双叶制剂生产工艺研究

王莲，肖继椿，田垚，王岚，张荣泉（天津市医药科学研究所，天津300020）



双叶制剂生产工艺研究

王莲，肖继椿，田垚，王岚，张荣泉*
（天津市医药科学研究所，天津300020）

摘要：建立功能食品双叶颗粒的生产工艺。以柿叶与山楂叶为主要原料，采用L9（34）正交试验筛选最佳的原料提取及生产工艺，制备成为双叶颗粒。双叶制剂的最佳提取条件为：提取溶剂纯净水，提取时间1.5 h，提取固液比为1∶8（g/mL），提取次数为3次；最佳生产工艺为：制剂辅料选择淀粉、糊精和糖粉，配比1∶1∶1（g∶g∶g），使用65 %乙醇作为润湿剂制剂。按照试验确定的最佳工艺参数，可制备得到质量稳定、服用方便的功能食品-双叶颗粒。

关键词：柿叶；山楂叶；生产工艺

柿叶系柿树科（Ebenaceae）柿树属（Diospyros）植物柿（Diospyros kaki L.f.）的新鲜或干燥叶子，具有清热解毒、润肺强心、镇咳止血、抗癌防癌等多种医疗保健功能[1]；山楂叶系蔷薇科植物山里红（Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.）或山楂（Crataegus pinnatifida Bge.）的干燥叶，能够消食健胃、行气散瘀[2]。我国是世界上最主要的柿树和山楂树生产国，二者叶片资源十分丰富。但是长期以来，人们对于山楂树和柿树的利用主要集中于果实之上，大量的叶片资源易被忽视，多以堆成农家肥、喂牛羊或放火烧掉，难以得到有效的利用及其开发。本文特提出对者易被忽视的叶片资源配方提取制粒工艺，探讨以二叶片的提取物为原料配以辅料，通过工艺试验研究，研发制备出具有防治高脂血症及预防动脉粥样硬化功能且质量稳定、服用方便的功能食品双叶颗粒。

1　材料与仪器

1.1材料与试剂

柿叶与山楂叶：均产自天津市蓟县黄崖关，经鉴定为柿科植物柿的干燥叶及蔷薇科植物山楂的干燥叶，自然晾干。

微晶纤维素：辽宁奥达制药有限公司；乳糖：DAVISCO FOODS INTERNATIONAL.INC；玉米淀粉：河北海玉食品有限责任公司；糊精：辽宁奥达制药有限公司；砂糖：广东恒福糖业集团有限公司；粉碎，过100目筛网。

甲醇（优级纯）、无水乙醇、苯、石油醚均为分析纯：天津市化学试剂批发公司；聚酰胺粉（100-200目）：江苏长丰化工有限公司；芦丁标准品（10080-200707）：中国药品生物制品鉴定所。

1.2仪器与设备

SPECORD 210 PLUS紫外可见光分光光度计：德国耶拿；AB204-E电子天平（精确值0.000 1 g）：METTLER TOLEDO；KQ-100超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司；DL-203B电热干燥箱：天津实验仪器厂；LDZ5-2低速自动平衡离心机：北京京立离心机有限公司。

2　方法

2.1双叶颗粒的制备

将采集得到的柿叶、山楂叶分别干燥粉碎为粗粉，用适当溶剂进行煎煮提取，提取液浓缩为浸膏，加入规定浓度与用量的润湿剂，搅拌制软材，14目筛网制粒，60℃干燥后整粒，并筛除细粉，备用。

2.2提取工艺研究

柿叶、山楂叶均为叶片型原料，纤维含量较多，直接制剂服用，功效成分不易释出，故拟采用纯净水作为提取溶剂，对干燥后的柿叶和山楂叶进行煎煮提取，浓缩成为浸膏后进行制剂。本研究以双叶浸膏的总黄酮含量作为考察指标，采用正交试验法进行统计分析，筛选原料最佳提取工艺。

根据柿叶、山楂叶功效成分的性质，针对提取时间、提取固液比、提取次数3个主要影响因素，选用L9（34）正交试验筛选最佳水提工艺，正交试验因素水平见表1。

表1原料提取工艺试验因素水平表Table 1 The factors and levels of the raw material extraction experiment

根据设定的因素和水平，对柿叶和山楂叶进行提取与浓缩，制备浸膏，以其总黄酮含量作为考察指标进行统计分析。

2.3制剂工艺研究

颗粒剂产品的颗粒成型性受到多方面条件的影响，其中原辅料、溶媒等影响较大。本部分试验以干燥后的柿叶与山楂叶的提取浸膏为主料，考察辅料为淀粉（D）、糊精（H）、糖粉（T）、乳糖（R）、微晶纤维素（W），使用不同浓度的食用乙醇作为润湿剂进行制剂，通过L9（34）正交试验筛选最佳制剂工艺配方，正交试验因素水平见表2。

为判定各因素水平对制粒过程中颗粒成型的影响，以成品率、溶化性、粘网程度、粒型状况等作为考察指标，量化为分数值进行统计分析。

表2制剂工艺试验因素水平表Table 2 The factors and levels of the preparation experiment

表3制剂工艺试验量化分值Table 3 The quantitative score of the preparation experiment

2.4总黄酮含量测定

柿叶和山楂叶中含有丰富的黄酮类化合物，文献报道可有效调节体内脂代谢功能，故本文将总黄酮含量作为该颗粒质量控制的重要标志成分。

2.4.1芦丁标准曲线制作

精密称取芦丁对照品约20.0 mg，加甲醇溶解并定容至100 mL，得芦丁对照品溶液。分别吸取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL芦丁对照品溶液于25 mL量瓶中，加水至6 mL，加入5 %亚硝酸钠溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加10 %硝酸铝溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠溶液10 mL，摇匀，加水至刻度，放置15 min，以0.0 mL对照品溶液制得的溶液作为空白，于波长510 nm比色测定，进行线性关系考察，计算回归方程。2.4.2供试品总黄酮含量测定

依据确定的最佳工艺提取了3批浸膏，按照制剂工艺制成双叶颗粒（批号为：201401、201402、201403）。精密称取颗粒约1.0 g，置索氏提取器中，加入石油醚加热回流提取至提取液无色，弃去石油醚液，样渣挥去石油醚，转移至具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷至室温，用甲醇补足重量，摇匀，离心，取上清液为供试品溶液，并于波长510 nm处比色测定，计算总黄酮含量。

3　试验结果

3.1提取工艺研究

柿叶与山楂叶水提工艺的正交试验结果及方差分析见表4和表5。

表4原料提取工艺试验正交试验设计和结果Table 4 The orthogonal design and results of the raw material extraction experiment

表5原料提取工艺试验方差分析Table 5 The ANOVA results of the raw material extraction experiment

通过对正交试验结果进行统计分析，筛选出柿叶和山楂叶的最佳水提工艺为A2B2C3，即提取时间1.5 h，提取固液比为1∶8（g/mL），提取次数为3次。其中，提取次数对总黄酮提取率影响最大，其次是提取固液比，相对影响最小的是提取时间。

3.2制剂工艺研究

选择最佳制剂工艺配方的正交试验结果及方差分析结果见表6和表7。

表6制剂工艺试验正交试验设计和结果Table 6 The orthogonal design and results of the preparation experiment

续表6制剂工艺试验正交试验设计和结果Continue table 6 The orthogonal design and results of the preparation experiment

表7制剂工艺试验方差分析Table 7 The ANOVA results of the preparation experiment

正交试验筛选出的最佳制剂工艺为A1B2C1，即辅料选择淀粉、糊精和糖粉，配比1∶1∶1（g∶g∶g），使用65 %乙醇作为润湿剂制剂，其中，不同辅料配比对制剂工艺影响最大。按照确立的制剂处方及工艺制备双叶颗粒，效果良好。

3.3总黄酮含量测定

3.3.1芦丁标准曲线

以吸光度（A）为纵坐标，芦丁对照品溶液浓度（μg/mL）为横坐标绘制芦丁标准曲线（图1），线性回归方程为y＝0.012 8x－0.005 3（R2＝0.999 7）。结果表明，芦丁试样在0.00 μg/mL～45.60 μg/mL浓度范围内与吸光度线性关系良好。

图1芦丁标准曲线图Fig.1 The standard curve of rutin

3.3.2供试品总黄酮含量测定

对双叶颗粒试样分别进行比色测定，计算总黄酮含量，结果见表8。

表8供试品测定结果Table 8 The results of total flavonoids detected

4　结论

1）本文以柿叶和山楂叶为主要原料，通过试验确定了双叶制剂的最佳提取条件为：提取溶剂纯净水，提取时间1.5 h，提取固液比为1∶8（g/mL），提取次数为3次；最佳生产工艺为：制剂辅料选择淀粉、糊精和糖粉，配比1∶1∶1（g∶g∶g），使用65 %乙醇作为润湿剂进行制剂。以此工艺参数制备得到的功能食品双叶颗粒色泽均匀一致，粒型适宜，质量稳定，为柿叶、山楂叶的配方配伍及加工利用提供了一条新途径。

2）总黄酮的提取方法多为醇性溶剂提取[3-4]，其优点是提取效率较高，但也存在提取过程醇消耗量大、生产成本高、易产生溶剂残留等缺点；本文所采用水提法提取率相对较低，但其生产成本低廉、操作简便、无溶剂残留，且安全生产性能高，在工业化大生产中更具有优势。

3）本文以L9（34）正交试验确定原料叶片的最佳水提工艺为提取时间1.5 h，提取固液比为1∶8（g/mL），提取次数为3次，虽然提取次数增加有可能进一步提高原料的提取率（包括黄酮类等），但考虑到实际生产条件及能耗消耗等问题，故确定最佳提取次数为3次。

4）提取浸膏在制备颗粒的过程中，需考虑浸膏制成软材的均匀性问题，经试验反复摸索，需要将浸膏热熔，再加入适量的食用酒精，当呈现稠状混合膏状，方可加入一定比例的辅料，制作软材，颗粒的均匀性才可得以保障，否则易出现颗粒色泽不均匀，干燥后颗粒总黄酮含量的测定结果差异较大的问题。

参考文献：

[1]王燕.柿叶中黄酮类化合物的研究进展[J].亚太传统医药,2011,7 (4):173-174

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M] .北京:中国医药科技出版社,2015:32

[3]王宁,李远志,徐莉珍,等.超声波法提取柿叶总黄酮的工艺研究[J].现代食品科技,2008,24(7):687-690

[4]许瑞波,赵跃强,鲁升丽,等.山楂叶黄酮的超声提取、精制及抗氧化性研究[J].食品研究与开发,2007,28(4):64-69

欢迎订阅2016年《食品研究与开发》

《食品研究与开发》是由天津市食品研究所有限公司和天津市食品工业生产力促进中心主办，国内外公开发行的食品专业科技期刊，于1980年创刊，现为半月刊，采用国际流行开本大16开。其专业突出，内容丰富，印刷精美，是一本既有基础理论研究，又包括实用技术的刊物。本刊已被“万方数据库”、“中文科技期刊数据库”、《乌利希期刊指南》、美国《化学文摘》、英国国际农业与生物科学研究中心（CABI）等知名媒体收录，并被列入“中文核心期刊”、“中国科技核心期刊”、RCCSE中国核心学术期刊（A）。主要栏目有：基础研究、分离提取、食品研发、工艺技术、天然产物、检测分析、生物工程、营养保健、贮藏保鲜、质量安全、专题论述、食品机械等。

本刊国内统一刊号CN 12-1231/TS；国际刊号ISSN 1005-6521；邮发代号：6-197。全国各地邮局及本编辑部均可订阅。从本编辑部订阅全年刊物享八折优惠。2016年定价：30元/册，全年720元。

本编辑部常年办理邮购，订阅办法如下：

（1）邮局汇款。地址：天津市静海县静海经济开发区南区科技路9号；收款人：《食品研究与开发》编辑部；邮政编码：301600。

（2）银行汇款。开户银行：工商银行静海支行

账号：0302095119300204171；单位：天津市食品研究所有限公司。

《食品研究与开发》编辑部

E-mail：tjfood@vip.163.com

电话（传真）：022-59525671

Study on Production Technology of Shuangye Preparation

WANG Lian，XIAO Ji-chun，TIAN Yao，WANG Lan，ZHANG Rong-quan*
（Tianjin Institute of Pharmaceutical and Medical Science，Tianjin 300020，China）

Abstract：To develop a production technology of Shuangye granule. Persimmon leaf and hawthorn leaf were used as raw material to prepare Shuangye granule，and the optimum extraction and production techniques were

beselectedby L9（34）orthogonaltest.Theoptimumextractionconditionof Shuangyepreparationwas：theextraction solvent was purified water，extraction time 1.5 h，extraction solid-liquid ratio 1∶8（g/mL），extraction times 3；

and the optimum production technology was：the excipients were starch，dextrin and powdered sugar，

excipients radio 1∶1∶1（g∶g∶g），the wetter was 65 % ethanol. The granule with stable quality and easy taking can be prepare by the optimal production technology.

Key words：persimmon leaf；hawthorn leaf；production technology

收稿日期：2015-12-10

*通信作者：张荣泉（1964—），男，研究员，研究方向：中药、天然药物的开发及研究、保健食品的研究开发申报及生产。

作者简介：王莲（1982—），女（汉），助理研究员，硕士，主要从事天然产品和保健食品的研发和质量标准研究。

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.03.032