张静等[5]采用口服中西医结合疗法提高反复上呼吸道感染患儿的免疫力，可以显著改善患儿临床症状，这也说明机体免疫功能在反复肺炎中有重要作用。CD4+CD25+Treg可以抑制免疫系统的功能及相关免疫细胞的活性，从而发挥免疫抑制作用。本研究中反复肺炎组CD4+CD25+Treg水平明显低于对照组(P<0.05)，可能与感染导致T细胞数量减少有关。

3.3儿童反复肺炎与炎性因子的关系IL-8的主要生物学功能是炎性反应中趋化中性粒细胞、T淋巴细胞及嗜碱粒细胞到达病灶部位，中性粒细胞与IL-8接触后到达病灶部位可以释放一系列活性物质，达到杀菌和细胞损伤的目的，同时IL-8对动员T淋巴细胞参与免疫反应有一定的促进作用[16,17]。IL-17是一种促炎因子，具有与受体特异性结合，发挥促进炎症发展、免疫应答等功能[18]。本研究中反复肺炎组IL-8、IL-17水平高于对照组(P<0.05)。说明反复肺炎患儿存在炎性反应。

3.4儿童反复肺炎与hBD的关系hBD是一种阳离子抗菌肽，具有抗菌和抗病毒的作用，参与机体免疫应答，低水平时可以趋化炎性因子表现出抗炎作用，高水平表达时，可以趋化T淋巴细胞引起免疫反应[19]。张涛等[20,21]对反复肺炎婴幼儿血清hBD-1进行研究发现，其表达水平明显低于健康婴幼儿(P<0.05)，而hBD-2水平无明显改变(P>0.05)。本研究中反复肺炎组hBD-1细胞水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，hBD-2水平高于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。说明反复肺炎患儿存在呼吸道防御障碍。

综上所述，反复肺炎患儿存在免疫球蛋白IgG和IgA、T淋巴细胞、B细胞、NK细胞、hBD-1细胞低水平表达，IL-8和IL-17高水平表达，说明反复肺炎患儿存在体液、细胞免疫功能紊乱，同时呼吸系统防御能力降低，这可能是儿童反复肺炎病程迁延的原因之一。

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(收稿日期：2016-01-14)

【中图分类号】R 725.631

【文献标识码】A

【文章编号】1002-7386(2016)09-1333-03

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.09.016