黄碧莲
(福建省华安县农业局,福建漳州 363800)
猪链球菌病病原分离鉴定及防治试验
黄碧莲
(福建省华安县农业局,福建漳州 363800)
链球菌广泛分布在自然界中,它的生存环境是人和动物的皮肤、黏膜,还有肠道内,传染的途径有呼吸道、创伤面,或被污染的食品等,这种细菌可在人和动物之间相互传染。这些年,在我国一些省、市这种细菌开始流行,主要是发生在猪群中,从而给人的健康带来了严重的危害。本文针对猪链球菌病病原进行分离实验,并提出防治措施。
猪;链球菌病;防治措施
猪链球菌病的发病原因,一般情况由于多种链球菌感染,这种疾病在临床上的表现症状是不同的,通常所见的几种类型为脑膜炎型、败血型、关节炎型、化脓性淋巴结炎型。链球菌在抗原构造上比较复杂,使猪患上链球菌病的病原有很多,传播范围也很广泛。在猪的各种链球菌病中最为典型的是脑膜炎型和急性败血型的链球菌病,而且猪一旦感染上这种疾病,死亡率也特别高,这给养猪的业户和整个养猪业在经济上带来了巨大的损失。为了减少猪这种疾病的发生,便采集了大量的病料,通过实验室开始研究发生这种疾病的原因,特别针对急性败血型和脑膜炎型这两种链球菌疾病进行了病原分离鉴研究,并做了防治试验。具体情况如下:
(1)病原分离实验。如果怀疑某猪患有败血型链球菌病,将此猪在无菌的情况下进行心血的采集,放在硫乙醇盐肉汤中进行培养,过了24 h 后,再置于血液琼脂平板进行接种。如果怀疑某猪患有脑膜炎型链球菌病,可采用接种环将猪脑脊髓液进行钩取,然后置于血液琼脂平板上做进一步的分离培养,在37 ℃的环境下,观察24 h,查看此菌落的特征。此时,对可疑的菌落要采取涂片染色镜的检查,同时进行纯培养,并作生化特性的检查。(2)菌株分群。可用进口的兰氏分群试剂盒对菌株进行分群。(3)药敏试验。把分离出来的菌株涂在鲜血琼脂平板上,涂布的时候要均匀,然后分别贴上不同种类的药敏试片,即庆大霉素环丙沙星、卡那霉素、硫酸新霉素、四环素、先锋霉素V 、阿米卡星、氟哌酸、青霉素。在温度37℃ 的环境下进行培养,时间为24h,同时,要对病猪采取药物治疗,药物性质为敏感性的。(4)动物感染试验。实验的动物是10只小白鼠,均为非常健康的。把分离的菌株于鲜血琼脂平板进行培养,时间为24 h,培养物要用生理盐水进行适当的稀释;使之生成悬浊液。这时候,便可进行实验了,首先取来已经备好的5只健康小白鼠,然后对其进行腹腔注射,接种的计量为每只小白鼠注射0.2 ml,另外的5只健康小白鼠,给它们注射生理盐水,计量为每只小白鼠注射0.2 ml,然后对两组小白鼠进行观察对比。(5)研制二价铝胶灭活苗。把分离出来的C群的菌株,还有D群的菌株置于血清肉汤中进行增菌培养,将菌体浓度调整为30亿/ml,在经过甲醛灭活以后,把20%的氢氧化铝胶加到里面,摇动使其均匀,之后,按照通常的方法对其进行以下检验,安全检验、无菌检验,还有效力检验,确定检验合格后,进入预防试验环节,对于免疫的猪,不论大小,重量多少,所有的猪免疫次数都要达到两次,时间上要每隔15 d免疫以此,第1 次免疫的计量为每头猪5ml,第2次每头猪免疫的计量为 10ml,对猪群进行免疫后,要细心观察每头猪的变化情况,并详细的做好记录[1]。
(1)病原实验结果:从怀疑的患病猪群中分离出的细菌有12株,分离率是 60%,分离出的菌体重新生长出灰白色的菌体,这些菌体呈湿润、光滑状态,形状为圆形,呈β溶血,在通过革兰氏染色镜检查后得出,分离菌为阳性的球菌,排列形状为链状。(2)药敏试验结果:通过以上9 种抗生素的实验得出,抑菌性最强的可谓阿米卡星和先锋霉素Ⅴ,居第二位的是卡那霉素、庆大霉素、氟哌酸、硫酸新霉素;最不敏感的是环丙沙星、四环素、青霉素。(3)小白鼠试验结果:小白鼠在感染了病菌后6h发生死亡,12h后所有小白鼠死亡。死的小白鼠的肝、脾、肾发生肿大,膀胱极度充血,胸腔有积液,通过镜检发现,有大量的革兰氏阳性球菌,或单个或成对、短链。对比的另外5只小白鼠正常。(4)研制二价铝胶灭活苗实验结果:实验结果,检查三项完全合格,免疫率在临床上也是很高的[2]。
将怀疑患病的猪带到实验室就诊,如果怀疑此猪患上了败血型链球菌病,可采取肌肉注射法进行治疗,注射的药物为齐鲁制菌磺,使用计量为每1kg体重的猪为0.15 ml,注射次数 1次就可以,如果有必要,可在第3d再进行注射1次。所采用的药物还有磺胺嘧啶钠,这也是一种注射液,注射的计量为每1kg体重的猪为 0.07 g,采用的是肌肉注射法,注射次数为每日2次,要连续注射3d。同时,还要给猪进行注射板蓝根注射液,也是采取肌肉注射法,计量为每次给每头猪为 5~10 ml,次数为每日2次,可连续3 d。在采取以上治疗的同时,还要使用猪排疫肽配合着进行治疗,计量为每头猪为2ml,次数为每日1次,连续3d,采用肌肉注射法。以上这种治疗方法对患有急性病的猪效果也很好,特别是患有脑膜炎型和混合感染病的猪。除以上治疗外,还要给仔猪进行口服电解质、多维防御疾病的发生。
猪场对常用抗生素使用不规范,造成了猪链球菌产生了强烈的抗药性,但没有使用过的药剂和新药还是比较敏感的,如先锋霉素、阿米卡星,在临床上也获得较好的疗效。
[1]吴静,贾桂珍.猪链球菌病病原的分离鉴定及药敏试验[J].江苏农业科学,2011,(6):350-351.
[2]蒋新华,邓舜洲,张文波,等.猪链球菌病病原的分离鉴定及药敏试验[J].中国畜牧兽医,2011,(12):171-172.