外源性一氧化氮对骨折患者内皮细胞及血小板功能的影响

刘先明，袁丹，黄勇全，杨德猛，王长庚，周旭东

(萍乡市人民医院，江西萍乡337000)



外源性一氧化氮对骨折患者内皮细胞及血小板功能的影响

刘先明，袁丹，黄勇全，杨德猛，王长庚，周旭东

(萍乡市人民医院，江西萍乡337000)

摘要：目的观察外源性一氧化氮(NO)对骨折患者血管内皮细胞和血小板功能的影响。方法将100例骨折手术患者随机分为观察组、对照组各50例，术后均予常规抗血栓治疗，观察组另吸入0.001%的NO 1次/d，共治疗1周。治疗前后检测内皮细胞功能指标[血浆活化蛋白 C(APC)、可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)及血管性血友病因子(vWF)]和血小板功能指标[血小板聚集率、P-选择素(CD62P)和血小板颗粒膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)]，并观察血栓发生率。结果两组治疗前各指标差异均无统计学意义(P均>0.05)，治疗后除血浆APC升高外其余指标均降低(P均<0.05)，且观察组变化更明显(P均<0.05) ；观察组血栓发生率2%，低于对照组的10%，P<0.05。结论外源性NO吸入有利于抑制血小板和血管内皮细胞活化，降低骨折患者术后血栓形成率。

关键词：多发骨折；外源性一氧化氮；内皮细胞；血小板；静脉血栓

血栓是骨折术后的常见并发症，严重者下肢血栓后可出现肺栓塞或脑栓塞[1]。血小板和内皮细胞活化是血栓的起始步骤，如能抑制二者活化，可有效抑制血栓形成，提高患者的术后安全性。研究表明[2]，一氧化氮(NO)可抑制血管内皮细胞活化，起到降低动脉血压的作用。2013年9月～2015年1月，我们在常规治疗基础上联合吸入外源性NO对骨折术后患者进行干预，探讨其对血栓形成的抑制作用。现报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料选择萍乡市人民院同期收治的骨折患者100例，男51例、女49例，年龄(62.3±2.9)岁；其中行切开复位内固定术53例，全髋关节置换术47例。排除有出血高危因素者，有抗血小板和抗凝药物治疗禁忌证者，入院1个月内有质子泵抑制剂服药史、血小板颗粒膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)受体拮抗剂服药史者，血小板计数<100×109/L者，肝肾等重要脏器功能不全和不配合研究者。将患者随机分为观察组和对照组各50例，其临床资料具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，患者及家属均知情同意。

1.2治疗方法两组术后8 h开始皮下注射低分子肝素钠2 500 U，1次/d。观察组术后第2天用JC502-BG95 NO治疗仪治疗，吸入氧浓度80%、NO浓度0.001%；其间监测血流动力学指标，维持其稳定。两组疗程均为1周。

1.3内皮细胞功能检测治疗前后取静脉血，采用ELISA法检测血浆活化蛋白 C(APC)、可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)及血管性血友病因子(vWF)，试剂盒购自美国RD公司，按说明书操作。

1.4血小板功能检测治疗前后取静脉血，采用比浊法测定腺苷二磷酸(ADP)诱导血小板聚集率，采用ELISA 法检测血浆P-选择素(CD62P)和GPⅡb/Ⅲa，试剂盒购自美国RD公司，按说明书操作。

1.5血栓形成情况观察采用西门子S2000彩超仪，探头频率50～100 MHz，分别探测双下肢血栓形成情况。

2结果

2.1两组内皮细胞及血小板功能比较见表1。

2.2两组血栓发生率比较观察发生腓肠肌静脉静脉血栓1例，血栓发生率2%；对照组发生腓肠肌静脉血栓2例，腘静脉、胫后静脉、胫前静脉各1例，血栓发生率10%，观察组静脉血栓发生率明显低于对照组(χ2=12.21，P<0.05)。

3讨论

临床上多采用低分子肝素钠(钙)预防术后血栓的发生，但对血小板的干预力度不够，并且增加术后出血的风险[3]。

表1　两组内皮细胞及血小板功能比较±s)

注：与同组治疗前比较，*P<0.05；与对照组同时点比较，#P<0.05。

NO是一种多功能信号分子和细胞毒性因子[4]，其在血栓防治中的作用尚不明确。基于NO在高血压和冠心病防治中的作用[5～7]，推测其可用于防治下肢深静脉血栓。因此，本研究选取骨科下肢手术后患者作为研究对象，观察NO对血管内皮细胞功能和血小板功能的影响。结果发现，除APC外，NO干预后观察组血小板活化相关指标和内皮细胞活化相关指标均明显降低，最终血栓发生率也降低，说明其疗效是可靠的。APC是环鸟甘酸(CGMP)的激活物，其升高可激活一氧化氮合酶(NOS)下游通路，导致舒血管因子升高[8～10]。吸入外源性NO的作用机制包括：①NO可与细胞内血红蛋白结合, 形成亚硝酞血红蛋白, 激活鸟苷酸环化酶,使细胞内CGMP浓度增加,激活蛋白激酶G,从而降低细胞内钙离子浓度，松弛血管平滑肌[9～11]。②NO可与血小板表面的膜受体结合，启动CGMP通路，抑制血小板骨架蛋白变化，抑制胞吞胞吐作用，最终导致聚集和释放降低[12～14]。另外，本研究未发现吸入外源性NO所致的不良反应，可能与吸入浓度较低有关。

综上所述，外源性NO吸入有利于抑制血小板和血管内皮细胞活化，降低血栓形成率，且具有较高的安全性。但是，本研究纳入样本量不足，且选用NO浓度较低，并非最适浓度。因此，我们将采用动物实验对NO的吸入浓度及时间进行比较，以探讨更有效的治疗浓度和时间。

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(收稿日期：2015-11-23)

中图分类号：R683

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)10-0088-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.040