武军元
(1.塔里木大学,新疆阿拉尔843300;2.新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室,新疆阿拉尔843300)
新疆南疆地区犬戊型肝炎病毒的血清学调查
武军元1,2
(1.塔里木大学,新疆阿拉尔843300;2.新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室,新疆阿拉尔843300)
为了解新疆南疆地区犬戊型肝炎病毒(HEV)感染的情况及流行特点,为其科学防控提供参考依据,采用酶联免疫吸附试验法,对新疆南疆地区采集的160份犬血清进行HEV IgG抗体检测,并比较不同来源、品种、年龄及性别犬HEV IgG抗体的阳性率差异。结果表明:160份被检血清中有21份HEV IgG抗体呈阳性,阳性率为13.13%。其中,农村饲养犬的阳性率为25.46%(14/55),城市家养犬为6.67% (7/105),差异极显著(P<0.01);5岁以上、2~5岁和2岁以下犬的抗体阳性率分别为10.71%、16.84%和5.41%,差异显著(P<0.05);贵宾犬、金毛猎犬、京巴犬、牧羊犬和其他品种犬的抗体阳性率分别为25.71%、6.52%、7.90%、0%和18.18%,金毛猎犬和金巴犬间差异不显著(P>0.05),其他各品种间差异极显著(P<0.01);雄性犬和雌性犬的抗体阳性率分别为19.77%和5.41%,差异极显著(P<0.01)。新疆南疆地区犬已受到HEV感染,应加强人犬之间的公共卫生防护。
犬;戊型肝炎病毒;流行病学;酶联免疫
戊型肝炎(hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)感染引起的一种经粪口途径传播的疾病。HE是一种新出现的人兽共患病[13],广泛分布在亚、非及美洲等发展中国家[4],该病预后良好,但是孕妇感染后死亡率高达20%~25%[5-6]。近年来,有研究证实,猪、羊、牛等多种与人类密切接触的动物可以感染HEV,并且在鸡[7]、鼠[8]、野猪[9]、雪貂[10]、蝙蝠[11]和鳟鱼[12]中鉴定出HEV的变种。新疆是我国HE的高发地区,曾在1988—1998年爆发流行,是迄今为止世界上规模最大的一次流行,共计发病119 280例,死亡707例[13]。曾有研究表明,新疆地区猪感染HEV的阳性率高达61.84%[14],当地绵羊HEV感染比较普遍[1517]。犬是人们密切接触的动物,在新疆地区养殖数量逐年增加,但当地犬感染HEV的情况目前未见报道。为了解新疆南疆地区犬戊型肝炎病毒感染的情况及流行特点,以期为其科学防控提供科学依据,对新疆南疆地区犬进行血清HEV IgG抗体检测,并对不同来源、不同品种、不同年龄及不同性别犬感染HEV的差异性进行比较。
1.1血清及试剂盒
2015年1—10月,从新疆南疆地区宠物门诊采集犬血液,每份采集3mL并分离血清,-20℃保存,共计血清样品160份,其中,农村饲养犬55份,城市家养犬105份,所有样品均有品种、年龄和性别记录。戊型肝炎病毒IgG抗体双抗原夹心法酶联免疫诊断试剂盒,购自北京万泰生物有限公司。
1.2抗体检测
按照试剂盒说明书检测血清样品中的戊型肝炎病毒抗体,在BIO-TeK酶标仪上读取OD450/620nm值,临界值=阴性对照孔OD均值NC+0.12。样品OD值≥临界值者为HEV抗体阳性,OD值<临界值者为HEV抗体阴性。
1.3统计分析
检测数据采用Spss 19.0软件进行统计分析,比较不同来源、品种、年龄和性别犬HEV感染率的差异。
从表中看出,在160份检测血清中有21份HEV IgG抗体呈阳性,阳性率达13.13%。经χ2检验,农村饲养犬和城市家养犬间抗体阳性率差异极显著(P<0.01)。
在不同年龄犬中,2~5岁犬的HEV IgG抗体阳性率最高,为16.84%;>5岁犬次之,为10.71%;<2岁犬最低,为5.41%。经χ2检验,不同年龄组间阳性率差异显著(P<0.05)。
在不同品种犬中,贵宾犬的HEV IgG抗体阳性率最高,为25.71%;金毛猎犬为6.52%;京巴犬为7.9%;牧羊犬无感染,其他品种为18.18%。经χ2检验,除金毛猎犬和金巴犬之外,其他各品种间差异极显著(P<0.01)。
表 新疆南疆地区犬HEV IgG抗体检测结果Table Result of anti-HEV IgG in Nanjiang Region of Xinjiang
在不同性别犬中,雄性的HEVIgG抗体阳性率高达19.77%,雌性为5.41%,经χ2检验,不同性别犬间差异极显著(P<0.01)。
戊型肝炎是一种由戊型肝炎病毒感染引起的人兽共患传染病,经口感染是戊型肝炎病毒感染的主要途径[18],至今,戊型肝炎没有特效的治疗办法,唯一可行的办法是预防[19]。近年来,大量研究证实多种与人类有密切接触的动物均可以感染HEV,并且动物中分离的HEV与人体内分离的HEV具有RNA序列的高度相似性[20]。目前,家犬与人类的接触尤为密切,鉴于家犬对HEV的易感性[21-22],以及家犬养殖数量逐年增加的趋势,家犬HEV感染的防控已成为公共卫生的安全隐患,因此,应加强对犬HEV感染的流行病学监测。
检测结果表明,新疆南疆地区160份犬血清的戊型肝炎抗体阳性率为13.13%(21/160),表明当地与人类关系密切的家犬已经存在HEV感染。农村饲养犬的感染率达25.46%,明显高于城市家养犬的感染率(6.67%),可能与HEV经消化道传播的途径和家犬所处的饲养环境有关,相对于城市来讲农村家犬的养殖环境普遍较差,且处于散养,这种养殖方式使得家犬接触HEV的机会明显增多,因此,农村饲养犬具有相对较高的感染率,与武军元等[16]报道的当地散养绵羊感染HEV较高的特性相一致;在品种感染中,除金毛猎犬和金巴犬的阳性率差异不显著(P>0.05)外,其他各品种间差异极显著(P<0.01),说明家犬对HEV的感染呈现出品种间差异,该研究结果可以作为探讨不同品种犬对HEV易感性的参考,需进一步深入研究家犬品种与HEV易感性的规律;家犬的年龄与HEV IgG阳性率明显相关,5岁以上和2~5岁家犬的感染率显著高于2岁以下家犬,与Masaharu T等[23]研究即日本大多数猪感染HEV与年龄呈正相关的结论一致。由于目前尚没有动物用戊型肝炎疫苗获准上市,且母源抗体在3个月龄以后滴度下降,2岁以上犬抗体呈现阳性应是自然感染的结果;在性别感染的差异性比较中,雄性犬的感染率(19.77%)极显著(P<0.01)高于雌性犬(5.41%),可能与不同性别犬的生活习性有关。
本次调查在有限数量样品的条件下得到上述结果,虽不能准确反映当地家犬感染HEV的真实情况,但表明当地家犬受到HEV感染。另外,采用人用戊型肝炎病毒抗体检测试剂盒从犬血清中检测到抗人戊型肝炎病毒抗体,进一步提示犬可能被人源HEV感染。戊型肝炎作为一种新型的人畜共患病,尚需要进一步分离鉴定其病原的基因型,以确定犬HEV与本地区人HEV的亲缘关系,进而为研究HEV的致病机理以及抗HEV疫苗的研制提供参考。
致谢:感谢新疆阿克苏地区动物疫病控制诊断中心康强在样品采集中的帮助。
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(责任编辑:冯 卫)
Seroepidemiological Survey on Hepatitis E Virus Infection of Dogs in Nanjiang Region of Xinjiang
WU Junyuan1,2
(1.Tarim University,Alar,Xinjiang 843300;2.Key Laboratory of Tarim Animal Husbandry Science and Technology,Xinjiang Production &Construction Corps,Alar,Xinjiang843300,China)
To evaluate the infection rate of Hepatitis E virus among dogs in Nanjiang Region of Xinjiang and give an scientific reference for HEV prevention,a total of 160dog serum samples collected in Nanjiang Region of Xinjiang were tested by ELISA for the presence of IgG antibodies against hepatitis E virus(HEV),and the positive rate differences were compared based on sample sources,breeds,ages and genders by Chi-square test.The results showed that the total positive rate was 13.13%.21out of 160 subjects were anti-HEV IgG positive,of which 25.46%(14/55)was in rural feeding dog and 6.67% (7/105)was in urban feeding dog,the difference was highly significant(P<0.01);According to the ages,the positive rates of over five years,2to 5years and under 2years old dogs were 10.71%,16.84% and 5.41%,respectively,there were significant difference among each age groups(P<0.05);According to the breeds,the positive rates of poodle,golden retriever,jinba dog,sheepdog and others were 25.71%,6.52%,7.90%,0%and 18.18%,respectively,the difference was markedly significant(P<0.01)except golden retriever and jingba dog;According to the genders,there was also a visible difference(P<0.01)between male dogs(19.77%)and female dogs(5.41%).The data confirmed that dog HEV was widespread in Nanjiang Region of Xinjiang,public health protection should be strengthened between human and dog.
dog;Hepatitis E virus;epidemiology;ELISA
S829.2;R512.99
A
1001-3601(2016)02-0075-0100-03
2015-11-26;2016-01-17修回
国家自然科学基金项目“新疆南疆地区绵羊戊型肝炎病毒感染性克隆的构建与表达研究”(No.31160513)
武军元(1980-),男,副教授,博士,从事人兽共患病学研究。E-mail:wjyn-w@126.com