成传述,石长庚,赵仕义
(1.四川省宣汉县东乡镇畜牧兽医站,四川宣汉 636150;2.四川省宣汉县云蒙山合作示范牧场,四川宣汉 636154;3.四川省宣汉县动物卫生监督所,四川宣汉 636150)
宣汉县蜀宣花牛体内寄生虫感染情况调查
成传述1,石长庚2,赵仕义3
(1.四川省宣汉县东乡镇畜牧兽医站,四川宣汉636150;2.四川省宣汉县云蒙山合作示范牧场,四川宣汉636154;3.四川省宣汉县动物卫生监督所,四川宣汉636150)
近几年来,蜀宣花牛寄生虫病呈上升趋势,严重影响了宣汉县养牛业的发展[1]。本文笔者针对蜀宣花牛繁育场和部分养殖专业户所养的蜀宣花牛的体内寄生虫感染情况进行了调查。
1.1粪便样品采集在蜀宣花牛繁育场分别选择犊牛舍、育成牛舍、成年牛舍、产房等不同圈舍中不同年龄的牛,部分粪便样品取自精神沉郁、厌食、喜欢躺卧、腹泻、所排粪便带血和含大量纤维素样薄膜、发育迟缓、进行性消瘦或体重减轻、后期粪便呈黑色的牛。按0~6月、0.5~1岁、1~2岁、3~4岁、4岁以上5个年龄段编为5组,每组随机采集刚排出的粪便样品20~30份。每头受检牛直肠取粪100~150g,装入采样袋中。养殖专业户同样也按不同年龄段分组编号,也选取了部分精神沉郁、厌食、喜欢躺卧、腹泻、所排粪便带血和含大量纤维素样薄膜、发育迟缓、进行性消瘦或体重减轻的牛进行取样。所有粪样均应在采样单上记录好牛的耳标号、年龄,粪样用冷藏箱保存运输,放入4℃冰箱中待查。
1.2检测方法
1.2.1线虫虫卵的检查采用饱和盐水漂浮法检查线虫虫卵。先把粪便样品在采样袋中混合均匀,然后取25 g放入100mL三角瓶中,加入50mL饱和盐水至瓶口,轻轻搅拌均匀后静置2~30 min,用载玻片盖在三角瓶口部沾上漂浮粪渣,然后取下载玻片用盖玻片盖上,镜检,检测线虫卵、球虫卵囊。用测微尺测量虫卵大小,依据有关资料[2-3]进行寄生虫种类鉴定。
1.2.2吸虫、绦虫虫卵的检查采用水洗沉淀法检查吸虫、绦虫虫卵。取搅拌均匀的粪样50g,放入260目棉纶筛兜中加蒸馏水冲洗,直到洗出清亮透明的水为止,再通过60目铜筛过滤出粗物,滤液放入锥形杯中,静置25min,倒出上清液,用竹签挑取沉淀涂片镜检,检测吸虫卵。用测微尺测量虫卵大小,依据有关资料进行寄生虫种类鉴定。
1.3虫卵(卵囊)计数采用麦克马斯特氏计数法和斯陶尔氏法对虫卵(卵囊)进行计数,计算出每克牛粪中的虫卵(卵囊)数量[2]。
1.4培养及鉴定
1.4.1球虫卵囊分离培养及鉴定取有虫卵(卵囊)阳性样品于烧杯中,加入适量清水,用玻璃棒充分捣碎混匀,用铜筛过滤之,收集滤液,经离心机300 r/min离心5min;抛弃上清液,在沉淀物中加入饱和食盐水静置漂浮20 min,再以300 r/min离心5 min;取其上清液,加10倍蒸馏水,最后再以300 r/min离心5 min;弃去上清液,取其沉淀物放到2.5%重铬酸钾溶液培养皿里,置28℃恒温培养箱中培养48h。其间每6h观察卵囊发育状态,直至孢子化。
在孢子化后,取出培养皿中的卵囊液于载玻片上制片,然后置于有测微尺的400倍显微镜下观察孢子化卵囊的结构、形态、色泽、大小。同时,根据卵囊、子孢子、孢子囊等的微结构特征(用油镜观测)、形态、色泽、大小等,依据有关资料[4]进行寄生虫种类鉴定。
1.4.2隐孢子虫的检测与鉴定用配制的饱和蔗糖溶液漂浮法检测,操作步骤如下:取10g样品加适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌均匀,60目铜筛过滤,将滤液用离心机以300r/min离心10min;倒出上清液,在离心沉淀物中加入饱和蔗糖溶液20mL,搅拌均匀后置入离心机中,经300r/min离心10min;离心后取出静置1min,用接种环蘸取离心液表面层液膜涂片,于400倍显微镜下检测,并用测微尺测量卵囊的大小。
用改良抗酸染色法鉴定种类,其操作方法如下:取10g样品加适量的蒸馏水,用玻璃棒搅拌均匀,60目铜筛过滤,将滤液用离心机300r/min离心10min,倒出上清液,在离心管底取出沉淀物放于载玻片上,用铁丝环涂成硬币大小的粪膜,晾干后用甲醇固定,然后用抗酸染色液染色,最后在1000倍油镜下测量卵囊大小。
2.1蜀宣花牛体内寄生虫感染情况本次调查共采集蜀宣花牛粪便样品579份,检出阳性303份,总感染率为52.3%。其中规模养殖场采样279份,阳性106份,感染率为37.99%;养殖专业户采样300份,阳性197份,感染率为65.66%。检测结果见表1。
表1 蜀宣花牛体内寄生虫感染情况
从表1可见,不同地方、不同年龄阶段蜀宣花牛的寄生虫感染率不一样。总的来讲,规模场感染率低于专业养殖户,犊牛感染率高于育成牛和成年牛。感染率最高的是专业养殖户养的犊牛,感染率为81.67%;感染率最低的是规模养殖场4岁以上的牛,感染率为31.67%。
2.2蜀宣花牛原虫感染情况在本次采集的579份蜀宣花牛粪便样品中,原虫阳性127份,总感染率为21.93%,规模养殖场感染率为13.26%,养殖专业户感染率为30%。其中,球虫感染率为22.97%,隐孢子虫感染率为2.41%。各地和各年龄阶段都有球虫感染,以犊牛感染率最高,专业养殖户高于规模养殖场;隐孢子虫主要发生在犊牛和育成牛,成年3岁以上的牛均没检出。检测结果详见表2。
表2 蜀宣花牛体内原虫感染情况
2.3蜀宣花牛蠕虫感染情况579份粪便样品中,蠕虫阳性68份,总感染率为11.74%(68/579),规模养殖场感染率为5.73%(16/279),养殖专业户感染率为17.33%(52/300)。不同地方、不同年龄段蜀宣花牛的蠕虫感染率和感染种类不同,犊牛(1岁以内)主要感染蛔虫,其他年龄的牛主要感染食道口线虫,个别牛感染捻转血矛线虫,吸虫感染主要是肝片吸虫和前后盘吸虫。在规模养殖场和养殖专业户的1~2岁牛粪样品中,有3份样品同时检出线虫卵和吸虫卵,其中规模场占2份,养殖专业户占1份。检测结果详见表3。
表3 蜀宣花牛体内蠕虫感染情况
2.4蜀宣花牛粪便卵囊数统计球虫OPG值在不同地方都有较高的感染,蜀宣花牛各个年龄阶段都有感染,最高OPG值出现在专业养殖户1岁以内的犊牛(犊牛有临床症状);线虫EPG值只有在规模养殖场3岁以上的牛身上没有检出,最高EPG值出现在专业养殖户6月龄~1岁的牛(来自有临床症状的牛);吸虫EPG值在规模养殖场0~6月龄、6月龄~1岁和养殖专业户0~6月龄的牛身上都没有检出,最高EPG值出现在养殖专业户4岁以上的成年牛身上。EPG值最高值为1 000,全部来自有贫血、血便、精神不振、食欲下降、腹泻的牛,最低值为100。统计结果详见表4。
表4 蜀宣花牛粪便卵囊数统计
2.5蜀宣花牛体内寄生虫混合感染与单纯感染情况
由表5分析可知:规模养殖场和养殖专业户都存在寄生虫交叉混合感染的情况,混合感染率分别是20.83%(15/72)、46.60%(48/103)。养殖专业户所养蜀宣花牛的混合感染严重,4岁以上的混合感染率达到90.90%,感染寄生虫少则2种,多则4种。
2.6蜀宣花牛体内寄生虫种类在所采集的579份样品中,检测出的虫卵有犊牛蛔虫、食道口线虫、吸虫、球虫等,球虫分别是斯氏艾美耳球虫、椭圆艾美耳球虫,吸虫有肝片吸虫、前后盘吸虫。
3.1寄生虫的直接危害
3.1.1掠夺蜀宣花牛草料的营养,产生毒素,破坏机体组织,导致牛生长速度下降、饲料利用率降低,严重时引起死亡;易继发细菌感染,造成疾病诊断困难,增加用药成本。
3.1.2低死亡率造成养殖业主对驱虫工作有所忽视。无论体内寄生虫还是体外寄生虫,它们在致病过程中所产生的症状及危害都是渐进的、缓慢的,一般不会像细菌性、病毒性疾病那么猛烈、突然。但是,寄生虫感染可使育成牛生长速度下降8%~15%,饲料利用率下降13%~25%,对养殖效益影响极大。
3.1.3寄生虫病的存在使牛对细菌性疾病易感,比如肠道蛔虫感染会使细菌性肠炎发病率增加。蛔虫移行至肺脏或后圆线虫感染,会加重呼吸综合征的症状;蛔虫移行至肝脏或肝片吸虫感染,会降低肝脏的解毒能力,引发黄疸性疾病。
表5 蜀宣花牛体内寄生虫混合感染与单纯感染情况
3.1.4寄生虫感染会增加临床诊断的难度。蛔虫、肾虫移行到肺脏或后圆线虫感染,会引起咳嗽、气喘等呼吸道症状,易与病原微生物引起的呼吸道疾病混淆。蛔虫寄生于肠道引起的腹泻和球虫造成的腹泻易与病毒性、细菌性腹泻混淆。肾虫病引发的后躯不能负重、跛行,易与营养缺乏、风湿等症混淆。
3.1.5寄生虫病的存在会造成临床用药不准确。由于习惯思维的影响,临床上出现腹泻症状就立即选用抗菌止痢药物,出现呼吸道症状就认为是细菌、病毒感染,这样往往会造成治疗上的不及时和误诊。
3.2防控建议宣汉县所有蜀宣花牛养殖场应当根据牛群状况制定出综合防疫措施,定期驱虫,及时清扫牛粪,做好圈舍和环境的清洁卫生,采用发酵等方法无害化处理粪便,选用高效环保的驱虫药品对牛体定期驱虫。放牧要到清洁卫生之地,饮水要用清洁卫生的水,或对水消毒后才给予牛饮用,同时加强饲养管理。这样方可减少寄生虫病的发生,保障蜀宣花牛养牛业的健康发展。
参考文献:
[1]徐发荣,赵景义,等.北京地区奶牛寄生虫病感染情况的调查[J].中国兽医杂志,2011,30(6):173-174.
[2]秦建华,李国清.动物寄生虫病学实验教程[M].中国农业出版社,2007:6-10.
[3]赵其平,韩红玉,等.上海地区奶牛球虫病感染现状调查[J].畜牧与兽医,2007(7):9-15.
[4]金兰梅,伍清林,等.江苏部分地区奶牛球虫病流行情况调查[J].中国奶牛,2010(7):9-15.
作者简介:成传述(1965—),男,四川省宣汉县人,大学文化,兽医师,现任宣汉县东乡镇畜牧兽医站站长。
收稿日期:2015-10-09
中图分类号:S852.7
文献标识码:A
文章编号:1001-8964(2016)02-0024-03