刘 瑛,王斌全,张克军,李 伟,冯 彦,张 飞
(山西医科大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科,太原 030001)
ChinJAllergyClinImmunol,2016,10(4):381- 384
真菌是自然界存在的微生物之一,据生物学家统计人类日常生活环境中存活约10万余种真菌,真菌成熟后其孢子与菌丝碎片主要由风力传播,特应性体质者反复吸入致敏真菌孢子可能诱发真菌过敏性鼻炎[1]。大部分致敏真菌孢子常年在空气中存在,故调查其播散规律十分重要。20世纪90年代初太原市曾开展真菌调查,但近20年来气候发生变化,故本研究再次开展太原市气传致敏真菌调查,为真菌过敏性鼻炎的防治提供依据。
真菌采集
曝片法:制备伞蓬式真菌取样器[2],采用重力沉降法每日定时曝片, 24 h回收并放置新片。参照真菌标准片及《中国气传真菌彩色图谱》,显微镜(OLYMPUS CH-B145-T)下阅片。计数每日真菌孢子的数量,调查结束后总计全年的真菌种类及数量。具体操作步骤参照《变态反应学技术》(第2版)。
曝皿法:采用灭菌沙保培养基于每月初放置空气中暴露2~3 min,放置地点与曝片法相同,取回后室温(23~25 ℃)下培养,定期观察菌落生长情况。当相邻菌落生长即将融合,分离菌落并鉴定。具体操作步骤参照《变态反应学技术》(第2版)。
真菌标准片制备
预先参加华中科技大学同济医院举办全国真菌调查培训班,在北京协和医院乔秉善教授亲授下现场制备常见的气传真菌标准片,以供真菌鉴定时参照。调查中未知菌属(收集真菌结构不清、图谱上尚无记载等),保留完整标本,送至华中科技大学同济医院变态反应科协助鉴定。调查中未知菌数量占全年真菌总数<5%为佳,>50%本次调查无意义。
气象记录
调取山西省气象网站“太原市每日短期气象学资料”,记录各气象要素(平均温度、相对湿度、风力、降雨量)。
统计学处理
气传真菌数量与气象数据相关性采用Pearson相关性分析。
太原市全年气传真菌调查结果
太原市2015年3月至2016年2月全年采用曝片法收集的气传真菌共14种属,依次为平脐蠕孢属、链格孢属、内脐蠕孢属、棒孢属、黑粉目、枝孢属、尾孢属、蛹孢蛎壳属、细基格孢属、弯孢属、拟盘多毛孢属、格孢腔菌属、地舌菌属、旋孢腔菌属及其各菌丝碎片(表1)。曝皿法收集鉴定10种真菌,分别为链格孢霉、玉米黑粉霉、枝状枝孢、匍枝根霉、米根霉、棕曲霉、黄曲霉、烟曲霉、新月弯孢属、白地霉。
太原市气传真菌数量与气象要素相关性分析
全年气传真菌数量结合山西气象网站的气象学数据进行统计学处理,结果显示:夏季平均温度、平均相对湿度、平均降水量较其他季度高,风力2级及以上的天数占全年总天数较低,气传真菌数量较多。而冬季平均温度低、相对湿度低,不利于真菌生长,气传真菌数量越少。经Pearson相关分析:风力2级及以上的天数、平均温度、平均相对湿度、平均降水量与全年气传真菌数量呈正相关(r=0.067、r=0.415、r=0.295、r=0.203),具有统计学意义(P<0.05)(表2、3)。
真菌是常见的致敏原,迄今为止已有超过80属真菌被证实可诱发呼吸道变态反应疾病[3]。我国曾于20世纪70至80年代曾进行真菌调查,近20年来随着气候与环境成分变化,需要更新全国气传真菌调查数据。武汉等[4]于20世纪90年代曾行太原市气传真菌调查,发现太原市在6月下旬到7月上旬气传真菌数量最高,之后数量稍回落,10月份又达数量高峰。本次研究中6月至10月太原市气传真菌数量最多,12月至次年2月气传真菌数量较少,说明太原市气传真菌数量达高峰的时间较20年前的调查稍延长,但季节消长规律与武汉等调查基本相符。武汉等[4]曾报道太原市约12种气传真菌,共计数23 447个真菌孢子,本研究通过曝片法收集到太原市2015年3月至2016年2月气传真菌孢子种属共14种,全年气传优势真菌为平脐蠕孢属,其余气传优势真菌依次为:链格孢属、内脐蠕孢属、棒孢属、黑粉目、枝孢属等。曝皿法收集气传真菌10种,共计数10 448个真菌孢子。本研究较前发现新的真菌种属,扩充太原市气传真菌的种类。
表1 太原市2015年3月至2016年2月曝片法气传真菌种类与计数Table 1 Collected count and type of airborne fungi with exposed plate method from March 2015 to February 2016 in Taiyuan
表2 太原市季节气象学资料数据与气传真菌数量Table 2 Seasons meteorology data and numbers of airborne fungi in Taiyuan
表3 太原市全年气传真菌数量与气象要素Pearson相关性分析Table 3 Correlation analysis of airborne fungi quantity one year and meteorology data in Taiyuan
真菌是自然界存在的微生物之一,其生长过程中受到湿度、温度、通风等气候条件的影响,成熟后其孢子与菌丝碎片主要由风力传播。太原市地处北半球中纬度及高原的地理环境,太阳辐射强,受西风环流的影响,夏秋季(6月至8月)气温高、湿度大、降水集中,7月下旬至8月上旬,降水平均为250~280 mm,占全年降水量的58%~65%,平均气温22~24 ℃。夏秋季湿热多雨,利于真菌生长,夏季常见西南风向,利于真菌在市区飘散。而太原市冬季(12月至次年2月)寒冷干燥,多晴朗大风天气,平均气温-9~-5 ℃,降水量平均只有8~14 mm,占全年总降水量的2%~3%,常见西北风向,且风力2级以上,真菌生长条件受到限制[5- 6]。本次调查结合山西省气象网的数据,太原市气传真菌数量消长受到温度、相对湿度、风力影响:其中平均温度与全年气传真菌数量相关性相对较大(r=0.415),其次为平均相对湿度、平均降水量、风力2级及以上的天数(r=0.295、r=0.203、r=0.067),说明温度、湿度是真菌数量增长的重要气象因素,故太原市气传真菌数量高峰集中在夏秋季节(6月至10月),而冬季(12月至次年2月)气传真菌数量较少。风力对于真菌播散发挥重要作用,太原市冬季(12月至次年2月)风力2级及以上的天数虽占全年总天数的17.29%±11.91%,但由于冬季真菌数量较其余三季少,故风力2级及以上的天数与真菌数量相关性较小(r=0.067)。
气传真菌的分布具有一定地域性和季节性差异[7],明确所在地区主要的致敏真菌种类及季节分布规律,为临床真菌所致变应性疾病诊断提供基础理论依据,对真菌致敏性疾病防治具有重要指导意义。
[1]孙鹤龄.医学真菌鉴定初编[M].北京:科学出版社,1987:313- 343.
[2]乔秉善.变态反应实验技术[M].北京:科学出版社,1996:129- 133,176- 180.
[3]Hormer WE,Helbling A, Salvaggio JE, et al. Fungal allergens[J].Clin Micribiol Rev,1995,8:161- 179.
[4]武汉,张世英,王保庆,等.太原地区气传致敏真菌的调查研究[J].中国卫生检验杂志,1994,4:163- 164.
[5]叶世泰,乔秉善,路英述.中国致敏空气真菌学[M].北京:人民卫生出版社,1992: 35- 39.
[6]关凯,王良录.真菌变态反应研究进展[J].中华临床免疫和变态反应杂志,2007,1: 83- 89.
[7]李志强.武汉地区气传真菌调查[J].中华临床免疫和变态反应杂志,2009,3:269- 271.